shRNA-STAT3增强胶质瘤干细胞放射敏感性的研究

目的：从人胶质瘤U251细胞系分离培养胶质瘤干细胞样细胞，鉴定其放射敏感性，并考察信号转导与转录活化因子3(selleck化学signalimmune stress transducer and activator of transDorsomorphincription 3,STAT3)基因与胶质瘤干细胞放射敏感性的关系。方法 ：采用磁珠分选法分离CD133~+胶质瘤U251细胞，并对CD133~+U251细胞进行成球能力及放射敏感性检测。分别构建STAT3基因的shRNA沉默表达质粒和慢病毒过表达质粒并鉴定，再转染CD133~+U251细胞，通过流式细胞术、Western blot考察STAT3表达与胶质瘤细胞放射敏感性的关系。结果：经磁珠分选的CD133~+U251细胞有较强成球生长能力。经2、4、6、8和10 Gy剂量射线照射后，CD133~+组细胞抑制率明显低于CD133-组和正常细胞组（P=0.000），且细胞凋亡比例更低。转染STAT3基因shRNA沉默表达质粒和慢病毒过表达质粒的CD133~+U251细胞通过Western blot检测发现沉默组中STAT3蛋白表达降低。经2、4、6、8和10 Gy剂量射线照射后，STAT3沉默组相较于STAT3过表达组有更高的细胞抑制率（P=0.000），且细胞周期抑制及凋亡增加。结论：磁珠分选的CD133~+胶质瘤细胞有放射性抵抗的干性特征，下调STAT3表达可提高胶质瘤细胞的放射敏感性。