三阴性乳腺癌由于其异质性高、复发Ipatasertib核磁率高、转移率高、预后差等特点临床极难治愈。最新研究显示三阴性乳腺癌对氧化应激引起的细胞铁死亡具有高度敏感性,因此铁死亡可能是三阴性乳腺癌治疗的潜在靶点。铁死亡是近年来发现的一种非凋亡性的新型细胞程序性死亡方式,其发生主要依赖于铁离子积累诱导膜上过氧化脂质聚集引起细胞膜破裂,而细胞中铁离子主要储存在线粒体中,因此线粒体在细胞铁死亡调控中发挥重要作用。研究发现,氧化应激引起线粒体损伤介导的线粒体铁离子外流是调控细胞铁死亡的重要因素,但其内在调控分子机制仍有待于进一步阐明。过氧化物还原酶1(PrxⅠ)是主要存在于细胞质基质中的2-Cys Prxs家族的一员,被报道为一种对氧化应激高度敏感的抗氧化蛋白,但其对铁死亡的调控作用知之甚少。前期研究发现三阴性乳腺癌患者样本中PrxⅠ高表达,且此类患者预后不良比率显著升高,铁死亡促进剂Erastin可上调人三阴性乳腺癌细胞系(MDA-MB-436)PrxⅠ蛋白的表达,且Erastin促进PrxⅠ敲降的MDA-MB-436细胞系线粒体损伤,提示PrxⅠ可能通过保护线粒体氧化损伤调控铁死亡。因此,本文以MDA-MB-436细胞为研究对象,探究氧化应激介导的线粒体损伤在铁死亡中的作用机理,阐明PrxⅠ对Erastin诱导MDA-MB-436细胞铁死亡Liraglutide体内的调控作用及其分子机制,为三阴性乳腺癌铁死亡提供基础理论,为三阴性乳腺癌的治疗提供分子靶标。本研究通过慢病毒载体构建PrxⅠ基因敲降MDA-MB-436细胞系,采用不同浓度Erastin处理Mock MDA-MB-436(空白载体对照组),sh PrxⅠMDA-MB-436(PrxⅠ基因敲降组)细胞,通过MTT Assay检测细胞生存率;利用荧光显微镜检测Erastin处理下细胞内以及线粒体ROS水平和线粒体膜电位变化情况;通过铁离子检测试剂盒Suppressed immune defence和丙二醛检测试剂盒检测细胞内铁离子和丙二醛水平;蛋白质免疫印迹技术检测PI3K/Akt/GSK3β信号通路,细胞铁死亡相关蛋白表达水平,细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果表明sh PrxⅠMDA-MB-436细胞内和线粒体内活性氧水平、铁离子水平、丙二醛水平显著上升,铁死亡相关蛋白HO-1、P53表达水平升高,GSK3β表达水平上升,P-PI3K、PI3K、P-Akt、Akt表达水平下降,铁死亡调控蛋白NRF2蛋白表达水平下降,p-GSK3β表达水平下降,凋亡蛋白表达水平无统计学差异。通过预处理活性氧清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)、GSK3β抑制剂(Licl)和Akt激活剂(SC79)均能抑制PrxⅠ调控的铁死亡的发生。综上所述我们得出以下结论:1、敲降PrxⅠ促进Erastin诱导的MDA-MB-436细胞铁死亡;2、敲降PrxⅠ增加Erastin诱导MDA-MB-436细胞线粒体活性氧蓄积和线粒体损伤;3、敲降PrxⅠ通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路诱导线粒体外膜VDAC通道开放促进线粒体铁离子外流。总而言之,本文阐述了PrxⅠ调控三阴性乳腺癌细胞铁死亡的分子机制,为铁死亡的研究提供理论基础,为三阴性乳腺癌治疗提供新思路。