SRC信号通路

目的：利用网络药理学结合指纹图谱技术探讨槐花散（Sophora japonica powder，槐花散）抗溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）的作用机制与潜在质量标志物。方法：采用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）检索各药味的活性成分，以UC为疾病背景构建网络图，预测槐花散抗UC药效作用靶点，采用UC动物模型对预测靶点进行实验验证；收集不同厂家共10批次槐花散测定指纹图谱，筛选槐花散潜在质量标志AMPK抑制剂物，并利用分子对接对槐花散潜在质量标志物和预测靶点进行虚拟验证。结果：通过网络药理学预测得到25个槐花散的活rifampin-mediated haemolysis性成分和105个共有靶点，通过分析筛选出槐花散共5个潜在药效靶点为白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1β、蛋白激酶（AKT1）、抑癌基因（TP53）。体内实验结果表明槐花散能明显改善UC小鼠的便血症状和疾病活动指数，增加UC小鼠的体质量，降低血清中促炎因子TNF-α、IL-6的含量；同时，下调小鼠结肠组织中的TNF-α、IL-1β和Akt1 mRNA的表达，以及上调IL-6、TP53 mRNA的表达。通过指纹图谱共获得8个共GSK1349572核磁有峰，筛选并指认出5个潜在质量标志物，将其与上述靶点进行分子对接，发现槲皮苷、胡薄荷酮、新橙皮苷及柚皮苷与5个靶点的结合能均小于-4 kJ/mol。结论：槐花散调节IL-6、TNF-α、IL-1β、AKT1及TP53等靶点改善小鼠溃疡性结肠炎，可能与槐花散中质量标志物作用于上述靶点有关。

目的 探讨乳腺癌患者叶酸(FA)、维生素B_(12)(VitB_(12))、铁蛋白(SF)水平变化及临床意义。方法选取寻找更多2016年6月至2020年6月该院收治的156例乳genetic discrimination腺癌患者作为乳腺癌组,另选取同期进行体检的133例乳腺良性肿块女性作为对照组。根据化疗效果,将乳腺癌组分为病理缓解组(pCR组)和残留癌组(RD组)。分别比较乳腺癌组与对照组、不同临床特征、不同化疗效果乳腺癌患者血清FA、VitB_(12)、SF水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清FA、VitB_(12)、SF联合检测对乳腺癌化疗效果的预测价值。结果 乳腺癌组化疗前血清FA、VitB_(12)水平低于对照组,血清SF水平高于对照组(P<0.05);乳腺癌组化疗后血清FA、VitB_(12)水平高于化疗前,血清SF水平低于化疗前(P<0.05);不同TNM分期、有无淋巴结转移的乳腺癌患者血清FA、SF水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);pCR组乳腺癌血清FA、VitB_(12)水平高于RD组,血清SF水平低于RD组(P CH-223191作用<0.05);ROC曲线分析显示,血清FA、VitB_(12)、SF联合检测预测乳腺癌化疗效果的曲线下面积(AUC)高于单一检测。结论 乳腺癌患者存在明显血清FA、VitB_(12)、SF水平异常,FA、VitB_(12)、SF联合检测对乳腺癌化疗效果预测价值较高。

目的 运用OPLS-DA和人工神经网络算法发掘和研究血细胞参数对乳腺癌的诊断价值。方法 收集乳腺癌患者和健康女性的血细胞参数，通过OPLS-DA发掘两者之间的主要差异血细胞参数；通过ROC法计算SCH772984主要差异参数对乳腺癌诊断的灵敏度和特异性；基于主要差异参数，建立神经网络诊断模型，用于乳腺癌的诊断预测。结果 OPLS-DA提示基于血细胞参数，乳腺癌患者和健康女性之间存在显著差异，平均血小板体积（MPV）、嗜碱性粒细胞绝对值（BA#）、血小板计数（PLT）、平均红细胞体积（MCV）、红细胞计数（RBC）和淋巴细胞绝对值（LY#）是两组之间的主要差异参数。上述参数对乳腺癌诊断特异性分别为0.564、0.983、0.622、0.674、0.immunological ageing878和0.762，灵敏度分别为0.819、0.614、0.618、0.561、0.393和0.514,ROC曲线下面积（AUC）分别为0.773、0.793、0.657、0.649、Laduviglusib小鼠0.643和0.635。基于6种主要参数，通过逆向传播算法经16 862次迭代建立人工神经网络模型，对乳腺癌预测的灵敏度为0.941 2，特异性为0.795 5。结论 本文通过OPLS-DA算法发掘了乳腺癌患者和健康女性之间的主要差异血细胞参数，成功建立了人工神经网络的乳腺癌预测模型，对乳腺癌的诊断筛查具有一定价值。

目的：探讨原发性肝癌患者预后的危险因素，为该病患者的临床诊疗和预后判断提供科学依据。方法：以2018年监测、流行病学和结果（Surveillance,Epidemiology,and End Results,SEER）数据库原发性肝癌患者作为研究对象，收集人口学资料、临床指标和预后随访信息，运用单因素和多因素logistic回归分析影响患者术后生存的危险因素。采用一致性指数评价模型的预测能力，构建受试者工作特征曲线分析预测模型的效能。采用绘制森林图的方法对不同分期下肝癌患者的治疗方式进行分析。结果：该研究GW-572016共收集2018年原发性肝癌患者1 750例。单因素logistic回归结果表明，肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移、婚姻状况、放化疗及手术是影响原发性肝癌患者生存的危险因素（P<0.05）；多因素logistic回归分析结果表明，肿瘤分期[T2/T3相对于T1,OR=5.142/3.390,95%CI=(3.654～7.236)/（2.327～4.939）,P<0.001]、远处转移（OR=4.810,95%CI=3.384～6.839,P<0.001）、婚姻状况（OR=0.729,95%CI=0.575～0.925,P=0.009）、放疗（OR=0.361,95%CI=0.260～0.503,P<0.001）、化疗（OR=0.512,95%CI=0.381～0.687,P=0.001）以及手术（OR=0.245,95%CI=0.105～0.574,P=0.028）是影响肝癌患者生存的危险因素。将logistic回归中有意义的变量如肿瘤分期、远处转移、婚姻状况、放化疗和手术情况进行预测模型的构建，研究显示该模型一致性指数为0.786(95%CI=0.762～0.810)，曲线下面积（area under the curve,AUC）为0.790(95%CI=0.764～0.812)。仅放疗这种干预方式在任何肿瘤分期的患者中都展现出了优势（P=0.003、P=0.013、P=0.003）。在未发生淋巴结转移的患者中无论哪种干预方式都会降低Refrigeration肝癌患者的病死率（P<0.001,P=0.001,P<0.001,P=0.004），但是在发生淋巴结转移的患者中，是否进行干预对肝癌患者的生存没有影响（P>0.05）。在未发生远处转移的患者中，仅进行放疗、化疗或化疗+放疗干预方式的患者与未进行干预的患者相比生存率更高（P<0.001,P=0.001,P<0.001,P=0.004），在发生远处转移的患者中，仅进行放疗的干预方式展现出优势（P=0.002）。结论：肿瘤分期、远处转移、婚姻状况BI 10773浓度、放化疗和手术情况是影响原发性肝癌预后的危险因素。

目的：基于lncRNA AL158206.1-ceRNA-miRNA-19a-3p对叉头框蛋白P1(forkhead box protein P1,FOXP1)的调控探索重楼皂苷VII(Paris saponin VII,PP7)抑制非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer,NSCLC）细胞的分子机制。方法：Targetscan软件预测miRNA-19a-3p与FOXP1 mRNA 3’非编码区（3’untranslated region,3’UTR）的结合；Starbase软件预测miRNA-19a-3p与lncRNA AL158206.1的结合，并通过TCGA数据库阐述miRNA-19a-3p与lncRNA AL158206.1在多个肿瘤中的表达关系；Western blot和qPCR实验检测多种NSCLC中FOXP1、lncRNA AL158206.1和miRNA-19a-3p的表达；MTT检测PP7对HCC827活力的影响；选取2、4、8μmol/L浓度的PP7resolved HBV infection干预HCC827细胞24 h(n=3)，同时采用短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默技术构建lncRNA AL158206.1RNA沉默慢病毒载体，并合成miRNA-19a-3p的抑制剂（miRNA inhibitor），转染细胞，分组干预，分组如下：空白组（无任何处理的正常培养细胞）、shRNA lncRNA组（转染shRNA慢病毒载体沉默lncRNA AL158206.1）、miRNA inhibitor组（转染miRNA inhibitor下调miRNA-19a-3p）、PP7组（4μmol/L PP7干预细胞24 h）、PP7+shRNA lncRNA组（在沉默lncRNA AL158206.1基础上用4μmol/L PP7干预细胞24 h）、PP7+shRNA lncRNA+miRNA inhibitors组（在沉默lncRNA AL158206.1和用4μmol/L PP7干预细胞24 h的基础上再用miRNA inhibitors转染细胞）（n=3），分别用流式细胞术检测各组细胞凋亡变化，caspase-3/7活性检测试剂盒检测各组细胞中caspase-3/7活性，Western blot与qPCR实验检测各组细胞中miRNA-19a-3p、FOXP1、lncRNA AL158206.1的表达。结果：预测显示miRNA-19aPCI-32765说明书-3p与FOXP1 mRNA 3,-UTR具有特异性结合位点，miRNA-19a-3p与lncRNA AL158206.1具有特异性结合位点。进一步分析显示在多个肿瘤中miRNA-19a-3p与lncRNA AL158206.1具有显著负相关性（P<0.05）。在多个NSCLC中，相对于正常BEAS-2B细胞，HCC827细胞中FOXP1、lncRNA AL158206.1和miRNA-19a-3p的表达变化最显著（P<0.01）。PP7可时间-浓度依赖地抑制HCC827细胞活力，诱导HCC827细胞凋亡（P<0.01），上调HCC827细胞中caspase-3/7活性（P<0.01），提高HCC827细胞中FOXP1、lncRNA AL158206.1表达量（P<0.01），而抑制miRNA-19a-3p的表达（P<0.01）。进一步显示HCC827细胞中lncRNA AL158206.1的沉默并未影响细胞凋亡和caspase-3/7活性，但可提高miRNA-19a-3p的表达（P<0.01），抑制FOXP1 mRNA和蛋白表达（P<0.01）；加入miRNA-19a-3p抑制剂和PP7单独干预后可显著促进HCC827细胞凋亡和caspase-3/7活性（P<0.01），提高lncRNA AL158206.1和FOXP1表达（P<0.01），抑制miRNA-19a-3p表达（P<0.01）。沉默lncRNA AL158206.1可逆转PP7对HCC827细胞凋亡和caspase-3/7活性的影响以及对lncRNA AL158206.1、miRNA-19a-3p、FOXP1表达的影响（P<0.01）。加入miRNA-19a-3p抑制剂可逆转lncRNA AL158206.1沉默对确认细节PP7对细胞凋亡和caspase-3/7活性以及miRNA-19a-3p、FOXP1表达的逆转作用（P<0.01）。结论：PP7可通过增强lncRNA AL158206.1-ceRNA-miRNA-19a-3p作用，降低miRNA-19a-3p对FOXP1表达抑制作用，从而提高FOXP1的表达，抑制NSCLC。

顶复门原虫的AP2结构域蛋白(ApiAP2)可能是调控虫体生长发育的转录因子。本研究旨在克隆、表达毒害艾美耳球虫ApiAP2转录因子，检测其天然蛋白及其在虫体内的亚细胞定位。以毒害艾美耳球虫第3代裂殖子的总RNA为模板，RT-PCR扩增毒害艾美耳球虫EnApiAP2基因后，连接至pMD18-T载体，测序后构建pET28a(+)-EnApiAP2表达载体，转化至表达菌BL21(DE3),重组菌经测序鉴定后诱导表达，并纯化复性重组蛋白。用重组蛋白免疫BALB/c小鼠，制备鼠抗rEnApiAP2多克隆抗体。利用多克隆抗体，分别用Western blot和间接免疫荧光试验检测裂殖子中天然EnApiAP2蛋白及其定位。最后，应用荧光定量PCR分析EnApiAP2基因在第2、3代裂殖子中的转录水平。结果显示，该基因全长1 830 bp,编码610个氨基酸，含有一个AP2结构域，预测分子质量67.69 ku;重组蛋白大小约为74 ku,主要以包涵体形式存在，可以被6×HIS标签单抗、鸡抗毒害艾美耳球虫康复血清和鸡抗柔嫩艾美耳球虫康复血清识别；在第3代裂殖子中检测到天然EnApiAP2蛋selleckchem MRTX1133白，分子质量约为85 ku; EnApiAP2蛋白定位在第2、3代裂殖子细胞核内；第3代裂殖子EnApiAP2转录水平显著高于第2代裂殖子(P<0.01)。成功克隆、表达了EnApiAP2基因，证实该基因表达的蛋白定位在裂殖子biorational pest control的细胞核内，为进一步研究EnApiAP2蛋白的转录因子功能奠定了基PEG300说明书础。

目的 建立检测胎盘生长因子（placental growth factor,PLGF)的时间分辨荧光免疫分析法（time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA），并对其性能进行评价。方法 利用捕获PLGF单克隆抗体包被微孔板，铕标记检测PLGF单克隆抗体，建立一种双抗体夹心TRFIARepSox小鼠定量测定孕妇血清中的PLGF浓度。对该方法的检测低限、生物检测限、功能灵敏度、精密度、线性、干扰试验、交叉反应试验和HOOK效应等性能指标进行评价。选择125例孕期在9～40周，无溶血、黄疸和脂血的孕妇血清剩余样本，用于方法学比对研究，比对试验结果的相关性采用线性回归分析。结果该方法的捕获抗体包被浓度为7.0μg/ml，铕标记物Molecular Diagnostics使用工作稀释度为1:500，样本最适反应时间为90 min，检测低限为1.00 pg/ml，生物检测限为8.00 pg/ml，功能灵敏度为10.00 pg/ml，批内CV和批间CV均在5.00%以内，线性范围为9.00～10 500.00 pg/ml，分别在低浓度和高浓度质控品中添加有干扰物质的16种干扰样本与基础样本检测VP-16配制结果的相对偏倚在-3.49%～2.20%内；检测5 000 pg/ml糖基化PLGF-1,5 000 pg/ml糖基化PLGF-2,5 000 pg/ml未糖基化PLGF-3,10 000 pg/ml未糖基化血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)/PLGF-1异二聚体，50 000pg/ml糖基化VEGF165和40 000 pg/ml可溶性FMS样酪氨酸激酶-1，交叉反应率分别为41.82%,27.86%,19.68%,0.042%,0.063%和0.004 5%；检测样品PLGF浓度高达115 000 pg/ml时仍未出现HOOK效应；样本PLGF浓度在5.74～4 197.00 pg/ml间，与电化学发光法（electrochemiluminescence,ECL）检测结果的线性回归方程为Y=1.070 9X-30.192,(r=0.980 6, tr=55.42,P <0.05)。结论 该方法灵敏度高、精密度好、线性范围宽、抗干扰能力强、特异度好、检测范围宽，与参比方法检测结果的相关性良好，可以满足临床需要。

目的 总结晚发型（LO-NMOSDs）和极晚发型视神经脊髓炎谱系疾病（VLO-NMOSDs）临床特征、治疗方案及预后。方法 纳入2015年1月至2021年12月首都医科大学附属北京同仁医院收治的68例首次发作的视神经脊髓炎谱系疾病病例，包括55例LO-NMOSDs和13例VLO-NMOSDs，对Sulfate-reducing bioreactor比分析二者性别、发病特点（首发症状）、残疾程度[扩展残疾状态量表（EDSS）评分]、合并症（自身免疫性疾病或肿瘤）、血清抗水通道蛋白4(AQP4)抗体和自身免疫抗体表达变化、视神经和脊髓影像学特点、治疗及预后。结果 与LO-NMOSDs患者相比，VLO-NMOSDs患者发病达峰时EDSS评分更高（Z=-2.119,P=0.034），而性别、首发症状、合并其他自身免疫性疾病或肿瘤、血清抗AQP4抗体和自身免疫抗体阳性率、视神经和脊髓受累部位、治疗方案、急性期治疗后14 d内EDselleckchem PexidartinibSS评分等项指标组间差异无统计学意义（均Taurine溶解度P> 0.05）。结论 VLO-NMOSDs与LO-NMOSDs患者具有相似的人口学特征、临床特征、治疗方案和短期预后，但前者发病达峰时残疾程度更严重，未来将进一步探究其长期预后。

目的探讨乳腺浸润性筛状癌的临床病理特征、预后及相关影响因素。方法选择2010—2016年美国国立癌症研究监测、流行病学和最终结局(SEER)数据库中诊断为乳腺浸润性筛状癌的388例病例资料,回顾性分析其临床病理特征与生存情况,及其预后影响因素。结果在388例病人中,287例(74.0%)为T1期,321例(82.7%)为N0期,374例(96.4%)接受手术治疗,Wnt-C59化学结构204例(52.6%)接受放疗,85例(21.9%)接受化疗。病人3、5年总体MLN8237供应商生存率分别为94.4%、88.4%。单因素分析显示,年龄、婚姻状态、T分期、M分期、手术、放疗是影响乳腺浸润性筛状癌病人生存预后的相关因素(P<0.05)。多因素分析显示,年龄、T分期、M分期、放疗是影响乳腺浸润性筛状癌病人预后的独立危险因素(P<0.05)。结论影响浸润性筛状癌病人预后的独立危险因素包括年龄、T分期、M分期。放疗对浸润性筛porous medium状癌病人的生存率是否有益仍需对浸润性筛状癌进一步深入研究。

目的 探究WNT通路分子C-myc癌基因(C-myc)和β-连环蛋白(β-catenin)与原发性肝癌患者肝癌的恶性程度、临床分级、转移及患者的预后关系。方法 选择2019年1月至2022年1月LBH589供应商在邯郸市中心医院收治的肝癌患者84例作为观察组，同时收集肝硬化患者和乙型肝炎患者共60例作为对照组，收集患者病理组织标本，采用免疫组化法检测两组患者组织中C-myc和β-catenin的表达水平，分析C-myc、β-catenin与原发性肝癌患者临床病理特征的关系及患者预后的关系。结果 观察组C-myc和β-cGSK126纯度atenin的阳性率均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.01);高甲胎蛋白(AFP)水平、无high-biomass economic plants包膜或包膜不完整、低中分化肿瘤、临床分期为Ⅲ～Ⅳ期、病理类型为胆管上皮癌、混合型肝癌及出现肝内外转移的肝癌患者C-myc和β-catenin阳性率较高，差异有统计学意义(P<0.01);肝癌患者1、2、3年生存率分别为71.31%、52.35%、36.20%,随访3年存活患者的C-myc和β-catenin阳性率低于1年及2年存活患者，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 组织中C-myc和β-catenin阳性率与原发性肝癌患者AFP水平、肿瘤包膜情况、分化程度、临床分期、组织学类型及预后具有一定关系。