SRC信号通路

随着城市工业化进展加速,空气污染对居民健康构成严重威胁。其中细颗粒物(particulate matters 2.5,PM2.5)吸附有害物质多,在空气中悬浮时间长,对人体的影响最大。PM2.5暴露可以使呼吸系统疾病恶化,显著增加哮喘和慢性阻塞性肺疾病等慢性病患者的住院率和死亡率。气道高反应性(airway hyperresponsiveness,AHR)是指呼吸道对非抗原性刺激敏感性增加,可表现出过强过早的支气管平滑肌收缩反应,从而引起气道狭窄与气道阻力增加。AHR作为哮喘患者的重要特征,在一定程度上与哮喘的严重程度呈正相关。关于PM2.5诱发哮喘加重的分子机制主要集中在炎症反应、氧化应激、免疫系统失衡、细胞凋亡、自噬及表观遗传学改变等方面,但是其具体的分子机制仍然不清。溴结构域蛋白4(BRD4)是溴结构域蛋白(BET)家族的成员,在整个有丝分裂过程中始终结合在染色体上,可以通过招募包括Mediator、正性转录延伸因子b(P-TEFb)在内的多种转录调节因子,进而调控多种靶基因的表达,此外,BRD4还参与了RNA聚合酶II介导的基因转录,在调节炎症反应、氧化应激和细胞周期等生物过程中均发挥着至关重要的作用。关于BRD4与哮喘的关系中,目前主要集中在刺激炎症因子的释放和促进气道重塑这两个方面。本研究的目的在于探讨BRD4在PM2.5诱发气道高反应中的作用并揭示其可能的分子机制。实验分为三部分:第一部分为动物实验部分,用PM2.5多功能气溶胶浓缩富集系统对不同组小鼠进行为期12周的PM2.5暴露,观察PM2.5对小鼠气道反应性的影响,同时给予药物ZL0420(BRD4特异性抑制剂),探讨BRD4在此过程中的作用。第二部分为气道平滑肌细胞收缩实验部分,我们将提纯的PM2.5粉末溶于DMSO配置成母液,通过0.22μm滤网过滤,然后按照比例用培养基稀释成不同浓度,作用于气道平滑肌细胞24小时,观察PM2.5能否通过BRD4影响气道平滑肌细胞的收缩并探讨其具体的分子调控机制。第三部分为气道平滑肌细胞迁移实验部分,我们Ischemic hepatitis将提纯的PM2.5粉末溶于DMSO配置成母液,通过0.22μm滤网过滤,然后按照比例用培养基稀释成不同浓获悉更多度,作用于气道平滑肌细胞24小时,观察PM2.5能否通过BRD4影响气道平滑肌细胞的迁移功能。第一部分PM2.5通过促进BRD4的表达增强小鼠的气道高反应目的:观察PM2.5暴露是否可以通过溴结构域蛋白4调控小鼠的气道高反应。方法:1.试验动物分组及暴露方案:40只6-7周雄性C57小鼠(SPF级),在实验开始前适应实验室环境一周。然后被随机分为4组:清洁空气组(FA组),PM2.5组,PM2.5+Vehicle组,PM2.5+ZL0420组(n=10)。ZL0420为BRD4高效特异性抑制剂。所有小鼠饲养于独立通风笼(individually ventilatedcages,IVCs)中,给予灭菌饮用水和标准饲料。FA组:每日在固定器内固定4小时,每周5天,连续12周,吸入清洁空气。PM2.5组:将小鼠固定在PM 2.5多功能气溶胶浓缩富集系统的口鼻暴露器上,吸入浓缩的PM 2.5,每日4小时,每周5天,连续12周;PM2.5+Vehicle组:在固定于口鼻暴露系统之前1小时给予用于溶解药物的溶剂200μl腹腔注射,每天1次,每周5天,连续12周;PM2.5+ZL0420组在固定于口鼻暴露系统之前1小时给予ZL0420(10mg/kg)200μl腹腔注射,每天1次,每周5次,连续12周。2.检测指标及方法:PM2.5暴露12周后,用不同浓度的乙酰胆碱对小鼠气道进行激发,选取呼吸系统阻力(the respiratory system resistance,Rrs),中央气道阻力(airway resistance,RN),肺阻力(tissue damping,G)这三个指标评估小鼠肺功能;收集肺泡灌洗液,应用酶联免疫吸附实验测定IL-1β、IL-6、IL-8和BK的表达情况;左侧肺组织进行HE染色,在光学显微镜下观察各组肺组织的病理性改变;应用免疫组化评估肺组织中BRD4的表达情况;应用蛋白免疫印迹评估各组肺组织中BRD4、KLK14、B2R、MMP2、MMP9和Vimentin的蛋白表达量。3.统计学分析:数据用均数±标准误(SEM)表示,采用SPSS 19.0版软件(SPSS Inc.,Chicago,IL,USA)进行分析。用两独立样本t检验分析两组之间的差异。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.C57小鼠在整个暴露周期中,日平均暴露浓度为820μg/m3,最高暴露浓度为2000μg/m3,最低暴露浓度为520μg/m3。2.在一定浓度乙酰胆碱激发的条件下,PM2.5组的Rrs,RN,和G值均高于对照组(P<0.05);PM2.5+ZL0420组Rrs,RN,和G均低于PM2.5+Vehicle组(P<0.05);此外,在12.5mg/ml乙酰胆碱激发条件下,PM2.5组(G,RN,Rrs)与基线值相比即可升高2倍,而能使对照组和PM2.5+ZL0420组(G,RN,Rrs)较基线值升高2倍的乙酰胆碱浓度明显高于12.5mg/ml。3.与对照组相比,PM2.5组和PM2.5+Vehicle组的肺组织病理结果显示,气道壁增厚,肺泡间隔增宽,肺泡结构遭到明显破坏,炎性细胞浸润,而PM2.5+ZL0420组气道壁增厚程度、肺泡结构破坏程度均较前者减轻,且浸润性炎性细胞数量有所减少。肺泡灌洗液中的细胞因子检测结果表明,与对照组相比,PM2.5组IL-1β(P=0.001)、IL-6(P=0.007)、IL-8(P=0.000)和BK(P=0.001)水平明显升高,与PM2.5+Vehicle组相比,PM2.5+ZL0420组肺泡灌洗液上述炎性细胞因子水平明显降低:IL-1β(P=0.007),IL-6(P=0.005),IL-8(P=0.000),BK(P=0.04)。4.免疫组化结果表明,BRD4在肺组织中广泛表达,并且PM2.5暴露可促进肺组织中BRD4的表达。5.蛋白免疫印迹结果表明,与FA组相比,PM2.5可刺激肺组织中BRD4、KLK14、B2R、MMP2、MMP9和Vimentin的表达(P<0.05),而与PM2.5+Vehicle组相比,PM2.5+ZL0420组可明显抑制上述相关蛋白的表达(P<0.05)。结论:BRD4参与了PM2.5引起的气道高反应,其机制与调控KLK14、B2R、MMP2、MMP9和Vimentin的蛋白表达相关。第二部分PM2.5通过促进BRD4的表达增强气道平滑肌细胞的收缩功能目的:验证PM2.5是否通过调节BRD4的表达影响气道平滑肌细胞的收缩功能及具体机制。方法:1.分组:1)气道平滑肌收缩实验分组和检测指标:将PM2.5提纯成固态粉末溶于DMSO,通过0.22μm的滤网过滤获得母液,然后用细胞培养基稀释成不同浓度(μg/ml)(3.125,6.25,12.5,25),作用于人气道平滑肌细胞24小时;2)采用脂质体转染法进行细胞转染将BRD4基因沉默,将实验分为4组,分别为NCsi RNA+DMSO组、BRD4si RNA+DMSO组、NCsi RNA+PM2.5组、BRD4si RNA+PM2.5组;3)选取BRD4特异性抑制剂(ZL0420)作用于细胞,将实验分为4组,分别为Control+DMSO,ZL0420+DMSO,Control+PM2.5和ZL0420+PM2.5;2.检测方法及指标:用细胞免疫荧光对气道平滑肌细胞中BRD4定位;用免疫印迹法评估BRD4、KLK14和B2R的蛋白表达情况;采用酶联免疫实验检测细胞上清液中BK的含量;采用细胞收缩试剂盒观察气道平滑肌细胞收缩情况,用细胞收缩环的大小评估细胞收缩程度。3.统计学分析:数据用均数±标准误(SEM)表示,采用SPSS 19.0版软件(SPSS Inc.,Chicago,IL,USA)进行分析。用两独立样本t检验分析两组之间的差异。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.气道平滑肌细胞在上述不同浓度的PM2.5干预作用下,BRD4表达量有所升高,其中在12.5μg/ml PM2.5的干预下BRD4相对蛋白表达水平最高;细胞免疫荧光结果表明BRD4定位在气道平滑肌细胞的细胞核中而非细胞质。2.与NCsi RNA+PM2.5组相比,BRD4si RNA+PM2.5组收缩功能降低,表现在气道平滑肌细胞的收缩环直径明显增加(P=0.003);与Control+PM2.5组相比,ZL0420+PM2.5组收缩功能降低,表现在气道平滑肌细胞的收缩环直径明显增加(P=0.001)。3.BRD4基因沉默和抑制均可以抑制KLK14和B2R的表达量,进而减少细胞上清液中BK的水平(P<0.05)。结论:BRD4参与了PM2.53-Methyladenine IC50诱发的气道平滑肌细胞的收缩过程,并且与BRD4可能调节KLK14、B2R蛋白的表达有关。第三部分PM2.5通过促进BRD4的表达增强气道平滑肌细胞的迁移功能目的:验证PM2.5是否通过调节BRD4的表达影响气道平滑肌细胞的迁移功能及具体机制。方法:1.分组:1)气道平滑肌收缩实验分组和检测指标:将PM2.5提纯成固态粉末溶于DMSO,通过0.22μm的滤网过滤获得母液,然后用细胞培养基稀释成不同浓度(μg/ml)(3.125,6.25,12.5,25),作用于人气道平滑肌细胞24小时;2)采用脂质体转染法进行细胞转染将BRD4基因沉默,将实验分为4组,分别为NCsi RNA+DMSO组、BRD4si RNA+DMSO组、NCsi RNA+PM2.5组、BRD4si RNA+PM2.5组;3)选取BRD4特异性抑制剂(ZL0420)作用于细胞,将实验分为4组,分别为Control+DMSO,ZL0420+DMSO,Control+PM2.5和ZL0420+PM2.5。2.检测方法及指标:用免疫印迹法测定不同浓度PM2.5干预条件下,MMP2、MMP9和Vimentin的蛋白表达量;同时用免疫印迹法测定BRD4基因沉默或被抑制后,参与迁移功能的MMP2、MMP9和Vimentin分子的表达量;采用Transwell实验评估气道平滑肌细胞的迁移功能。3.统计学分析:统计学分析:数据用均数±标准误(SEM)表示,采用SPSS 19.0版软件(SPSS Inc.,Chicago,IL,USA)进行分析。用两独立样本t检验分析两组之间的差异。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.与对照组相比,气道平滑肌细胞在上述不同浓度的PM2.5干预作用下,气道平滑肌细胞迁移功能增强,并且在6.25μg/ml PM2.5悬液的干预作用下,细胞迁移功能最强(P=0.001)。此外与迁移功能相关的蛋白,MMP2、MMP9和Vimentin的表达量也有所增加。2.与NCsi RNA+PM2.5组相比,BRD4si RNA+PM2.5组气道平滑肌细胞迁移至下室的细胞数明显减少(P=0.002);与Control+PM2.5组相比,ZL0420+PM2.5组迁移功能也降低,表现在气道平滑肌细胞迁移至下室的细胞数明显减少(P=0.000);并且随着BRD4蛋白表达量的降低,MMP2、MMP9和Vimentin的蛋白表达量也随之减少。结论:PM2.5在一定浓度的范围内通过上调BRD4的蛋白表达量进而促进气道平滑肌细胞的迁移,并且上述功能与BRD4可以调节MMP2、MMP9和Vimentin的蛋白表达有关。

目的 探究靶向基质细胞衍生因子-1(SDF-1)调控肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)亚型转化增强结直肠癌(CRC)化疗敏感性的作用。方法 使用PMA和ILStereolithography 3D bioprinting-4体外诱导THP-1细胞为TAMs细胞，流式细胞仪检测M1/M2型特异表面标志物CD86和CD206表达；使用5μg/mL SDF-1抑制剂AMD3100处理TAMs细胞24 h,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测SDF-1表达，qRT-PCR检测iNOS、TNF-α、TGF-β及Arg-1表达；建立人结直肠癌细胞LoVo和TAMs细胞共培养体系，并使用不同浓度0、0.5、5、50、500μmo购买Pexidartinibl/L奥沙利铂处理LoVo细胞，具体分组包括空白对照组、奥沙利铂组、TAMs+奥沙利铂组、AMD3100+TAMs+奥沙利铂组，CCK-8法检测LoVo细胞存活率；构建动物结直肠癌移植瘤模型，待肿瘤长出后选择肿瘤大小为100 mm~3的12只裸鼠，按随机数字表法分为对照组、奥沙利铂组、AMD3100+奥沙利铂组，每组4只，奥沙利铂组腹腔注射8 mg/kg奥沙利铂，AMD3100+奥沙利铂组腹腔注射5 mg/kg SDF-1抑制剂AMD3100和8 mg/kg奥沙利铂，对照组注射等体积生理盐水，每日一次，持续18 d,首次给药后的第0、3、6、9、12、15、18 d测量裸鼠肿瘤体积，18 d解剖取肿瘤组织并称重，制备肿瘤组织单细胞悬液，流式细胞仪分选M1/M2型巨噬细胞，免疫组织化学染色检测iNOS和Arg-1表达。结果 体外成功诱导获得TAMs细胞，经过SDF-1抑制剂AMD3100处理后，TAMs细胞中SDF-1在mRNA和蛋白上的表达水平均下调，iNOS、TNF-α的mRNMDV3100生产商A相对表达量升高，TGF-β、Arg-1的mRNA相对表达量降低(P<0.01);0.5、5、50、500μmol/L奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率下降，与TAMs共培养再经过奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率升高，而与SDF-1抑制剂AMD3100处理的TAMs共培养再经过奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率则下降(P<0.01);经过奥沙利铂处理的移植瘤裸鼠肿瘤组织生长减缓，肿瘤重量减小，经过SDF-1抑制剂AMD3100和奥沙利铂联合处理的移植瘤裸鼠肿瘤组织生长进一步减缓，肿瘤重量减小，同时，肿瘤组织中F4/80~+CD11c+表达增加，iNOS表达增加，F4/80~+CD206~+表达减少，Arg-1表达也减少。结论 通过SDF-1抑制剂AMD3100靶向SDF-1可在体外、体内增强结直肠癌的化疗敏感性，其作用机制可能与调控肿瘤相关巨噬细胞M1/M2亚型转化相关。

目的 分析2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)患者并发脑卒中情况及影响因素，为T2DM患者并发脑卒中提供早期预防依据。方法 选取2019年4月—2021年4月期间嘉兴市第一医院诊治的1 119例城南社区T2DM患者为研究对象，采用自行设计调查表统计T2DM患者并发脑卒中情况及相关临床资料，比较不同特征T2DM患者并发脑卒中情况，并运用多因素logistic回归分析探讨T2DM患者并发脑卒中的影响因素。结果 1 119例T2DM患者中，并发脑卒中180例，脑卒中患病率为16.09%,其中男性患病率高于女性(19.55%vs.12.45%),差异有统计学意义(χ~2=10.418,P=0.001)。随着病程和年龄的增长，T2DM合并脑卒中患病率呈上升趋势，不同病程和年龄组合并脑卒中患病率比较差异有统计学意义(χ~2值分别为26.443、47.227,P<0.001)。相比不吸烟、体质指数(body mass index, BMI)<24、糖化血红蛋白(glycated hemop16 immunohistochemistryglobin, HbA1c)<8%的T2DM患者，吸烟、BMI≥24、HbA1c≥8%的T2DM患者的脑卒中患病率均更高(P<0.05)。伴有高血压、血脂异常、高尿酸血症的T2DM患者合并脑卒中的患病率更高(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示：年龄45～<55岁(OR=1.430,95%CI:1.060～1.931)、55-～<65岁(OR=1.465,95%CI:1.142～1.879)、65～<75岁(OR=1.493,95%CI:1.037～2.150)、75～88岁(OR=1.573,95%CI:1.118～2.212),病程5～<10年(OR=1.311,95%CI:1.074～1.601)、10～<20年(OR=1.422,95%CI:1.102～1.835)、≥20年(OR=1.498,95%CI:1.125～1.994),男性(OR=1.355,95%CI:1.079～1.701)、BMI≥24(OR=1.165,95%CI:1.090～1.245)、HbA1c≥8%(OSmoothened Agonist分子量R=1.107,95%CI:1.069～1.290)、高血压(OR=GSK2118436作用1.159,95%CI:1.119～1.201)、血脂异常(OR=1.187,95%CI:1.130～1.247)、高尿酸血症(OR=1.137,95%CI:1.100～1.176)、吸烟(OR=1.157,95%CI:1.102～1.215)是T2DM合并脑卒中发生的危险因素(P<0.05)。结论 嘉兴市城南社区T2DM合并脑卒中患病率较高，且年龄增加、病程越长、男性、BMI≥24、HbA1c≥8%、高血压、血脂异常、吸烟、高尿酸血症是T2DM合并脑卒中发生的危险因素。

光不仅能为植物提供能量,而且还作为信号分子调节植物光形态建成。UVimmune cytolytic activity-B(Ultraviolet light-B)是阳光的一部分,影响植物从种子萌发到开花结果不同阶段的诸多生命过程。UV-B光受体UVR8(UV RESISTANCE LOCUS 8)由基态的同源二聚体感知UV-B解离成活性单体。光激活的UVR8与多种信号因子协同作用,介导植物对UV-B光的响应,调节植物生长发育。UVR8介导的信号转导途径主要包括UVR8-COP1(CONSTITUTIVELY PHOTOMORPHOGENIC 1)核心信号通路及与其他转录因子协同作用介导的信号途径。另外,UVR8信号转导能够被RUP1/2(REPRESSOR OF UV-B PHOTOMORPHOGENESIS 1/2)负调控。目前UVR8-COP1信号通路的分子机制已被解析,但UVR8与转录因子介导的信号通路及负反馈调节的分子机制仍不清楚。基于此,本课题利用结构生物学和分子生物学等手段体外验证UVR8与转录因子及负反馈调节因子的相互作用,筛选与UVR8形成稳定复合物的互作蛋白并解析复合物结构,解析复合物形成的分子机制。本研究主要结果如下:1.通过在体外验证组成型激活态突变体UVR8~(W285A)和UVR8~(R338A)与上述信号因子的互作,发现UVR8~(W285A)和UVR8~(R338A)与RUP1和RUP2均有相互作用,且UVR8~(W285A)与RUP2蛋白的表达量及形成的复合物比例最优。2.通过表达体系、标签以及截短体筛选三个策Ipatasertib MW略对UVR8~(W285A)-RUP2复合物蛋白进行优化,最后在哺乳细胞Expi293F~(TM)表达系统中获得稳定的UVR8~(W285A)-RUP2二元复合物全长和系列截短体蛋白。3.根据蛋白优化结果对UVR8~(W285A)-RUP2全长和系列截短体蛋白进行晶体筛选及优化,获得性质良好的晶体及高分辨率衍射数据,目前结构正在解析中。这些研究结果将有助于理selleck解UVR8~(W285A)-RUP2具体的互作机制,并为最终揭示RUPs促进UVR8重新二聚化的分子机制提供有用信息。本研究也为其他光受体负反馈调控研究提供借鉴意义。

本研究基于单细胞测序数据探讨SENP2在肾细胞癌三种不同亚型中的表达差异和作用机制。通过R语言进行UMAP降维可视化和差异表达基genetic privacy因（differentially expressed genes，DEGs）的筛选；对DEGs进行功能注释和富集分析并进行PPI网络构建，通过Cytoscape软件筛选关键基因；通过分析SENP2的表达差异与三种RCC亚型患者生存预后和临床分期的关系，揭示其在不同亚型中的作用；通过分析SENP2及其互作基因的相关性，探索SENP2引起三种不同RCC亚型患者生存预后和临床分期差异性的调控selleckchem机制；最后，对肾透明细胞癌(Kidney renal clear cellcarcinoma，KIRC)中的SENP2进行免疫组化实验。本研究结果表明，RCC三种亚型中的基因表达具有差异性；RCC三种亚型中差异表达基因显著富集于细胞增殖、蛋白质代谢、细胞衰老以及TP53调节等生物学过程中；筛选Hub基因锁定SENP2；生存分析和临床分期分析结果表明，在KIRC中，随着临床分期的增加，SENP2表达量逐渐减少，患者的生存预后变差，在肾嫌色细胞癌(Kidney Chromophobe，KICH)中，SENP2表达与患者的生存预后成正相关，与临床分期没有相关性，在肾乳头状细胞癌(Kidney renal papillary cellcarcinoma，KIRP)中SENP2表达与患者的生存预后成负相关，SENP2表达越高，患者的预后越差，与临床分期没有相关性；SENP2及其互作基因相关性研究表明，在KIRC和KICH中，SENP2正相关调控抑癌基因TP53，而在KIRP中，SENP2负相关调控TP53家族成员TP73，进而导致SENP2调控RCC三种亚型的差异性；免疫组化结果显示SENP2在KIRC呈现低表达且与年龄、性别和Raf抑制剂肿瘤大小无关。综上所述：SENP2通过不同调控机制参与了RCC三种亚型的发生和发展，有望成为判断RCC的肿瘤标志物，为相关机制研究提供了新思路。

目的 基于临床常用的静脉血栓栓塞症（VTE）风险评估模型及恶性肿瘤并发VTE的独立危险因素构建新型的恶性肿瘤并发VTE风险评估模型。方法回顾性收集2015年1月至2021年10月期间于徐州医科大学附属医院住院的恶性肿瘤并发VTE患者，将同期住院且性别、年龄、病理诊断和TNM分期一致、未患VTE的恶性肿瘤患者设为对照组。收集两组患者的性别、年龄、病理类型、TNM分期、血液学检查、深静脉置管史和介入治疗史等资料。采用Caprini和Pauda模型对入组患者发生VTE的风险进行评估，筛选出预测效能较佳者。通过单因素和多因素回归分析筛选恶性肿瘤并发VTE的独立危险因素，并基于此建立一种新型的恶性肿瘤并发VTE风险评估模型。结果 与Pauda模Trichostatin A化学结构型相比，Caprini模型的受试者工作特征（ROC）曲线下面积（0.73vs.0.58）、敏感性（56.13%vs.25.16%）均高，而其特异性却低于Pauda模型（82.74%vs.95.24%）。近1月内手术史、淋巴细胞百分比、白球比、乳酸脱氢酶、羟丁酸脱氢酶、纤Puromycin分子式维蛋白原降解产物、深静脉置管史是恶性肿瘤并发VTE的独立危险因素，将其纳入Caprini模型中构bioresponsive nanomedicine建新模型，结果示新模型在ROC曲线下面积（0.81vs.0.73）、敏感性（56.77%vs.56.13%）和特异性（88.69%vs.82.74%）方面均优于Caprini模型。结论本研究构建的恶性肿瘤并发VTE风险评估模型具有较佳的预测效能，更适合应用于临床。

观察并探讨黄芪-莪术（AC）配伍调控上皮-间质转化（EMT）对结肠癌HT-29细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。分别用0、3、6、12 g·kg~(-1) AC含药血清作用于人结肠癌HT-29细胞株，采用噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞存活和生长，5-溴-2-脱氧尿嘧啶（EDU）细胞增殖实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况；将BALB/c雄性裸鼠建立结肠癌皮下移植瘤模型，分为空白对照组、6 g·kg~(-1) AC组、12 g·kg~(-1) AC组，造模后观察记录瘤体的体积与质bio-based economy量，对瘤组织进行HE染色，蛋白免疫印迹（Western blot）检测黄芪-莪术作用后HT-29细胞和裸鼠瘤组织中Bax、caspase-3、cleaved caspase-3相关凋亡蛋白和E-cadherin、MMP9、MMP2、vimentin相关EMT蛋白的表达水平。结果显示，与空白对照组相比，黄芪-莪术作用后的细胞存活率显著降低，且处于增殖期细胞数量明显降低；各给药组的迁移和侵袭细胞数明显selleck HPLC下降，细胞凋亡数也明显上升；体内实验中，与空白对照组比，各给药组的瘤体积和瘤体质量均降低，瘤组织呈现出细胞体积缩小，细胞核有固缩现象，表明黄芪-莪术配伍可能改善EMT过程；此外，各给药组的HT-29细胞和肿瘤组织中，Bcl2、E-cadherin蛋白的表达均不同程度上升selleckchem，Bax、caspase-3、cleaved caspase-3、MMP9、MMP2、vimentin蛋白的表达均不同程度下降。综上，黄芪-莪术配伍能够显著抑制体内外结肠癌HT-29细胞的增殖、侵袭迁移和上皮-间质转化，诱导结肠癌细胞凋亡。

目的：观察消渴通痹方含药血清对高糖损伤后人脐静脉内皮细胞（Human UmbilicAntibiotic Guardianal Vein Endothelial Cells， HUVEC）F肌动蛋白（F-actin）、Ras基因家族成员A（Ras homolog gene family member A， RhoA）、Rho相关蛋白激酶（Rho-associated coiled-coil containing kinase， ROCK）蛋白的影响。方法：采用高糖损伤后HUVEC模型，将HUVEC分为正常对照组、高糖模型组、22.5 g/kg消渴通痹方5%、10%、15%含药血清组，应用免疫荧光法检测F-actin的动态变化，Western blot检测F-actin、ROCK、p-ROCK和RhoA蛋白表达。结果：高糖刺激HUVEC骨架蛋白F-actin聚集到细胞中央，形成大量的应力纤GSK126 molecular weight维；22.5 g/kg消渴通痹方5%、10%含药血清干预后能够改善F-actin的聚集状态，使F-actin重新分布在细胞周边。与正常对照组比较，高糖模型组F-actin积分光密度值升高、F-actin、p-ROCK、Rhoselleck抑制剂A蛋白表达上调（P＜0.05或P＜0.01），ROCK蛋白表达下调（P＜0.05）；与高糖模型组比较，22.5 g/kg 消渴通痹方5%含药血清组F-actin积分光密度值降低、F-actin、p-ROCK、RhoA蛋白表达下调（P＜0.05），ROCK蛋白表达上调（P＜0.05）；10%含药血清组F-actin积分光密度值降低、F-actin蛋白表达下调（P＜0.01或P＜0.05），RhoA、ROCK蛋白表达上调（P＜0.05）。结论：益气活血中药消渴通痹方可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路的异常激活稳定或保护内皮细胞骨架，为防治糖尿病周围神经病变提供理论依据。

背景：复方双氯芬酸钠是镇痛解热、非类固醇药物，其被广泛用于缓解轻至中度疼痛，治疗类风湿关节炎、骨关节炎和强直性脊柱炎、骨关节炎、肌肉骨骼损伤等，但目前关于其对骨关节炎的作用机制报道较少。目的：探究复方双氯芬酸钠对骨关节炎大鼠基质金属蛋白酶1、软骨形态selleck产品及氧化应激的影响。方法：采用木瓜蛋白酶关节腔内注射建立骨关节炎大鼠模型，将Wistar大鼠随机分为空白组，骨关节炎模型组、复方双氯芬酸钠低、中、高剂量组、塞来昔布组。测量各组大鼠右侧膝关节的肿胀程度；ELISA检测关节积液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、基质金属蛋白酶1水平，并检测氧化应激指标超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶含量；比较各组大鼠关节软骨组织形态和Mankin评分；蛋白质印迹法检测关节软骨中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13蛋白表达。结果与结论：(1)在造模后和给药前，和空白组相比，模型组大鼠右膝关节Stereolithography 3D bioprinting均出现了不同程度的红肿，但无紫红色斑和结节等变化；给药后，和模型组相比，复方双氯芬酸钠低、中、高剂量组和塞来昔布组大鼠右膝关节红肿程度明显减轻(P <0.05);(2)模型组大鼠关节腔积液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、基质金属蛋白酶1水平较空白组增加(P <0.05)；低、中、高剂量组和塞来昔布组大鼠关节腔积液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、基质金属蛋白酶1水平均低于模型组(P <0.05);(3)和空白组相比，模型组大鼠超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽过氧化物酶含量均显著降低，丙二醛浓度升高(P <0.05)；和模型组相比，各给药组大鼠超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽过氧化物酶含量均升高，丙二醛浓度均降低，且复方双氯芬酸钠高剂量组变化最显著(P <0.05);(4)模型组大鼠Mankin评分高于空白组(P <0.05)；和模型组相比，各给药组大鼠Mankin评分均显著降低，且复方双氯芬酸钠高剂量组降低最显著(P <0.05);(5)模型组大鼠软骨组织中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋Talazoparib细胞培养白酶13蛋白表达高于空白组(P <0.05)；各给药组大鼠软骨组织中3种基质金属蛋白酶蛋白表达均低于模型组(P <0.05);(6)结果说明，复方双氯芬酸钠可以改善骨关节炎大鼠软骨形态，降低氧化应激损伤，抑制软骨组织中基质金属蛋白酶1表达，进而对骨关节起到治疗作用。

目的 分析郑州市某区居民血糖、血脂、血压水平及相关影响因素，以指导临床建立科学干预体系，提升居民健康水平。方法 选取2019年6月—2021年3月郑州市某区1 364名居民，调查其人口学Cell Cycle抑制剂信息(性别、年龄、文化水平)、生活习惯(饮酒、吸烟、体育锻炼)、身高、体重，并检测血压、血脂、血糖水平，分析调查对象性别、年龄、文化水平、体质量指数(BMI)、饮酒、吸烟、体育锻炼等对高血压、高血脂、高血糖患病率的影响。结果 本区1 364名居民高血压、高血糖、高血脂患病率分别为39.44%Polymerase Chain Reaction、6.74%、31.16%;单因素分析，年龄≥60岁、BMI>24 kg/m~2、高中及以下学历、无体育锻炼者高血压、高血脂、高血糖患病率高于年龄<60岁、BMI≤24 kg/m~2、中专及以上学历、体育锻炼者，且吸烟者高血脂、高血糖患病率高于不吸烟者，饮酒者高血脂患病率高于不饮酒者，以上差异均有统计学意义(均P<0.05)。Logistic回归分析，年龄≥60岁、BMI>24 kg/m~2、高中及以下学历是高血压、高血脂、高血糖发生的独立危险因素，体育锻炼为CB-839供应商其保护因素(P<0.05)。结论 郑州市某区居民高血糖、高血脂、高血压患病率较高，其影响因素包括年龄、BMI、文化水平、体育锻炼等。明确上述原因，建立科学干预体系，定期开展健康体检，有利于提升居民健康水平。