SRC信号通路

目的 探讨自身免疫性脑炎(AE)患者血清免疫球蛋白水平与其疾病转归的关系。方法 选取2019年1月至2022年1月四川大学华西医院收治的95例AE患者设为观察组，另选择60例同期正常clinical and genetic heterogeneity体检者设为对照组。比较两组免疫球蛋白水平；比较观察组中不同预后患者免疫球蛋白水平，并分析AE患者疾病转归的影响因素。结果 观察组免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);观察组中预后良好者64例，预后不良者31例；预后良好组IgA、IgM、IgG水平均低于预后不良者，差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线提示血清IgA、IgM、IgG单独检测评估AE患者预后的曲线下面积(AUC)为0.671、0.7RepSox小鼠26、0.835,低于三者联合检测的AUC 0.909(P<0.05);多因素分析提示血清IgA、IgM、IgG水平均为AE患者疾病转归的独立影响因素(P<0.05)。结论 AE患者血清IgA、IgM、IgG水平均显著提升，且与患者疾病转归密切相关；同时血清免疫球蛋白水平为AE患者疾Crizotinib溶解度病转归的独立影响因素，对其预后评估具有一定参考价值。

目的 运用网络药理学方法分析消炎退热颗粒清热抗炎的作用机制，并采用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS/MS）技术测定其8种主要活性成分。方法 通过Swiss Target Prediction数据库筛选退热颗粒入血成分的靶点，利用CTD数据库获取符合发热的疾病主要靶点，借助String平台进行蛋白相互作用（PPI）分析；通过DAVID数据库进行GO功能与KEGG通路富集分析，然后用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络，并对关键化合物-靶点进行分子对接验证。采用UPLC-MS/MS法测定消炎退热颗粒中靛玉红、异甘草素、甘草素、甘草酸、甘草苷、秦皮乙素、咖啡酸、绿原酸的含量。采用WATERS ACQUITY UPLC~?BEH C_(18)色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）；以0.1%甲酸乙腈（A)-0.1%甲酸-5 mmol·L~(-1)甲酸铵（B）为流动相进行梯度洗脱，以多反应监测（MRM）模式进行测定。结果 网络药理学及分子对接筛选出消炎退热颗粒中靛玉红、秦皮乙素和咖啡酸等16个潜在的活性成分，获得转录因子（JUN）、黏着连接蛋白β1(CTNNEpigenetics抑制剂B1）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3）等10个核心靶点，通路富集分析发现其清热抗炎作用主要涉及白细胞介素17(IL-17）和缺氧诱导因子1(HIF-1）等信号通路；分子对接实验表明主要活性成分与关键靶点对接呈现良好的亲和力。含量测定结果表明，各成分在各自的浓度范围内具有良好的线性关系（r>0.999），精密度、准确度和稳定性良好。16批样品中8种成分的含量分别为0.9Entinostat说明书4～3.41、0.99～5.61、0.80～5.84、85.48～141.11、4.30～10.09、152.35～271.80、11.31～26.94、1.99～5.58μg·g~(-1)，其中，2个厂家样品中靛玉红、甘草Media attention素、异甘草素、甘草苷和绿原酸的含量具有显著性差异。结论 该研究初步揭示了消炎退热颗粒多成分、多靶点、多途径发挥清热抗炎的作用机制；建立了消炎退热颗粒多成分的含量测定方法，为其药理学研究和质量控制提供了参考依据。

探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异性哮喘（CVA）大鼠炎症反应的作用及机制。6～8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组以及麻杏石甘汤低、中、高剂量组，每组8只；采用卵蛋白（OVA）和氢氧化铝[Al(OH)_(3)]致敏并用OVA激发的方法复制大鼠CVA模型，正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃，各受试药组给予相应药物灌胃。实验结束后，检测各组大鼠血液白细胞计数，血清白细胞介素6（IL-6）、STM2457研究购买白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量；苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理变化；蛋白免疫印迹法检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88（MyD88）、核转录因子-κB（NF-κB p65）和磷酸化核转录因子-κB（p-p65）、丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）水平，实时荧光定量分析法检测肺组织中TLR4、MyD88 mRNA表达水平。结果显示，与正常组比较，模型组大鼠具有明显哮喘Decitabine研究购买表型，血液白细胞计数和IL-6、TNF-α水平显著升高（P<0.01），IL-10水平显著降低（P<0.01），气道周围炎症细胞浸润明显，细胞排列紊乱，肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平以及TLR4、MyD88 mRNA水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较，孟鲁司特钠组、麻杏石甘汤高剂量组白细胞计数和IL-6、TNF-α水平显著降低（P<0.01），IL-10水平显著升高（P<0.01），气道炎症细胞浸润、细胞排列紊乱程度明显减轻，肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平以及TLR4、MyD88 mRNA水平显著降低（P<0.05，P<0.01）。与孟鲁司特钠组比较，麻杏石甘汤高剂量组大鼠血液白细胞数，血清中IL-10和TNF-α含量，肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38protamine nanomedicine MAPK水平及TLR4、MyD88 mRNA水平，均无显著差异。麻杏石甘汤具有抑制CVA大鼠气道炎症反应的作用，其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB以及p38 MAPK信号通路的激活相关。

为建立针对常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法，本研究以日本鲭的ATP-6基因、金枪鱼的BGH基因、秋刀鱼和沙丁鱼的Cytb基因为靶基因设计特异性的引物和探针，并通过反应体系的优化试验、特异性试BIBW2992细胞培养验和灵敏性试验，建立了针对4种高组胺鱼成分的实时荧光PCR检测方法。结果显示，该方法特异性强，对其他常见鱼类物种均无特异性扩增，日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼的灵敏性AMP-mediated protein kinase可分别达到10.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL；以人工模拟样品进行检出限分析，建立的实时荧光PCR方法的检出限均可达0.1%；对市售的36份鱼肉制品进行检测，日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼成分的检出率分别为11.11%(4/36)、5.56%(2/36)、5.56%(2/36)和16.67%(6/36)。本研究建立的针对4种常见高组胺鱼成分的实https://www.selleck.cn/products/gsk-j4-hcl.html时荧光PCR检测方法，操作简便、结果可靠，可为我国鱼肉制品进出口检验监管和食品安全监管提供技术支撑。

研究背景结直肠癌(CRC)是一种侵袭性原发性肠道恶性肿瘤,在全球各类癌症中发病率居第三位,死亡率居第二位。对于50%的KRAS/NRAS/BRAF野生型、5%-10%的BRAF V600E突变以及5%微卫星不稳定性,错配修复缺陷的转移性结直肠癌(mCRC)患者可受益于EGFR、BRAF靶向治疗或免疫疗法。然而,对于35%至40%的KRAS或NRAS突变的mCRC患者,目前还缺乏有效的治疗方法。因此,靶向KRAS治疗可能Ceralasertib细胞培养是KRAS突变型mCRC的一种有潜力的方法。近几年KRASG12C抑制剂(如:AMG510)的成功研发打开了靶向KRAS蛋白的新纪元。KRASG12D抑制剂(如:MRTX1133)的研发也在不断取得新的进展。虽然MRTX1133也在KRASG12D突变型胰腺癌、结直肠癌中展现了其抑制增值的作用,但我们发现在KRASG12D突变型结直肠癌中MRTX1133的应用会引发适应性改变进而出现药物耐受。因此,这种适应性改变的分子机制以及其阻断策略值得深入探讨。研究方法1.应用细胞克隆形成实验观察药物干预及洗脱后细胞的生长变化,综合免疫印迹实验以及转录组数据挖掘分析分子信号通路的变化。2.应用CRISPR文库以及药物库筛选寻找阻断适应性改变的策略。3.应用免疫印迹实验、免疫组织化更多学、siRNA实验以及转录组数据分析阻断适应性改变的分子机制。4.在细胞、类器官以及细胞系衍生异种移植肿瘤模型中验证策略及其作用机制。研究结果1.细胞克隆形成实验发现MRTX1133洗脱后细胞增值水平恢复;综合免疫印迹实验发现磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)随着时间延长出现反弹。2.CRISPR激酶文库筛选得出EGFR的敲减具有协同致死作用,同时药物筛选发现EGFR阻断与MRTX1133有协同致死作用。3.免疫印迹实验和免疫组织化学提示EGFR激活;转录组数据发现ERBB受体反馈抑制因子1(ERRFI1)下调。4.细胞、类器官以及肿瘤细胞荷瘤模型中EGFR抑制剂与MRTX1133均具有协同作用。研究结论MRTX1133的干预导致KRASG12D突变的CRC细胞可逆性生长停滞,同时伴随RAS效应信号的部分再激活。从机制上讲,MRTX1133治疗通过下调了 ERBB受体反馈抑制剂1(ERRFI1)的表达,从而导致EGFR反social medicine馈激活。野生型RAS进一步介导激活EGFR下游的信号传导,导致RAS效应器反弹并降低MRTX1133的疗效。因此,EGFR抑制剂与MRTX1133的联合使用可以更有效的抑制KRASG12D突变型CRC类器官和细胞系衍生异种移植肿瘤。总之,我们的研究揭示了 EGFR的反馈激活是限制KRASG12D抑制剂疗效的一个重要分子事件,并为KRASG12D突变型CRC患者建立了一种由KRASG12D和EGFR抑制剂组成的潜在联合疗法。

目的:研究中性粒细胞在狼疮性肾炎(Lupus Nephritis,LN)发病前的不同阶段对浆细胞调控的分子机制;中性粒细胞通过分泌IL-6调控B细胞铁死亡作为临床治疗狼疮性肾炎靶细胞、靶蛋白的潜在可能。方法:SPF级的健康C57BL/6雌性小鼠,体重18～22g,随机分为7个组,包括空白对照组和六个时间段的造模组:1天、3天、7天、14天、30天、180天,经其腹腔一次性注射Pristane(500μL/只)诱导狼疮小鼠模型,空白对照组给予等体积的PBS。(1)HE、Masson染色观察小鼠脾和肾脏的病理改变。(2)免疫荧光观察中性粒细胞与浆细胞的共存关系。(3)流式细胞术检测不同时间段的模型小鼠脾和肾脏中的中性粒细胞和浆细胞的表达Wnt-C59水平和动态分布特征。(4)单细胞测序结合流式细胞术鉴定中性粒细胞亚群及IL-6的主要来源,用scRNA-seq分析中性粒细胞与B细胞之间的信息交流。(5)通过中性粒细胞和B细胞共培养实验,用scRNA-seq分析结合流式细胞术和免疫荧光术研究分别抑制IL-6和SLC7A11后狼疮肾B细胞发生铁死亡的水平。结果:(1)HE染色可见模型组小鼠脾脏中脾窦结构破坏,肾脏皮质区的肾小球结构发生改变数量减少,系膜区不同程度的系膜细胞增生及基质增多。Masson染色可见肾小球肾小管发生纤维化。(2)免疫荧光结果显示在模型组小鼠的肾脏中性粒细胞与浆细胞有共存关系,注射Pristane 30天模型组脾中性粒细胞荧光强度明显高于空白对照组,注射Pristane 30天模型组肾的中性粒细胞的荧光强度明显高于空白对照组。(3)流式结果显示注射Pristane 30天模型组脾中性粒细胞表达最多,注射Pristane 14天模型组肾的中性粒细胞表达最多,变化趋势与免疫荧光相同。(4)单细胞测序分析结果显示狼疮肾中性粒细胞可分为三个亚群,hip infection其中Ly6G中性粒细胞亚群是分泌IL-6的主要亚群。来源于中性粒细胞的IL-6可以调节狼疮肾中性粒细胞和B细胞之间的相互作用。(5)在抑制IL-6或者用柳氮磺胺吡啶处理共培养的B细胞和中性粒细胞后,狼疮小鼠肾脏的B细胞中Fe~(2+)信号增强,细胞脂质过氧化程度增加,细胞内GSSG/GSH的比值升高,细胞内GSH浓度降低,B细胞的增殖/有丝分裂显著降低。结论:(1)中性粒细胞和B细胞/PD-0332991试剂浆细胞在狼疮模型组脾和肾的表达存在动态变化。(2)狼疮肾Ly6G中性粒细胞亚群分泌的IL-6通过SLC7A11诱导狼疮肾B细胞发生铁死亡抵抗。

双酚基丙烷又称双酚A(Bisphenol A,BPA),是一种重要的工业化合物,常用于日常塑料用品的制造领域。已有证据表明,BPA作为一种环境内分泌干扰物,可通过消化道、呼吸道、皮肤等途径进入机体,与细胞表面受体结合进而影响组织器官,引起哺乳动物的生殖内分泌和代谢功能紊乱。肝脏作为哺乳动物重要的代谢器官,参与调控机体的糖脂代谢和胆汁分泌。有研究发现,长期摄入BPA会使动物肝脏发生脂肪变性,破坏哺乳动物肝脏的糖脂代谢稳态,并最终诱发非酒精性脂肪肝的出现。然而,关于BPA暴露损害肝脏糖脂代谢的具体作用机制目前仍不清楚。生物钟作为一种保守的生命活动调控系统,参与调节多种糖脂代谢关键基因的节律性表达,从而在维持哺乳动物糖脂代谢稳态过程中发挥重要作用。本课题组前期研究发现,B更多PA通过扰乱生物钟基因Nr1d1的表达进而抑制小鼠睾酮合成,但BPA是否影响小鼠的肝脏生物钟和糖脂代谢功能目前仍不清楚,亟需进一步的探究。本研究首先利用野生型雄性小鼠和小鼠肝实质细胞(AML12细胞)系建立了BPA暴露模型,然后使用流式细胞术、q PCR、BODIPY荧光染色、Western blot(WB)、Kronos AB-2550细胞实时生物荧光测定系统、试剂盒定量检测等多种实验技术,系统探究了BPA对小鼠肝脏生物钟系统和糖脂代谢功能的影响,具体结果如下:1.CCK8和流式细胞术检测结果表明,对AML12细胞活力和凋亡无显著影响的最大BPA处理浓度为100μM,后续使用该浓度处理AML12细胞。q PCR检测结果表明,BPA处理显著改变了生物钟基因(Bmal1、Nr1d1、Per2、Dbp)和糖脂代谢相关基因(Srebp1c、Fasn、Hmgcr、Cd36、Lpin1、Pparα、Pparγ、Elovl6、Glut2)m RNA在非同步化AML12细胞的表达;BODIPY荧光染色结果表明,BPA处理对AML12细胞的中性脂肪含量无显著影响Medial pivot;WB结果表明,BPA处理AML12细胞24 h后,显著降低了生物钟蛋白BMAL1的表达;细胞实时生物荧光测定系统结果表明,BPA处理显著降低了Per2::Luc小鼠肝脏组织块Per2::Luc的荧光素酶活性;将AML12细胞进行同步化处理后,对照组和BPA处理组的生物钟基因(Bmal1、Nr1d1)m RNA表达量均具有显著的节律性变化,BPA处理显著提高了生物钟基因Bmal1的表达量。同时,BPA显著抑制了Hmgcr m RNA在AML12细胞的表达,促进了Pparαm RNA在AML12细胞的表达。2.为深入探究BPA对小鼠生物钟系统与糖脂代谢功能的影响,通过查阅参考文献进一步确定了使用50μg/kg/day BPA、持续灌胃小鼠6周的造Proteases抑制剂模方法。灌胃过程中,记录小鼠体重(每隔一天)、采食量和饮水量(每隔两天)的变化。灌胃6周后,使用小鼠转轮节律监测系统检测小鼠活动节律。小鼠转轮节律监测系统、采食量及饮水量的结果显示,与对照组相比,BPA处理组小鼠内源性周期显著延长,饮水量和采食量均显著升高;全天血糖检测、葡萄糖耐量和胰岛素耐量实验结果表明,BPA处理组与对照组相比全天血糖浓度显著下降,BPA处理组葡萄糖的代谢速率和胰岛素敏感性均显著低于对照组,BPA处理组的曲线下面积在葡萄糖和胰岛素耐量实验中均显著高于对照组;试剂盒检测结果显示,肝糖原含量、血清及肝脏甘油三酯含量在对照组和BPA处理组中均无显著差异;q PCR和WB结果表明,对照组和BPA处理组小鼠肝脏生物钟基因(Bmal1、Nr1d1、Dbp和Per2)m RNA表达量均具有昼夜节律性表达,但BPA处理组生物钟基因m RNA表达的振幅和相位均发生了改变;BPA降低了小鼠肝脏生物钟基因Bmal1和脂代谢相关基因Srebp-1c、Fasn、Hmgcr及Elovl6 m RNA的表达,却促进了生物钟基因Dbp、Nr1d1和糖脂代谢基因G6pc、Cyp7a1及Cd36 m RNA的表达。此外,BPA处理显著降低了BMAL1和DBP蛋白的表达量,但显著升高了NR1D1、FASN和SREBP1C蛋白的表达。综上所述,BPA处理显著改变了生物钟基因和部分糖脂代谢相关基因在AML12细胞的表达,并从在体水平上导致小鼠内源性周期显著延长,引起小鼠血糖降低与胰岛素敏感性下降,破坏了血糖稳态。同时,BPA处理扰乱了小鼠肝脏生物钟基因(Bmal1、Nr1d1和Dbp)和糖脂代谢相关基因(Srebp1c、Cd36、Elovl6、G6pc和Glut2)的表达。本研究为深入解析BPA影响肝脏生物钟与糖脂代谢的作用机制提供了前期基础,为从时间毒理学的角度探究BPA的肝脏毒性提供一定的理论支撑。

<正>1病历摘要患者女，9岁，藏族。因牙龈广泛增生2周就诊。患者于2周前无明显诱因出现牙龈增生，尤其以上前牙牙龈为增生为重，伴双侧颌下轻度肿胀，无其他明显不适症状，未作任何检查及处理。病程中精神食欲尚可，二便正常，无明显发烧、疲劳乏力、鼻出血、牙龈出血等不适症状。患儿既往体健，无特殊近期家庭内装修史及可疑因素selleckchem Compound 3接触史，无特殊家族遗传史。查体：T:36.7℃P:97次/分R:19次PTGS Predictive Toxicogenomics Space/分BP98/60mm Hg,一般情况平稳，神志清，精神尚可，发育正常，面色及粘膜色泽正常，全身皮肤粘膜未见明显出血点、瘀斑，步入诊室。双侧颌下及胸锁乳突肌前后缘可扪及多发淋巴结肿大，触压痛（+）。口腔检查见全口牙龈增生，肥大，以上前牙为甚，增生高度接近咬合面，Staurosporine NMR外形不整齐，色浅红色，质软，触诊无明显出血。图1所示：

目的 分析老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者合并肺栓塞现状及影响因素。方法 选取2021年12月至2022年12月本院收治的老年COPD患者100例为研究对象，按照是否合并肺栓塞分为对照组60例(未合并肺栓塞)和实验组40例(合并肺栓塞)。比较两组患者临床特点，分析影响因素。结果 两组患者性别、年龄、临床胸痛表现、临床咯血表现、临床咳嗽表现、临床呼吸困难表现比较差异均无统计学意义(均P>0.0Medical diagnoses5),两组患者静脉血栓史、卧床时间≥7 d、长期服用抗凝药物以及抗血小板药物、临床晕厥表现、临床下肢血栓形成表现、动脉血二氧化碳分压、D-二聚体、主肺动脉/升主动脉>1、合并恶性肿瘤、肥胖方面比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素logistic回归模型分析结果显示：卧床时间≥7 d、静脉血栓史、D-二聚体、主肺动脉/升主动脉>1为老年COPD患者合并肺栓塞的危险因素(均P<0.05),长期服用抗凝药物以及抗血小板药物、动脉血二氧化碳分压为老年COPD患者合并肺栓塞的保护因素(均P<0.05)。结论 卧床时间≥7 d、静脉血栓史、长期服用抗凝药物以NVP-TNKS656及抗血小板药物、D-Dinaciclib二聚体、动脉血二氧化碳分压、主肺动脉/升主动脉>1等是老年COPD患者合并肺栓塞的主要影响因素。

目的:探讨桂枝汤加减治疗在产后荨麻疹患者中的应用。方法:依据随机数字表法分配原则将60例产后荨麻疹患者分为对照组(30例)和观察组(30例)。对照组给予炉甘石洗剂外用联合氯雷他定片口服治疗，观察组给予炉甘石洗剂外用联合桂枝汤加减治疗。两组均治疗28 d,随访3个月。对比两组治疗后的临床疗效，治疗前后的临床症状积分、免疫功能、血清组胺、白介素-4(IL-4)、购买GSK2118436白介素-2(IL-selleckchem Emricasan2)水平、生活质量评分，治疗期间安全性。结果:观察组治疗后总cholesterol biosynthesis有效率96.67%高于对照组的76.67%(P<0.05);治疗后，两组患者临床症状各项评分、血清组胺、免疫球蛋白E(IgE)、IL-4、IL-2水平与治疗前比较均降低，其中观察组低于对照组(P<0.05);血清补体3(C3)、补体4(C4)、免疫球蛋白A(IgA)水平、生活质量各项评分则升高，观察组高于对照组(P<0.05)。结论:产后荨麻疹患者应用桂枝汤加减治疗具有较显著的临床治疗效果，可提高生活质量，可改善患者临床症状以及免疫功能，还对机体的炎症因子水平有明显抑制作用，降低其复发率。