目的:胆管癌(cholangiocarcinoma,CCA)是人类最常见的原发性胆道恶性疾病,以及第二常见的原发性肝恶性肿瘤。胆管癌目前最好的治愈方式为手术根治性切除,但由于其早期症状不明显、早期诊断方法仍存在欠缺,因此患者就诊时多已发展至晚期而丧失了手术机会。最新研究发现,肿瘤组织中部分Lnc RNA的表达水平明显高于正常组织,这些具有特异性的Lnc RNA可能成为诊断和预测肿瘤预后的重要指标。已有报道指出LINC-PINT参与某些肿瘤的发生与发展,然而目前尚未报道LINC-PINT与胆管癌的关联与作用。本研究目的是探究LINC-PINT对胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭和细胞有丝分裂周期中的影响,对LINC-PINT的分子机制进行初步探索。方法:1.通过q RT-PCR技术检测LINC-PINT在胆管癌细胞RBE、QBC9CP-690550采购39中的表达情selleckchem Navitoclax况;2.运用RNA干扰技术靶向敲减胆管癌细胞RBE和QBC939中的LINC-PINT通过荧光显微镜观察绿色荧光初步判断转染效果,通过q RT-PCR检测敲减效果;3.采用CCK-8实验和集落形成实验探究LINC-PINT对胆管癌细胞增殖功能的影响;4.采用细胞划痕实验研究LINC-PINT对胆管癌细胞迁移功能的影响;5.采用Transwell实验研究LINC-PINT对胆管癌细胞侵袭功能的影响;6.采用流式细胞术研究LINC-PINT对胆管癌细胞周期的影响;7.采用生物信息分析技术预测LINC-PINT的共表达基因,并对其进行GO富集分析与KEGG通路富集分析;8.使用Lnc Locator进行LINC-PINT亚细胞定位预测。结果:LINC-PINT在胆管癌细胞QBC939和RBE中均高表达,与课题组前期在胆管癌组织中的检测结果相一致;敲减LINC-PINT后,胆管癌细胞QBC939和RBE的增殖、迁移、侵袭能力显著下降;细胞流式实验显示,与对照组相比,敲减LINC-PINT后,可导致细胞周期S期细胞数目明显下降。另外,GO富集分析显示在生物学过程方面LINC-PINT主要参与白细胞的活化以及参与免疫反应的细胞激活;在细胞定位方面,多位于细胞质;在分子功能方面,涉及较多的是细胞组分。KEGG通路富集分析显示参与MAPK信号通路、Rap1信号通路、癌症中的转录失调;Lnc Locator预测分析LINC-PINT可能同时存在与细胞核内与核外。结论:LINC-PINT基因在胆管癌细胞中呈高表达状态;LINC-PINT敲减后胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭明显受到抑制,其可能通过在细胞核中与DNA、RNA以及蛋白质等多种分子相互作用,调控核内基因的表达或在细胞质中作用于基因转录后水平的调节。LINC-PINT有潜力成为有效的生物标志物对胆管Media attention癌进行早期诊治,其具体分子机制仍待进一步探究。