SRC信号通路

目的:探讨飞秒激光辅助白内障超声乳化联合房角分离术治疗原发性急性闭角型青光眼合并白内障的临床疗效。方法:选取2020-04/2021-02我院收治的原发性急性闭角型青光眼合并白内障患者53例60眼，根据手术方式进行分组，A组28例30眼行飞秒激光辅助白内障超声乳化吸除联合房角分离术，B组25例30眼行传统白内障超声乳化吸除联合房角分离术。记录两组术中有效超声乳化时间(EPT)和超声乳化累积耗散能量(CDE),随访至术后3mo,观察两组眼压、前房Western medicine learning from TCM深度(ACD)、最佳矫正视力、角膜内皮细胞丢失率(ECL)及手术并发症情况。结果:与术前相比，两组术后眼压显著降低，ACD显著加深(均P<0.05),但两组间眼压和ACD均无差异(均P>0.05);两组术后最佳矫正视力显著优于术前(P<0.05),且术后1d时A组显著优于B组(P<0.05);A组术中EPT和CDE、术后ECL及并发症发生率(7%vs 27%)均显著低于B组(均P<0.05)。结Immunology & Inflammation抑制剂论:飞秒激光辅助白内障超声乳化联合房角分离术治疗原发性急性闭角型青光眼合并白内障治疗效selleckchem BMS-354825果显著，可有效提高手术安全性，降低角膜内皮细胞丢失率，且并发症少。

目的：探讨罗格列酮对脂多糖（LPS）诱导的急性肾损伤（AKI）小鼠肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用，并阐明其作用机制。方法：18只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+罗格列酮组，每组6只。LPS组和LPS+罗格列酮组小鼠均腹腔注射LPS (10 mg·kg-1);LPS+罗格列酮组小鼠在LPS注射前30 min尾静脉注射罗格列酮（0.5 mg·kg-1）；对照组小鼠注射与LPS组小鼠同体积的生理盐水。LPS注射24 h后处死小鼠，收集肾组织和血清。HE染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现，分光光度法检测各组小鼠血清中肌酐（CRE）和血尿素氮（BUN）水平，实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组小鼠肾组织中长链脂酰CoA合成酶4 (ACSL4antiseizure medications)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11 (SLC7A11)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素1β (IL-1β)和肿瘤坏死因子α (TNF-α) mRNA表达水平，WesternBYL719 blotting法检测各组更多小鼠肾组织中GPX4、SLC7A11和ACSL4蛋白表达水平。结果：HE染色，与对照组比较，LPS组小鼠肾小管管腔内出现空泡结构，肾小管损伤评分明显升高（P<0.01）；与LPS组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中细胞排列紧密，管腔内基本无空泡，肾小管损伤评分明显降低（P<0.01）。与对照组比较，LPS组小鼠血清中CRE和BUN水平明显升高（P<0.01）；与LPS组比较，LPS+罗格列酮组小鼠CRE和BUN水平明显降低（P<0.01）。RT-qPCR法和Western blotting法，与对照组比较，LPS组小鼠肾组织中ACSL4 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.01）,GPX4和SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.01）,IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA表达水平升高（P<0.01）；与LPS组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中ACSL4 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）, GPX4和SLC7A11 mRNA及蛋白水平明显升高（P<0.01）,IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA表达水平降低（P<0.01）。结论：罗格列酮可通过调控ACSL4改善LPS诱导的AKI小鼠肾小管上皮细胞铁死亡。

目的:主动脉夹层(Aortic Dissection,AD)是致命性心血管疾病,目前其临床预测标志物较少且致病分子机制研究不明。本研究主要目的包括(1)筛选AD患者血清中差异表达的外泌体mi RNAs及其靶基因参与的信号通路。(2)评估差异表达的外泌体mi RNAs和蛋白对主动脉夹层的诊断效能。(3)研究AD血清外泌体对主动脉夹层的致病作用。(4)探讨AD血清外泌体中目标mi RNA引起内皮细胞损伤促进AD发生发展的作用靶点及分子机制。方法:第一部分:收集AD患者和健康体检者血清进行外泌体分离纯化鉴定后,进行外泌体mi RNAs测序分析。使用DEGseq对差异表达的mi RNAs进行分析,Target Scan对外泌体差异表达的mi RNAs靶基因预测,DAVID分析靶基因参与的GO富集过程和KEGG信号通路。第二部分:通过对第一部分差异表达的外泌体mi RNAs进行筛选,挑选差异表达倍数高、与AD发病相关的外泌体mi RNAs进一步使用RT-PCR扩大验证。与AD发病相关的蛋白(MMP-9/12等)进行ELISA检测。统计学分析后绘制ROC曲线评估mi RNA和蛋白的诊断价值。并用spearman分析标志物之间的相关性,在此基础上,选择mi RNA和蛋白作为联合诊断的潜在生物标志物,评估联合诊断效能。第三部分:提取主动脉夹层患者和健康人群的血清外泌体并通过蛋白质免疫印迹、浓度粒径分析和透射电子显微镜进行表征。用PKH26标记外泌体,荧光倒置显微镜观察内皮细胞对外泌体摄取作用。使用氨基丙腈和Ang-II构建主动脉夹层体内外损伤模型,通多蛋白质免疫印迹反应、TUNEL、CCK-8、划痕实验和成管实验研究外泌体对内皮细胞凋亡、增殖、迁移和成管的影响。第四部分:AD患者外泌体可以促进内皮细胞损伤,前期测序结果发现主动脉夹层患者血清外泌体mi RNA与健康人群表达存EMB endomyocardial biopsy在差异,由此我们推断AD外泌体致病作用是通过外泌体中的mi RNA导致的。根据第一部分及第二部分结果,选择差异表达倍数较高、诊断效能好、与AD发病相关的mi R-202-3p作为研究重点,通过RT-PCR验证外泌体包裹释放mi RNA。过表达mi R-202-3p,通过流式凋亡检测试剂盒、CCK-8、划痕实验和成管实验研究其对内皮细胞凋亡、增殖、迁移和成管的影响。使用Target selleck抑制剂Scan数据库预测mi R-202-3p靶基因,并用双荧光素酶基因报告进行验证。抑制mi R-202-3p和靶基因表达,通多蛋白质免疫印迹和RT-PCR研究mi RNA-202-3p对靶基因及信号通路的调控。结果:第一部分:当P<0.05和|log2foldchange(FC)|>0.5时,筛选出差异表达的外泌体mi RNAs有231个,表达量上调的有130个,表达量下调的有101个。生物信息学富集分析发现,差异表达的外泌体mi RNAs靶基因主要集中在细胞粘附、蛋白质乙酰化、细胞生物合成等过程。参与Ras信号通路、细胞外基质粘附和上皮细胞信号传导等信号通路。第二部分:RT-PCR对筛选的8个外泌体mi RNAs进一步扩大验证,发现主动脉夹层患者血清外泌体中mi R-499a-5p、mi R-543、mi R-206、mi R-4433b-3p、mi R-744-5p、mi R-4488、mi R-202-3p的表达量明显上调(P<0.05),这些mi RNAs表达趋势与测序结果一致。此外,还发现与AD发病相关的蛋白MMP-9、MMP-12、TGF-β和D-二聚体表达水平变化。进一步评估了差异表达外泌体mi RNAs和蛋白的诊断效能,诊断灵敏度最高为mi R-744-5p(93.3%,AUC=0.831),诊断特异性最高为mi R-4433b-3p(86.7%,AUC=0.861)。并且发现mi R-499a-5p、mi R-4433b-3p和mi R-206灵敏度和特异度均在80%以上。在相关性分析的基础上,mi RNAs和蛋白作为联合诊断的潜在生物标志物,联合诊断中灵敏度最高的组合为mi R-202-3p+TGF-β(96.7%,AUC=0.844),特异度最高的组合为mi R-499a-5p+mi R-4433b-3p(85%,AUC=0.840)。对诊断效能较高的mi RNA进行靶基因功能富集,结果显示其靶基因可能参与调控淀粉样蛋白-β代谢过程、T细胞迁移、Fox O、突触囊泡循环和PI3K-Akt等信号传导途径。第三部分:对两组患者血清外泌体表达量进行分析发现,AD患者血清中外泌体表达量增多,并且外泌体可以被内皮细胞摄取、内化进而在细胞间发挥作用。将AD患者(AD-Exo)和健康人群(Con-Exo)的血清外泌体转染进内皮细胞,结果发现,AD-Exo明显促进内皮细胞凋亡、抑制内皮细胞增殖、迁移和血管生成(P<0.05),而抑制外泌体后,AD-Exo对内皮细胞损伤程度减轻(P<0.05)。第四部分:外泌体mi R-202-3p在主动脉夹层模型小鼠和AD患者血清中表达升高,外泌体作为载体,可以包裹释放mi R-202-3p。内皮细胞中过表达mi R-202-3p后,与AD-Exo的损伤结果一致,内皮细胞凋亡程度增加,增殖、迁移和血管生成降低(P<0.05)。通过Target Scan预测和双荧光素酶基因报告实验确认PI3KCA是mi R-202-3p下游靶基因,且受到mi R-202-3p的负向调控。在外源性干预mi R-202-3p条件下联合PI3K抑制剂,内皮细胞凋亡、增殖、迁移和血管生成能力得到部分恢复。Compound C抑制剂AD患者和小鼠AD模型的主动脉中,PI3K/AKT/Fox O1信号通路激活,基因表达水平出现轴向变化。过表达mi R-202-3p后,蛋白质印迹反应和RT-PCR检测PI3KCA、p-AKT和p-Fox O1表达水平出现轴向变化,PI3KCA、p-AKT表达水平降低,p-Fox O1表达水平升高。结论:(1)在AD患者血清中,通过高通量测序技术筛选出231个差异表达的外泌体mi RNAs。其靶基因主要集中在蛋白质乙酰化、细胞生物合成等过程,主要参与Ras信号通路、细胞外基质粘附、上皮细胞信号传导等信号通路。(2)mi R-499a-5p、mi R-202-3p等在主动脉夹层患者血清外泌体中表达水平升高,并且对主动脉夹层具有较高的诊断效能。相比单一指标,mi R-499a-5p+mi R-4433b-3p组合联合诊断效能较优。(3)主动脉夹层患者血清中外泌体蛋白含量升高,可以被内皮细胞摄取、内化,进而影响内皮细胞凋亡、成管、迁移和增殖等过程,表明AD-Exo介导内皮细胞损伤参与主动脉夹层发病过程。(4)AD患者血清中差异表达的外泌体mi R-202-3p通过靶基因PI3K负向调控PI3K/AKT/Fox O1信号通路发挥其内皮细胞损伤作用,促进主动脉夹层发生发展。

目的 通过网络药理学方法探讨柠檬苦素治疗肝纤维化的作用机制，并运用分子对接和动物实验进行验证。方法首先，利用SwissTargetPrediction、GeneCards和DisGeNet等数据库筛选柠檬苦素和肝纤维化的靶点，并运用微生信网站获得柠檬苦素与肝纤维化的共Gefitinib同靶点。然后运用STRING数据库和Cytoscape软件构建共同靶点的蛋白质相互作用网络，并利用CytoNCA插件筛选核心靶点；使用Metascape数据库对共同靶点进行GO功能注释和KEGG通路富集分析，以预测其可能的作用机制。最后运用AutoDockVina软件对柠檬苦素与核心靶蛋白进行分子对接验证，并将网络药理学预测结果进行动物实验验证。结果 预测结果表明柠檬苦素可能作用于AKT1、VEGFA、HIF1A等86个靶点，参与激素应答、蛋白磷酸化、血管生成等生物过程和PI3K/AKT通路、HIF-1通路、VEGF通路等与肝纤维化相关的信号通路。蛋白质相互作用分析结果显示核心靶点包Genetic-algorithm (GA)括AKT1、VEGFA、HIF1A、PIK3CA等11个靶点。分子对接结果表明柠檬苦素与AKT1、VEGFA、HIF1A 3个核心靶蛋白具有较强的结合活性和稳定的结合构象。动物实验显示，与模型组比较，柠檬苦素高剂量组(high-dosegroupoflimonin,LH)、柠檬苦素低剂量组(low-dosegroupoflimonin,LL)中血清透明质酸(hyaluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)含量(LL组中LN除外)均下降(P<0.01或P<0.05)，肝组织炎症和纤维化程度均减轻；蛋白免疫印迹法(Western blotting)和实时荧光定量PCR(qPCR)检测显示LH、LL组肝组织中AKT、HIF-1α、VEAZD6738采购GF蛋白和mRNA表达水平(LL组中VEGF除外)均下调(P<0.01或P<0.05)。结论 柠檬苦素主要作用于AKT1、VEGFA、HIF1A等核心靶点来干预肝纤维化血管新生，其机制可能与其抑制AKT/HIF-1α/VEGF信号通路有关。

脂肪酶作为一种绿色的生物催化剂,因其优异的催化特征而被广泛的应用于食品、医药、皮革、化工与环境等工业领域。高温、有机溶剂、极端pH等特殊环境因素则限制了脂肪酶在这些领域的进一步应用。筛选鉴定能够极端环境,特别是热稳定性的脂肪酶引起了研究者的广泛关注。本研究在实验室之前的基础上表征了一个嗜热玫瑰红球菌(Thermomicrobium roseum DSM 5159)来源的嗜热脂肪酶,并且对其表达系统、晶体结构、耐热框架和催化效率进行了研究,获得主要结果如下:(1)对来自嗜热玫瑰红球菌(T.roseum DSM 5159)的一个脂肪酶基因进行了重组表达和鉴定。分别在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)和枯草芽孢杆菌B.subtilis W600两个系统中表达,命名为TrLipE和TrLipB。肽质量指纹图谱分析进一步证实了TrLipE和TrLipB的成功表达。不同表达系统表达的TrLipE和TrLipB均在较宽的温度和pH范围内显示出显著的稳定性。同时,TrLipE和TrLipB在由水和有机溶剂组成的混合体系中均表现出显著的耐受性。酶的表征结果表明,TrLipB具有更好的酶促性能,特别是耐热性和耐有机溶剂性。圆二色谱(CD)分析结果selleckchem Galunisertib显示二者的二级结构组成略有不同。同时通过Nano-DSC分析进一步验证了TrLipE和TrLipB的热稳定性。进一步对TrLipE和TrLipB底物特异性和酶促动力学进行了分析,结果表明了TrLipE和TrLipB对不同碳链长度的对硝基苯酯具有不同催化性能。此外,固定化TrLipB被证实可以进行酯交换反应,其转化三丁酸甘油酯和甲醇生成丁酸甲酯的摩尔转化率最高为23.32%,这说明TrLipB具有极大的潜力应用于生物柴油的生产。(2)鉴于TrLipB的优异的特征,通过坐滴气相扩散法对TrLipB进行了结晶。在经过质量检测后对TrLipB结晶条件进行筛选和优化,最终获得了TrLipB的晶体。优化后的晶体筛选条件为1 mol/L的琥珀酸、0.1 mol/L的HEPES、1%的PEG 2000 MME(w/v)、pH 7.0。进一步X-射线衍射获得的数据经XDS程序处理之后可知TrLipB晶体的分辨率达到2(?),属于P43212空间群。结构分析结果显示,TrLipB的晶体结构符合典型α/β水解酶结构。进一步的结构比较结果表明TrLipB和Bacillus cohnii strain N1来源的HSL家族的酯酶具有较高的结构相似性。(3)通过将TrLipB结构表面相对柔性区域(Loop)的脯氨酸(Pro)依次替换成甘氨酸(Gly),研究了Loop区域的Pro对TrLipB耐热框架的重要作用。结果发现,多数突变体的热稳定性显著降低,且稳定性随突变位点的增加而进一步下降。进一步的酶促反应结果表明大部分突变体的催化效率显著降低。但是突变体P48G和P49G催化效率却得到了提高(130%左右)。分子动力学模拟(MD)结果表明,突变体具有较高的B-因子和RMSD值,而且这些突变体的二级结构、回旋半径(R_g)、H-键和溶剂可及表面积均展现出了显著的改变,这些结果表明Loop区域的Pro对TrLipB的耐热框架具有重要作用。此外,通过“盖子”交换构建了了18个嵌合体,嵌合体的最优温度和它们在最优温度下的半衰期同样小于TrLipE。进一步的MD模拟结果表明,相比于原始酶,嵌合体具有较大的柔性和相对较差的热稳定性,这表明脂肪酶的“盖子”结构域对其热稳定性同样具有重要的作用。(4)通过与其它脂肪酶进行N-端“盖子”结构的交换改变了TrLipE嵌合体的酶活力和底物特异性。结果表明,与PR-171纯度野生TrLipE相比,18个嵌合体具有与TrLipE相似的pH耐受范围和最优pH值。并且,各嵌合体对不同链的对硝基苯酚酯底物亲和力(K_m)及催化效率(k_(cat)/K_m)各异。在底物特异性方面,嵌合体TrL-2、TrL-3、TrL-17、TrL-18可以特异性的水解原始酶TrLipE不能水解的底物4-硝基苯安香息酸酯。其中嵌合体TrL-17拥有最高的催化效率。为了进一步提高TrL-17的催化能力,依据TrL-17与底物的分子对接结果同时采用降低酶与底物复合物结合能的策略对相应的氨基酸进行突变。结果表明,突变体催化4-硝基苯安香息酸酯的效率强于野生的TrL-17,其new infections催化效率(k_(cat)/K_m)最高达到了TrL-17的3倍多。

番茄褪绿病毒(tomato chlorosis virus,ToCV)是近年来在世界范围内危害严重的蔬菜病毒。由于ToCV寄主范围广、传播介体防治困难,最终在我国各地迅速爆发。感染ToCV的番茄植株长势矮小,果实的商品性下降,严重时甚至导致绝产,造成严重经济损失。目前对ToCV的研究多集中在分离物的检测和分子特征分析方面,对ToCV的致病机理、病毒与寄主植物及传播介体间的相互作用等有待进一步探究。病毒往往借助寄主细胞组分完成侵染,侵染过程也会触发植物体的抗病反应,因此,筛选与ToCV编码蛋白互作的寄主蛋白,有助于揭示番茄与ToCV互作的分子机制,为ToCV的防治和抗病育种奠定基础。本研究利用ToCV编码的HSP70h蛋白和番茄cDNColforsin试剂A酵母文库,筛选获得与HSP70h互作的番茄过敏性诱导反应蛋白SlHIR1;将SlHIR1基因转化本氏烟,获得超表达转基因株系,抗病性分析表明,SlHIR1基因超表达株系对ToCV抗性明显强于对照;转录组、代谢组联合分析表明,与野生型相比,SlHIR1基因超表达株系类黄酮生物合成相关基因表达上调,代谢通路也呈现显著差异;外源喷施试验证明,类黄酮可以增强番茄对ToCV的抗性。本研究初步明确了ToCV HSP70h在病毒侵染中的作用,通过酵母文库筛选Calanoid copepod biomass到与其互作的SlHIR1蛋白,经多组学测定分析发现番茄植株可以通过SlHIR1蛋白响应ToBI 10773 molecular weightCV的侵染并影响类黄酮的生物合成,从而增加植物的抗病性,这对番茄抗病基因的利用及培育抗ToCV的番茄植株具有重要的指导意义。

本试验以初始体重为0.81 g的凡纳滨对虾为研究对象，在盐度30‰条件下研究饲料中蛋白质和淀粉水平对凡纳滨对虾生长性能、体组成、肝AZD1152-HQPA使用方法胰腺和血淋巴生理生化指标的影响。采用3×2双因子试验设计，设3个蛋白质水平（36%、39%和42%）和2个淀粉水平（13%和18%），共配制6种试验饲料。每种试验饲料随机投喂3桶试验虾，每桶30尾，每天投喂4次。试验期为8周。结果显示：饲料中蛋白质水平显著影响凡纳滨对虾的特定生长率、饲料系数和蛋白质效率（P<0.05），而饲料中淀粉水平则对凡纳滨对虾的特定生长率、饲料系数和蛋白质效率无显著影响（P>0.05）。42%蛋白质+13%淀粉组凡纳滨对虾有最高的特定生长率。无论是在13%还是18%淀粉水平下，39%蛋白质组的特定生长率和饲料系数均与42%蛋白质组无显著差异（P>0.05）。36%蛋白质+13%淀粉组凡纳滨对虾肝胰腺中淀粉酶活性最高，并显著高于其他组（P<0.05）。饲料中淀粉水平对凡纳滨对虾肝胰腺中己糖激酶活性有显著影响（P<0.05），己糖激酶活性随Integrated Chinese and western medicine着饲料中淀粉水平的升高而升高。饲料中蛋白质水平对凡纳滨对虾肝胰腺中肝糖原浓度有显著影响（P<0.05），肝糖原浓度随着饲料中蛋白质水平的升高而升高。饲料中蛋白质水平对凡纳滨对虾血淋巴中氨和总蛋白浓度有显著影响（P<0.05），氨和总蛋白浓度随着饲料中蛋白质水平的升高而升高。饲料中蛋白质和淀粉水平对凡纳滨对虾虾体的水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量均更多无显著影响（P>0.05）。综合分析得出，在本试验条件下，凡纳滨对虾饲料中适宜的蛋白质和淀粉水平分别为39%和13%。

目的 探讨自身免疫性脑炎(AE)患者血清免疫球蛋白水平与其疾病转归的关系。方法 选取2019年1月至2022年1月四川大学华西医院收治的95例AE患者设为观察组，另选择60例同期正常clinical and genetic heterogeneity体检者设为对照组。比较两组免疫球蛋白水平；比较观察组中不同预后患者免疫球蛋白水平，并分析AE患者疾病转归的影响因素。结果 观察组免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);观察组中预后良好者64例，预后不良者31例；预后良好组IgA、IgM、IgG水平均低于预后不良者，差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线提示血清IgA、IgM、IgG单独检测评估AE患者预后的曲线下面积(AUC)为0.671、0.7RepSox小鼠26、0.835,低于三者联合检测的AUC 0.909(P<0.05);多因素分析提示血清IgA、IgM、IgG水平均为AE患者疾病转归的独立影响因素(P<0.05)。结论 AE患者血清IgA、IgM、IgG水平均显著提升，且与患者疾病转归密切相关；同时血清免疫球蛋白水平为AE患者疾Crizotinib溶解度病转归的独立影响因素，对其预后评估具有一定参考价值。

目的 运用网络药理学方法分析消炎退热颗粒清热抗炎的作用机制，并采用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS/MS）技术测定其8种主要活性成分。方法 通过Swiss Target Prediction数据库筛选退热颗粒入血成分的靶点，利用CTD数据库获取符合发热的疾病主要靶点，借助String平台进行蛋白相互作用（PPI）分析；通过DAVID数据库进行GO功能与KEGG通路富集分析，然后用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络，并对关键化合物-靶点进行分子对接验证。采用UPLC-MS/MS法测定消炎退热颗粒中靛玉红、异甘草素、甘草素、甘草酸、甘草苷、秦皮乙素、咖啡酸、绿原酸的含量。采用WATERS ACQUITY UPLC~?BEH C_(18)色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）；以0.1%甲酸乙腈（A)-0.1%甲酸-5 mmol·L~(-1)甲酸铵（B）为流动相进行梯度洗脱，以多反应监测（MRM）模式进行测定。结果 网络药理学及分子对接筛选出消炎退热颗粒中靛玉红、秦皮乙素和咖啡酸等16个潜在的活性成分，获得转录因子（JUN）、黏着连接蛋白β1(CTNNEpigenetics抑制剂B1）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3）等10个核心靶点，通路富集分析发现其清热抗炎作用主要涉及白细胞介素17(IL-17）和缺氧诱导因子1(HIF-1）等信号通路；分子对接实验表明主要活性成分与关键靶点对接呈现良好的亲和力。含量测定结果表明，各成分在各自的浓度范围内具有良好的线性关系（r>0.999），精密度、准确度和稳定性良好。16批样品中8种成分的含量分别为0.9Entinostat说明书4～3.41、0.99～5.61、0.80～5.84、85.48～141.11、4.30～10.09、152.35～271.80、11.31～26.94、1.99～5.58μg·g~(-1)，其中，2个厂家样品中靛玉红、甘草Media attention素、异甘草素、甘草苷和绿原酸的含量具有显著性差异。结论 该研究初步揭示了消炎退热颗粒多成分、多靶点、多途径发挥清热抗炎的作用机制；建立了消炎退热颗粒多成分的含量测定方法，为其药理学研究和质量控制提供了参考依据。

探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异性哮喘（CVA）大鼠炎症反应的作用及机制。6～8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组以及麻杏石甘汤低、中、高剂量组，每组8只；采用卵蛋白（OVA）和氢氧化铝[Al(OH)_(3)]致敏并用OVA激发的方法复制大鼠CVA模型，正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃，各受试药组给予相应药物灌胃。实验结束后，检测各组大鼠血液白细胞计数，血清白细胞介素6（IL-6）、STM2457研究购买白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量；苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理变化；蛋白免疫印迹法检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88（MyD88）、核转录因子-κB（NF-κB p65）和磷酸化核转录因子-κB（p-p65）、丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）水平，实时荧光定量分析法检测肺组织中TLR4、MyD88 mRNA表达水平。结果显示，与正常组比较，模型组大鼠具有明显哮喘Decitabine研究购买表型，血液白细胞计数和IL-6、TNF-α水平显著升高（P<0.01），IL-10水平显著降低（P<0.01），气道周围炎症细胞浸润明显，细胞排列紊乱，肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平以及TLR4、MyD88 mRNA水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较，孟鲁司特钠组、麻杏石甘汤高剂量组白细胞计数和IL-6、TNF-α水平显著降低（P<0.01），IL-10水平显著升高（P<0.01），气道炎症细胞浸润、细胞排列紊乱程度明显减轻，肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平以及TLR4、MyD88 mRNA水平显著降低（P<0.05，P<0.01）。与孟鲁司特钠组比较，麻杏石甘汤高剂量组大鼠血液白细胞数，血清中IL-10和TNF-α含量，肺组织中TLR4、MyD88、p-p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38protamine nanomedicine MAPK水平及TLR4、MyD88 mRNA水平，均无显著差异。麻杏石甘汤具有抑制CVA大鼠气道炎症反应的作用，其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB以及p38 MAPK信号通路的激活相关。