目的:随着我国社会发展和医疗水平的不断提高,人民预期寿命逐渐延长,我国即将步入老龄化社会。认知功能的减退是衰老最明显的特征之一,预防和改善衰老过程中认知功能的减退是老龄化社会的一个巨大挑战。早在人生的第三个十年,人类的核心认知能力,包括处理速度、推理、情景记忆和空间可视化能力就已经开始下降。多元增长曲线模型显示认知功能的减退不是老年期的急剧下降,而是在整个生命周期中持续小幅的下降。因此早期、长时程的干预对于预防和改善衰老造成的认知功能减退是十分重要的。目前的观点认为早在痴呆症状出现前的20年或更早就已经出现神经病理的改变,并且这种病理改变一旦出现就很难被逆转。因此,我们需要寻找一种临床处方量大、干预时间早、治疗时程长的干预手段作为研究的目标更符合临床实际情况且更具现实意义。近年来大量的研究发现使用他汀类药物可有效地减少认知能力下降及神经退行性疾病的发生。基于目前的循证医学证据,大量人群从中年就开始长期服用他汀类药物,其主要目的是降脂或稳定斑块,而此时他们几乎未出现过认知减退的症状。目前许多临床研究几乎都只观察了服用他汀类药物对患者几年内的效应,而长期服用他汀类药物对机体整体功能的影响,包括认知功能的长远影响目前尚不清楚。因此,本研究选择他汀类药物作为干预手段是最符合目前临床用药情况和病理生理机制的。综上,本研究使用阿托伐他汀对自然衰老的大鼠进行早期、长时程干预以探究治疗认知功能减退的潜在靶点。蛋白质翻译后修饰在各种生物途径中发挥着重要的作用,调控众多重要的细胞过程,包括酶的激活、蛋白质的定位和降解。赖氨酸巴豆酰化是一种近年来新发现的组蛋白翻译后修饰,可以参与细胞代谢、细胞周期和细胞重组过程。同时有研究揭示了巴豆酰化在认知功能障碍中起到调控表观遗传的作用。鉴于此,本研究在前两部分进行了蛋白质组学及巴豆酰化修饰组学研究,并对发现的潜在治疗靶点进行机制研究。微生物-肠道-大脑轴在神经系统的调控中发挥着重要作用。最近的一些研究证实,肠道菌群、脑部炎症和认知障碍是密切相关的。阿托伐他汀已被发现可以减少神经炎症的损害,并改善小鼠的认知功能。然而,阿托伐他汀是否能通过微生物-肠道-大脑轴来减少神经炎症仍不清楚。因此本研究在第三部分探究了微生物-肠道-大脑轴参与该效应的机制。综上,本研究拟采用不同剂量的阿托伐他汀对自然衰老的大鼠模型进行长期干预。通过蛋白质组学、蛋白质修饰组学Alpelisib临床试验、宏基因组微生物分类测序的方法探究长期阿托伐他汀对认知功能影响的潜在靶点,并探究其发生机制。研究方法:本研究共分三个部分:第一部分通过认知行为学、蛋白质组学研究探索长期他汀干预改善认知功能的潜在靶点;第二部分通过细胞学实验探索机制;第三部分通过肠道微生物组及免疫学实验探究长期他汀干预改善认知功能与微生物-肠道-大脑轴的机制。第一部分:采用成年雄性SD大鼠(9月龄)共30只进行研究。随机分为对照组(生理盐水0.5ml/d灌胃,10只)、低剂量组(阿托伐他汀2.1mg/kg·d~(-1)灌胃,10只)、高剂量组(阿托伐他汀8.4mg/kg·d~(-1)灌胃,10只)。分别通过Y迷宫实验、新事物识别实验、Morris水迷宫实验三种方法对大鼠的认知行为学进行评估;基于蛋白质组学及蛋白质修饰组学技术,通过GO分析等方法对差异蛋白进行筛选;通过蛋白质印记法对筛选出的蛋白进行验证,并通过单分子免疫阵列分析对相关血液指标进行检测;通过免疫荧光双染的方法进行定位分析。第二部分:分离培养大鼠海马神经元细胞,并通过免疫共沉淀、细胞转染、蛋白质印记法、PCR反应等方法对神经丝轻链(neurofilament light chain,NFL)的多种修饰调控及相关位点进行了研究。第三部分:通过16s RNA微生物组测序及微生物群落分析对大鼠肠道菌群进行了分析;根据菌群的分析结果进一步通过细胞分离实验、流式细胞检测、液相色谱-质谱联用、蛋白质印记法、PCR、免疫荧光染色等方法探究他汀类药物通过微生物-肠道-大脑轴改善认知功能的机制。结果:1.行为学及蛋白质组学结果:Y迷宫实验、新事物识别实验结果均显示短期(3个月)干预未对大鼠认知功能评分产生明显影响;而长期干预(9个月)时,高剂量阿托伐他汀干预组的认知功能评分明显高于对照组。Morris水迷宫实验结果显示高剂量阿托伐他汀干预组的空间学习能力及空间记忆能力均显著高于对照组。蛋白质组学结果发现高剂量阿托伐他汀干预会显著下调NFL的蛋白表达量;巴豆酰化修饰组学结果显示高剂量阿托伐他汀干预会显著下调NFL在K272位点上的巴豆酰化修饰水平。结合上述结果,筛选出NFL作为本研究的目的蛋白,并通过蛋白质印记法对组学结果进行验证。同时我们使用单分子阵列技术对血液中的NFL进行测定,结果显示高剂量他汀干预组血清中的NFL较对照组明显下降。为了验证NFL与认知功能衰退的关系,通过免疫荧光双染对NFL和神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFT)进行了共定位,各组结果均显示NFL与NFT共定位重合度极高并随着年龄的增长而增多,在给予阿托伐他汀干预后下降,其中高剂量干预组的趋势更为显著。2.细胞学实验验证结果:通过数据库分析发现在NFL的K272位点上同时存在泛素化修饰,通过免疫共沉淀方法验证了长期阿托伐他汀干预可以下调NFL的巴豆酰化水平并上调NFL的泛素化水平。免疫共沉淀联合质谱分析筛选出沉默调节蛋白2(silenMyoglobin immunohistochemistryt information regulator 2,SIRT2)可能与NFL发生蛋白互作,并通过免疫共沉淀实验发现长期阿托伐他汀可以提高SIRT2与NFL的互作并能提高SIRT2的酶活性。通过SIRT2特异性抑制剂AGK2处理神经元细胞后,NFL的蛋白表达量上升、巴豆酰化水平上升,而泛素化水平下降。神经元细胞SIRT2过表达后,NFL的巴豆酰化水平下降,泛素化水平上升。阿托伐他汀可以通过SIRT2调控NFL的巴豆酰化水平及泛素化水平。对NFL K272位点进行突变后,NFL的巴豆酰化水平总体下降,泛素化水平总体无明显变化。在过表达SIRT2后,可以上调NFL的泛素化修饰水平,而在NFL K272位点突变后,过表达SIRT2造成的泛素化修饰水平升高程度显著降低。3.肠道微生物组及免疫学研究结果:液相色谱-质谱联用结果显示高剂量干预组的视黄酸(retinoic acid,RA)、视黄醇(retinol,ROH)及视黄醇脱氢酶7(retinol dehydrogenase 7,Rdh7)的表达水平显著高于对照组,视黄酸酯(retinyl esters,RE)则显著减少。流式细胞分析结果显示高剂量干预组的调节性T细胞(Regulatory cells,T_(reg))显著高于对照组,而IL-17~+γδT显著低于对照组。高剂量干预组海马组织中白细胞介素17(interleukin 17,IL-17)明显低于对照组。大鼠粪便16s RNA微生物组测序及微生物群落分析中α多样性分析结果显示高剂量干预组的ACE指数、observed species指数、PD whole tree指数均显著高于对照组。β多样性分析结果发现高剂量干预组与其余各组的菌群有显著差异,在基线时大鼠肠道菌群的显著差异菌为梭状芽孢杆菌、疣微菌,而在长期高剂量干预后的显著差异菌为乳酸菌和巴氏杆菌。结论:1.长期高剂量阿托伐他汀干预显著改善了自然衰老大鼠的认知功能减退。2.长期阿托伐他汀干预通过增加SIRT2的表达下调NFL K272位点的巴豆酰化修饰水平,进而上调泛素化修饰水平使NFL表达降低,最终减少NFT来改善认知功能。3.长期阿托伐他汀干预可以增加肠道菌群多样性,并增加益生菌群的丰度。4.长期阿托伐他汀干预可以改变Rdh7在肠道的表达来影响RA的代谢,进而导致肠道T_(reg)细胞的增殖并抑制IL-17~+γδT细胞的功能,最终减少IL-17在海马区Naporafenib的表达来改善认知功能。
曲伏前列素滴眼液联合倍他洛尔对原发性开角型青光眼患者眼部血流动力学及血清细胞因子水平的影响
目的 探究曲伏前列素滴眼液与倍他洛尔联合应用治疗原发性开角型青光眼的效果及对患者血流动力学及血清细胞因子的影响。方法 选择2020年3月—2022年2月于威海市妇幼保健院接受检查及治疗的122例原发性开角型青光眼患者(244只患眼)的病历资料进行回顾性分析,并以治疗方式的不同作为分组依据,将研究对象分为联合治疗组(n=62,共124只患眼)和单纯治疗组(n=60,共120只患眼)。单纯治疗组使用倍他洛尔进行治疗,在单纯治疗组的基础上为联合治疗组增加使用曲伏前列素滴眼液进行治疗,治疗结束后对比两组患者的眼部血流动力学、血清细胞因子水平以及不良反应发生情况。结果 治疗后,两组患者的眼部视网膜中央动脉的bioceramic characterization血流动力学及血清细BMN 673 NMR胞因子较治疗前显著改善(P<0.05),其中联合治疗组的收缩期峰值的血流速度、舒张末期的血流速度以及白介素-6高于单纯治疗组,而血管阻力指数、白介素-4以及白介素-12低于单纯治疗组(P<0.05);联合治疗组的不良反应发生率与单LY294002半抑制浓度纯治疗组不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 对原发性开角型青光眼患者采取曲伏前列素滴眼液联合倍他洛尔的治疗方式,能够通过有效降低眼压、提高眼部局部的血流灌注、降低血清细胞因子水平达到显著的治疗效果,同时安全性较高,值得临床使用。
金藤清痹颗粒对胶原诱导性类风湿关节炎大鼠滑膜血管新生的影响
目的:观察金藤清痹颗粒对胶mixed infection原诱导性类风湿关节炎(CIA)大鼠滑膜血管新生的治疗作用并探讨其作用机制。方法:取60只SD大鼠随机分为空白组,模型组,甲氨蝶呤组,金藤清痹颗粒低、中、高剂量组等6组。以免疫诱导方法建立CIA大鼠模型,每天灌胃1次,空白组和模型组予以等量生理盐水灌胃,共28 d。采用小动物超声影像系统检测各组大鼠右下肢膝关节滑膜增生程度评分与增生面积;酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木精-伊红染色法观察大鼠关节滑PF-03084014抑制剂膜病理改变;免疫组织化学法检测大鼠关节滑膜组织血小板-内皮细胞黏附分子31(CD31)与血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)表达水平。结果:与空白组比较,模型组CIA大鼠右膝关节滑膜区域面积和滑膜增生评分显著增加(P<0.01);大鼠关节滑膜组织也出现显著病理性改变;血清炎症介质水平升高,同时CD31、VEGFR2表达也显著升高(P<0.01)。与模型组比较,金藤清痹颗粒各剂量组均能明显减小Cselleck PidnarulexIA大鼠滑膜增生面积(P<0.01),金藤清痹颗粒高剂量组大鼠超声滑膜评分显著降低(P<0.01);金藤清痹颗粒中、高剂量可明显改善大鼠关节滑膜组织病理变化,显著降低IL-6、IL-17、TNF-α水平(P<0.01),关节滑膜组织CD31、VEGFR2表达也出现一定程度下降(P<0.01)。结论:金藤清痹颗粒能够通过改善CIA大鼠关节滑膜血管新生抑制类风湿关节炎病理进展,达到减轻关节损伤的作用,其机制可能与抑制炎症介质分泌,降低CD31、VEGFR2表达有关。
2019年—2021年承德市食品安全风险监测结果分析
目的 了解和掌握承德市2019年—2021年主要市售食品食源性致病菌污染情况,发现本市食品存在的安全隐患,为食品安全风险监测工作提供依据。方法 根据《河北省食源性疾病监测工作手册》工作要求,按照国家标准方法,对承德市2019年—2021年主要市售食品进行抽样和监测。结果 共检测米面制品、中式凉拌菜、生禽肉等14类593份食品样品,其中154份样品中检出致病菌,检出率为25.97%。不同年度食源性致病菌检medical testing出率差异有统计学意义(χ~2=10.809,P<0.05);检出率较高的有蜡样芽胞杆菌(24.52%)、克罗诺杆菌属(21.74%)、致泻性大肠埃希菌(2SAG分子量1.21%);不同食品中食源性致病菌检出率最高的为冲调谷物制品(56.52%),其次是新鲜食用菌(40.38%)、生禽肉(40.00%)及生畜肉(36.36%)。结论 承德市市售食品存在不同程度的食源性致病菌污染,食品安全状况不容乐观。相关监管部门应当加强食品生产、销售环节的卫生监管,采取针对性措施预防食源性疾病selleckchem Adavosertib和食物中毒事件的发生。
基于Janus颗粒的工程结构化乳滴栓塞系统的构建及其在介入医学中的应用研究
背景:目前临床上常用的经导管动脉化疗栓塞(TACE)碘油药物递送系统为油水混合系统,该系统存在乳液不稳定、药物突释、栓塞效果差等问题。近年来,两亲性Janus颗粒由于PLX-4720生产商具有降低表面张力的特性,在提高乳液稳定性方面表现突出,已广泛应用于生物传感、药物递送、癌症治疗等领域。目的:本课题选择“血管栓塞剂”这一对癌症介入治疗有重要影响和重大临床应用前景的关键科学问题进行研究,首次将两亲性Janus颗粒引入到栓塞剂体系中,发展了一种新型的结构化乳滴栓塞系统,提高乳液的稳定性,改善药物的缓释能力。新型乳滴栓塞剂在动物体内具有显影、粘弹形变、远端栓塞的多种优势,实现栓塞后脏器完全坏死,其有望为临床病人的肿瘤介入治疗带来新思路。方法:(1)基于Janus颗粒的工程结构化乳滴栓塞系统的构建:利用乳液聚合的方法制备结构和化学组成可调的两亲性Janus颗粒。以Janus颗MAPK抑制剂粒联合碘油通过剪切乳化技术自组装成水包油型的乳滴,使用光学显微镜、共聚焦显微镜、计算机断层扫描仪(CT)验证其理化性质。通过改变Janus颗粒的浓度、碘油和水的比例等调控乳滴的粒径,最终按照临床应用转化的测试要求进行测试,获得粒径、形貌符合动脉栓塞剂制备要求的最佳制备条件及配方。(2)体外生物学功能评价:通过药物包封率、药物释放水平、细胞毒性实验等测试该栓塞剂的载药、释药及毒性。利用流变仪测量乳滴微球的粘度和模量,验证其具有剪切变稀的特性以及可粘弹形变的特性。乳滴受力后,形变成不同形状的乳滴,用CT扫描粘弹形变后的乳滴验证显影性。利用沉降法计算结构化乳滴和8Spheres?微球的堆积密度,验证乳滴由于粘弹形变堆积更紧凑。并通过在毛细玻璃管及SD大鼠肝脏脱细胞模型中注射入结构化乳滴,进一步评估栓塞剂在血管中的粘弹形变能力、显影能力、栓塞能力等,为后续动物体内试验提供数据支持。(3)体内生物学功能评价:通过新西兰兔肾脏栓塞试验,将结构化乳滴、碘油和8Spheres?微球分别递送入新西兰兔右肾供血动脉内,开展肾脏中乳滴栓塞剂示踪、栓塞、肾脏萎缩及病变等方面的研究,CT扫描检查栓塞剂在肾脏内即刻及长期分布规律及栓塞效果。最后通过生化及病理组化实验,验证各实验组肾脏栓塞的生物安全性、坏死程度,评估栓塞剂动脉栓塞能力和效果。结果:(1)通过调控两亲性Janus颗粒的浓度和油水比例,利用剪切乳化技术就可以制备得到与临床需求相匹配的、粒径在40-500微米区间可按需调节的乳滴。结构化乳滴具有良好的稳定性,共聚焦显微镜下观察到油滴表面有一层致密的JaThyroid toxicosisnus颗粒,在室温下保存12个月以上粒径基本没有变化。同时在CT下具有很好的显影性,可一次性制备10 g的结构化乳滴,且包装消毒及在手术中使用方便快捷。(2)基于Janus颗粒的工程结构化乳滴栓塞剂包载顺铂化疗药的包封率最高达90%以上。在pH=5.5的条件下24h释放达到了 78.5%,对HepG2细胞的存活率降低至15%左右。流变仪测得结构化乳滴的储能模量约700 Pa。所制备的结构化乳滴栓塞剂具备良好的粘弹形变能力,受力后可形变成椭球型、哑铃型和雪人型形状。在毛细玻璃管中可展示良好的堆积效果,受力下通过形变可进入内径更细的毛细玻璃管。结构化乳滴栓塞剂的堆积密度比临床中使用的8Spheres?微球要大,在SD大鼠肝脱细胞模型中不仅能栓塞供血动脉,也能通过形变栓塞末端细的血管,且栓塞效果较好。(3)基于Janus颗粒的工程结构化乳滴栓塞剂在新西兰大白兔中栓塞时具有良好的稳定性和粘弹性,在血管中能够达到致密堆积的效果,对供血动脉具有良好的栓塞效率。由于结构化乳滴具有独特的粘弹形变能力,可以远端移动以栓塞更细的血管(尺寸小至40 μm)。其CT下可示踪,栓塞后能清楚地看到乳滴在血管中的位置。栓塞14天后,乳滴实现右肾完全坏死及萎缩,基本没有出现再通或非靶向栓塞,生化检测结果也表明乳滴具有很好的安全性。与碘油和8Spheres?微球实验组相比较,结构化乳滴栓塞剂具有最佳的栓塞性能。结论:基于Janus颗粒的工程结构化乳滴栓塞剂基本解决了临床上现有碘油栓塞剂系统存在的乳液不稳定、药物突释以及栓塞效果差等问题,不仅能栓塞粗的供血动脉,还能栓塞末端细的血管,实现了血管内高效的栓塞和示踪效果,有望为临床肿瘤介入治疗提供新思路和新技术。
替罗非班致重度血小板减少症的诊疗策略及病例分析
目的 探讨替罗非班致重度血小板减少症的临床表现、诊断、鉴别诊断及治疗策略。方法 收集2021年12月至2023年3月在本院住院期间使用替罗非班导致极重度血小板减少症的7名急性冠脉综合征患者的基本临床资料、血小板计数变化及治疗经过,分析其个性及共性特征。结果 7例患者入院时血小板计数均在正常范围,其中6名患者血小板减少发生时间在使用替罗非班后3~16 h, 1名患者是在使用替罗非班后34 h检测时被发现,血小板计数最低值范围为(1~11)×10~9/L。7名患者均停用了替罗非班及其他抗栓药物,其中6名患者停药后2~4 d,血小板计数升高到50×10~9以上,后续血小板计数均逐渐恢复至正常范围内,期间均未发生出血和急性血栓事件,也未进行血小板输注;5名患者待血小板计数恢复到(20~50)×10~9/L时恢复抗栓治疗,1名患者待计数提升到50×10~9/L以上时进行了择期冠状动脉旁路移植术(CABG),1名患者血小板减少后有出血症状,且需要限期CABG手术,连续输注了血小板3 U,同时进行免疫球蛋白治疗,血小板计数升高到https://www.selleck.cn/products/elexacaftor.html76×10~9/L时进行了CABG手术。对此7例患者血小板减少原Torin 1配制因均进行了鉴别诊断,排除了肝素等其他原因所致的血小板减少。归纳并总结了此类药物致重度血小板减少症的诊疗流程图。结论 替罗非班可引起急性重度或极重度血小板减少,用药后6 h常规检测血小板,出现血小板减少后及时停用替罗非班可避免严重不良事件发生。同时根据患者有无出血及出血风险决定是否进行血小板输注,根据血小板计数恢复情况及血栓风险决定恢复抗age of infection栓治疗时机。
孕酮对子宫蓄脓犬子宫内膜基质细胞增殖的影响
旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells, ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone, P_4)的干预作用。收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;采用CCK-8法检测培养不同时间后两种ESCs的细胞活力及孕酮作用的影响。结果显示,胶原酶消化法可分离获得高纯度的犬ESCs;将分离的ESCs培养24 h和48 h时,子宫蓄脓犬ESCs的细胞活力显著高于健康犬(P<0.01)。用Protein Tyrosine Kinase抑制剂0、5、15、30 ng/mL等不同浓度P_4处理两种ESCs,当作用24 h时,两种细胞的活力与相应的对照比均无显著变化(P>0.05);作用48 h时,30 ng/mL的P_4可显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),而对子宫蓄脓犬ESCs的增殖具有显著的抑制作JAK/STAT抑制剂用(P<0.05);作用72 h时,3种浓度P_4均显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),但对子宫蓄脓犬ESCs的增殖均无显著影响(P>0.05)。以上结果表明,子宫蓄脓犬ESCs的快速增殖可能与子宫内膜的囊性增生密切相关,P_4可促进健康犬ESCs的增殖,但在一定程度上抑制子宫蓄OTC medication脓犬ESCs的增殖。
iPLA2β通过调控铁死亡减轻高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤
背景与目的:随着全球经济的发展以及人类饮食结构的改变,代谢性疾病的发生越来越常见并且严重危害人类健康。糖尿病(DM)的患病率迅速攀升,据统计2021年世界糖尿病确诊人数已达到5.37亿,国际糖尿病联盟(IDF)推测到2045年,糖尿病患者人数将达到新一高峰,突破7.83亿。糖尿病肾病(DN)是糖尿病的主要并发症之一,并已成为全世界终末期肾脏疾病(ESRD)的主要病因。DN作为一种典型的微血管并发症,临床上常表现为肾小球滤过率下降以及大量蛋白尿。既往大多数研究将肾小球作为糖尿病肾病发病机制的研究热点,但最近相关研究发现,肾小管损伤加速了DN的发展进程。由此可见探究肾小管上皮细胞的受损机diABZI STING agonist细胞培养制对于DN的治疗有重要意义。铁死亡是一种铁依赖的细胞程序性死亡方式,在细胞死亡过程中伴随大量活性氧堆积和脂质过氧化。铁死MRTX1133溶解度亡是许多病理过程中不可或缺的参与者,包括癌症、神经系统疾病、缺血再灌注损伤等。由此可见,深入探究调控铁死亡的具体机制,并且以此为突破口治疗相关疾病显得尤为重要。钙离子非依赖型磷脂酶A2β(i PLA2β)是一种新发现的铁死亡调节因子,能够参与膜磷脂的代谢,保护各种细胞免受氧化应激损伤。越来越多的研究表明铁死亡在DN的发生发展中发挥重要作用。本课题旨在探究i PLA2β在高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中的表达,观察i PLA2β对高糖诱导的HK-2细胞损伤的保护作用,观察i PLA2β对高糖诱导的HK-2细胞铁死亡以及氧化应激相关指标的改善作用,为DN的治疗提供新的思路。方法:体外实验:选取人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)作为实验对象。实验分组:正常组(NC)、甘露醇对照组(MG)、高糖组(HG)、高糖+空载体组periprosthetic infection(HG+Vectors)、高糖+i PLA2β过表达组(HG+i PLA2β+OE)、高糖+铁死亡抑制剂组(HG+Fer1)。用30m M葡萄糖刺激HK-2细胞,i PLA2β质粒转染构建过表达模型,铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)和铁死亡激活剂erastin作为铁死亡对照组。干预36h后,试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、铁含量,DCF免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)水平。Western blot法检测铁死亡指标ACSL4、GPX4、LPCAT3、TFR1的表达。结果:Western blot结果表明高糖刺激最佳时间为36h。免疫荧光结果显示高糖刺激HK-2细胞内i PLA2β表达降低。Western blot和Real-time PCR结果显示高糖刺激HK-2细胞内KIM-1、ACSL4、LPCAT3、TFR1表达增高,GPX4表达降低。试剂盒检测结果显示高糖刺激HK-2细胞内ROS、MDA水平升高,GSH、SOD水平降低。Fer-1干预后上述指标改善。过表达i PLA2β后,可降低KIM-1表达,减轻HK-2细胞损伤。进一步研究发现,过表达i PLA2β后可减轻高糖诱导的HK-2细胞氧化应激和铁死亡损伤,另外,erastin减弱了i PLA2β对高糖诱导的HK-2细胞损伤的保护作用。结论:i PLA2β能够通过调控铁死亡和氧化应激减轻高糖诱导的HK-2细胞损伤。
富血小板血浆联合自体脂肪移植在面部年轻化治疗的Meta分析
目的 系统评价富血小板血浆(platelet-更多rich plasma, PRP)联合自体脂肪移植在面部年轻化治疗的有效性,为临床治疗提供参考依据。方法 检索Pubmed、EMbase、Cochrane Library、Web of science、中国知网Hospital Associated Infections (HAI)、万方、维普等中英文数据库,从建库至2021年12月已发表的关于PRP联合自体脂肪移植在面部年轻化应用的相关研究,观察组为PRP联合自体脂肪移植,对照组为单纯自体脂肪移植。由2名评价员独立筛选文献、提取资料,并对文献进行质量评估,随机对照研究采用Cochrane偏倚风险评估工具,非随机对照研究采用纽卡斯尔-渥太华量表(newcastle-ottawa scale, NOS)进行文献质量评估,采用Rev Man 5.3软件对文献进行Meta分析。结果 共纳入14篇Puromycin文献,包含1013例求美者纳入Meta分析,其中观察组511例,对照组502例。Meta分析结果显示,观察组术后恢复时间、术后并发症发生率较对照组低,而术后自体脂肪移植成活率、治疗有效率、求美者满意率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PRP联合自体脂肪移植用于面部年轻化治疗能有效缩短恢复时间、减少术后并发症的发生率、提高自体脂肪移植成活率。该治疗方法安全、有效,值得临床推广应用。
红光促进棉花胚性愈伤诱导的转录组分析
为探究红光促进棉花胚性愈伤组织形成的分子机理。本研究以陆地棉CCRI24为试验材料,利用RNA-seq技术对在红光、白光培养条件下的不同阶段棉花愈伤组织进行转录组测序,分析胚性愈伤形成过程的基因表达水平。对2个不同光处理愈伤组织共计8个样品进行转录组测序,共获得54.92 Gb clean data。与白光相比,5、15、20、30 d的非胚性愈伤组织中差异表达基因分别Immunochemicals有261、58、139、44个上调,454、157、328、507个下调。GO功能富集分析表明,两种光质条件下的棉花愈伤组织差异表达基因的功能主要富集到细胞核、细胞膜等与细胞分点击此处裂有关的代谢过程。KEGG富集分析结果显示,红光与白光条件下的愈伤组织间差异表达基因主要参与光合作用-天线蛋白、玉米素合成、二萜类生物合成、类黄酮生物合成等代谢通路。研究结果表明,更多与胚性愈伤组织形成相关的8个基因的差异表达趋势与转录组测序分析结果一致。本研究为光质影响棉花胚性愈伤诱导的相关基因表达提供了数据,为解析棉花胚性愈伤组织诱导与形成的分子机制提供参考。