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植物在其生长发育过程中常常会遭受病原微生物的攻击,为了应对这种胁迫,植物进化出一套精细的免疫应答调控机制。植物基于对“非我”识别的先天免疫系统可以分为两个层面:第一个层面是通过细胞表面的模式识别受体对病原物保守的相关分子模式进行识别而引发的免疫反应,称为分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMP)触发的免疫,即PTI(PAMP-triggered immunity);第二个层面是由抗病基因编码的抗性蛋白(resistance protein,R protein)直接或间接识别病原微生物分泌的效应子(effector),进而激发较强的防卫反应,称为效应子触发的免疫,即ETI(effector-triggered immunity)。基因表达的转录调控在其响应胁迫的过程中起重要作用,转录因子不仅可以在植物抗病反应中起正调控作用,也可以起负调控作用。EAR(ERF-associated amphiphilic repression)基序作为主动抑制子的抑制结构域存在于ERF等转录因子家族成员中,具有非常保守的氨基酸序列。含有EAR基序的转录因子通过负调控生长发育、非生物胁迫及生物胁迫应答相关基因的表达,从而使植物在不同环境下保持正常的生理状态。前期研究中发现,两个含有EAR基序的转录因子DEAR1(At3g50260)和DEAR5(At4g06746)在拟南芥体内能够被病原菌诱导表达,因此我们推测DEAR1和DEAR5在调控拟南Docetaxel NMR芥免疫应答进程中可能发挥着一定的功能。为了探究DEAR1和DEAR5是否在调控拟南芥免疫应答进程中可能发挥功能,我们分别构建了DEAR1和DEAR5两个转录因子的组成型和诱导型表达载体并通过遗传转化的方法获得过表达植株p MDC32-2×35S:DEGSK J4AR1-2HA、p MDC32-2×35S:DEAR5-2HA、p ER8-Est:DEAR1-HA以及p ER8-Est:DEAR5-HA。同时基于CRISPR/Cas9技术对基因DEAR1和基因DEAR5进行双位点敲除,获得了实验所需的突变体植株。通过使用flg22、PEP1、PIP1、Pst DC3000(hrc C~–)、Pst DC3000(Avr Rpt2)以及Pst DC3000(Avr Rpm1)对上述获得的植株进行处理,通过测定乙烯积累量和植保素的产量探究DEAR1和DEAR5在调控拟南芥免疫应答进程中的功能及作用机制。我们总结发现,在Pst DC30Imported infectious diseases00(Avr Rpt2)的处理下,突变体植株的乙烯积累量和植保素的产量与野生型植株无明显差异,过表达植株的乙烯积累量和植保素产量增高;在Pst DC3000(Avr Rpm1)的处理下,与野生型植株相比,突变体植株的乙烯积累量和植保素的产量无明显差异,过表达植株的乙烯积累量无显著差异,植保素产量增加;而在Pst DC3000(hrc C~–)、flg22、PEP1以及PIP1的处理下,过表达植株的乙烯积累量及植保素的产量会发生明显的增高,突变体植株的乙烯积累量和植保素的产量会降低。由此我们得出结论,基因DEAR1和DEAR5能够通过参与病原相关分子模式触发的免疫反应来调控植物免疫应答进程,同时DEAR1和DEAR5能够通过调控乙烯和植保素的合成来增强植物抗性。总体而言,本文初步揭示了两个含有EAR基序的转录因子DEAR1和DEAR5能够在病原相关分子模式激活的信号通路中参与调控植物免疫,为下一步探究DEAR1和DEAR5参与调控免疫反应的分子机制提供参考。

目的：分析血小板计数联合凝血四项检查在肾病综合征诊断中的应用价值。方法：选取2021年5月—2022年5月鄂州市鄂钢医院收治的50例肾病综合征失代偿期患者作为观察A组，选取50例肾病综合征代偿期患者作为观察B组，选取50例健康体检者作为对照组。三组均接受血小板计数与凝血四项检查。比较三组凝血四项与血小板计数水平，以肾穿刺检查结果为retinal pathology“金标准”，计算凝血四项与血小板Pevonedistat抑制剂计数诊断肾病综合征的准确率、特异度。结果：观察A组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)水平高于观察B组与对照组，血小板计数低于观察B组与对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；观察B组PT、APTT、TT、FIB水平高于对照组，血小板计数低于对照组，差异www.selleck.cn/products/gdc-0068有统计学意义(P<0.05)。血小板计数检查、凝血四项联合检查诊断肾病综合征的准确度、特异度高于单独检查，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：血小板计数联合凝血四项检查诊断肾病综合征的效能较高，在病情评估方面具有参考价值。

【目的】观察单纯疱疹病毒性角膜炎小鼠模型感染后不同阶段淋巴结内淋巴管增生的变化规律,探究淋巴结内淋巴管在单纯疱疹病毒性角膜炎发病中的作用,以期为单纯疱疹病毒性角膜炎的治疗提供新方向。【方法】将雌性BALB/c小鼠随机分为实验组(n=70)和空白对照组(n=6),实验组右眼接种单纯疱疹病毒1型(HSV-1),实验组左眼及空白对照组双眼接种等体积DMEM培养液。在接种即刻、接种病毒后3、5、7、10、14、28、58天各时间点行:(1)小鼠结膜囊冲洗液与VERO细胞共培养和三叉神经节PCR检测,验证小鼠有效感染;(2)用裂隙灯显微镜进行小鼠眼部临床表现评估(临床体征评分、角膜混浊度评分、角膜荧光素钠染色评分);(3)取小鼠的角膜进行LVYE-1、CD31免疫荧光Rapamycin体内实验剂量染色,观察分析角膜淋巴管、血管的生长特点;(4)取小鼠的双侧下颌下淋巴结测量直径,并进行LYVE-1、F4/80免疫荧光染色及HE染色,观察分析单纯疱疹病毒性角膜炎病程各阶段淋巴结内淋巴管及巨噬细胞的形态和分布规律。【结果】(1)各时间节点小鼠结膜囊冲洗液和三叉神经节均检出单纯疱疹病毒1型,验证小鼠有效感染。(2)实验组小鼠右眼感染HSV-1后3天角膜上皮缺损修复;4～5天后出现水肿、浸润灶等体征,角膜缘伴随着血管和淋巴管长入;14天时临床体征评分、角膜混浊度评分、角膜荧光素钠染色评分均达到高峰(P<0.0001);28天后眼部体征缓解。(3)接种病毒后实验组右眼角膜淋巴管、血管密度逐渐上升,至28～58天时淋巴管和血管趋于稳定。(4)实验组小鼠接E-616452体内实验剂量种病毒后双侧下颌下淋巴结均逐渐增大,到第14天直径达到峰值,此后逐渐缩小,但3～28天接种侧淋巴结直径大于对侧(P<0.01);双侧淋巴结皮质区在感染后第3天便可见淋巴管增生,7～14天皮质区和髓质区淋巴管密度明显增加、管腔变粗,并在14天Autoimmune pancreatitis达到高峰,而28天后淋巴管减少、变细,并逐渐恢复至未感染时水平(P<0.01)。(5)实验组小鼠双侧下颌下淋巴结内巨噬细胞在病毒感染后逐渐增多,在10～14天可见其充盈于淋巴结大部分区域,28天后巨噬细胞逐渐减少(P<0.01)。(6)实验组小鼠左眼、空白对照组双眼在整个病程中均未出现感染临床体征,其角膜血管、淋巴管免疫荧光染色阴性。空白对照组淋巴结未见明显变化。【结论】(1)单纯疱疹病毒性角膜炎的发病过程伴发区域引流淋巴结内淋巴管的增生,且与眼部临床表现呈相似的变化趋势。(2)区域引流淋巴结内淋巴管与角膜淋巴管之间可能形成连接角膜和淋巴结的免疫反射通路,同时也可作为引流通路,参与单纯疱疹病毒性角膜炎的免疫应答。(3)淋巴管增生调控有望为单纯疱疹病毒性角膜炎的预防与治疗提供新的靶点。

苹果果实硬度作为衡量果实内在品质的重要指标之一,不仅影响了果实适口性,还决定了果实贮运能力。目前果实发育过程中硬度的形成机制GSK1120212仍不清楚,细胞壁多糖的水解是果实发育过程中硬度下降的主要原因。木葡聚糖内糖基转移/水解酶(XTH)作为解聚细胞壁多糖的关键酶,对于调节果实硬度具有重要作用。因此,探究苹果发育期果实硬度及细胞壁组分变化规律,挖掘影响果实硬度的关键XTH基因,对于选育优良品种和提高果实商品价值具有重要意义。本研究以质地不同的12个苹果品种果实为材料,分析不同品种果实发育期的硬度、细胞壁组分变化规律及其相关性,确定影响果实硬度的主要细胞壁组分。基于课题组前期获得的果实发育期转录组数据筛选调控果实硬度的关键XTH基因,分析候选基因MdXTH2的表达特征,解析其在果实硬度形成中的重要功能。主要研究结果如下:1.12个品种发育初期硬度相近,但硬度下降速率的不同导致其成熟期硬度存在差异。细胞壁各组分含量在发育期间整体呈下降趋势。细胞壁物质、纤维素和半纤维素含量在不同品种中均与硬度显著正Empagliflozin说明书相关,总相关性系数分别为0.871、0.904和0.757,而果胶含量与硬度的相关性在不同品种中存在较大差异。因此,纤维素和半纤维素含量的减少是果实发育期硬度下降的普遍原因。2.通过分析发育期果实转录组数据中XTH基因的表达量,锁定可能调控果实硬度的候选基因MdXTH2,其在硬度较大的果实中的表达量更高,蛋白定位于细胞膜。3.利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术在苹果果实中瞬时沉默MdXTH2,分析其对果实硬度及果肉细胞的影burn infection响。结果显示果实果胶及细胞壁物质含量显著减少,细胞壁降解严重,同时果实硬度显著降低。而在苹果果实中瞬时过表达MdXTH2显著增加了各细胞壁组分含量,抑制了果实硬度的下降。此外,稳定遗传转化番茄及苹果‘王林’愈伤组织再次验证了其功能。过表达MdXTH2的转基因番茄在转色期、转色后7 d的硬度比野生型高20.5%和35.1%,同时果实不能正常转色。过表达MdXTH2延缓了愈伤组织的生长,转基因愈伤组织中半纤维素(0.785 mg/g FW)和共价结合型果胶(0.075mg/g FW)含量显著高于野生型,乙烯合成基因MdACS3a和果胶降解基因MdPME的表达受到抑制。结果表明过表达MdXTH2抑制了果实硬度的下降,延缓了果实成熟。

癌PLX5622症给人类的生命健康带来了极大的威胁。目前,治疗癌症仍是全人类的巨大难题。开发具有肿瘤靶向性和低毒性的有photobiomodulation (PBM)效治疗策略以控制肿瘤的生长、转移和复发,进而根除肿瘤,是对抗癌症的终极目标。近年来,无机纳米材料在纳米医学中取得了显著进展。其中,金属纳米材料具有独特的物理化学性质,表面易于修饰和连接各种功能基团,可使其同时具有治疗和诊断的功能,这为肿瘤的早期诊断和治疗提供了新的方法和思路。利用肿瘤组织特殊的微环境特点,将化学动力学治疗(CDT)与光热(PT)治疗(PTT)、化疗相结合,开发和构建了多功能的金属纳米体系,可同时发挥两者的协同作用和双重优势,实现高效的肿瘤杀伤。一方面,基于铜基纳米材料优异的类芬顿催化活性和光热性能,通过肿瘤特异性PLX-4720生产商靶向配体修饰实现靶向递送和酸响应性释放,最终实现肿瘤的CDT和PT的协同诊疗,开发了一种不依赖于化疗药物辅助的肿瘤治疗策略。另一方面,基于锰基纳米材料的类芬顿催化活性并利用仿生细胞膜作为药物递送载体,实现肿瘤化疗和CDT联合治疗,并克服肿瘤耐药问题。本研究工作包括以下四个部分的内容:1.我们通过微波一步合成法制备了铜钆氧(CGO)纳米簇,该纳米簇由铜单质、氧化铜和氧化钆组成。CGO具有丰富的多孔结构,且兼具优异的芬顿催化性能和PT性能。体外离子释放实验显示CGO具有pH响应性释放行为。通过修饰血小板衍生生长因子受体-β(PDGFR-β)识别环肽(PDGFB)赋予CGO肿瘤靶向能力,得到pH响应型的靶向纳米诊疗体系PDGFB-CGO。2.从细胞水平探究了 PDGFB-CGO纳米体系的抗肿瘤机制。实验结果表明,PDGFB-CGO能特异性识别肿瘤细胞,通过PDGFB/PDGFR-β的特异性结合启动受体介导的靶向内吞,其内吞机制主要与网格蛋白和小窝蛋白介导的内吞途径相关。抗肿瘤机理表明,PDGFB-CGO在肿瘤细胞中快速产生大量高活性的Cu(Ⅰ),通过类芬顿反应催化内源性过氧化氢(H202)转化为羟基自由基(·OH),实现高效的肿瘤CDT。另外,Cu(Ⅱ)在转变为Cu(Ⅰ)的过程中消耗了谷胱甘肽(GSH),使谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)失活,进一步提升了肿瘤细胞的氧化压力,增强CDT效果。当近红外激光照射后,光热作用不仅能够快速消融肿瘤,还能促进类芬顿催化速率,实现CDT和PT协同治疗。细胞实验结果显示,PDGFB-CGO可显著抑制肿瘤细胞的活力,对正常细胞的具有良好的生物相容性;PDGFB-CGO还能在体外抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭,其机制可能与抑制上皮间质转化(EMT)以及铜超载介导的抗肿瘤血管生成相关。3.从动物水平探究了 PDGFB-CGO纳米体系的抗癌活性。体内抗肿瘤实验结果证实,PDGFB-CGO具有优异的肿瘤靶向性能,显示出强大的CDT和PTT的联合抗肿瘤效果,且具有良好的生物安全性,提高小鼠生存率。与此同时,PDGFB-CGO作为铜供体,导致大量铜离子内流,通过打破铜稳态抑制EMT和肿瘤血管生成,进一步阻止了肿瘤细胞的生长和转移。通过建立实验性肺转移模型证实,PDGFB-CGO可有效抑制肿瘤细胞在肺组织的定植和转移。此外,PDGFB-CGO具有良好的T1成像性能,PDGFB-CGO的全身给药显著增强了小鼠肿瘤组织的T1加权信号,这将有助于癌症的精准诊断。该工作为癌症的精准诊疗提供新思路,为先进生物材料的开发提供了一个有前途的策略。4.探究了一种仿生锰基纳米药物递送平台BMMP-Mn2+/Se/DOX的抗癌机制。该纳米平台以膝氏假单胞菌细胞膜(BMMP)为纳米载体,通过Mn2+、超小纳米单质硒(Se)以及化疗药DOX的共递送实现对肿瘤细胞的高效杀伤。细胞实验结果显示,与红细胞膜(RCM)药物递送系统相比,BMMP-Mn2+/DOX具有更高的肿瘤细胞内化效率,以促进DOX的递送。在该纳米递送平台中,Se可激活SOD-1的表达,随后上调H2O2水平;释放出的Mn2+催化H2O2生成剧毒的.OH,诱导肿瘤细胞凋亡。此外,BMMP-Mn2+/Se纳米颗粒还能抑制GPX4的表达,进一步增加细胞内氧化压力。BMMP-Mn2+/Se/DOX表现出最低的IC50值,增强DOX的化疗效果,有效克服肿瘤细胞的耐药性。该研究为基于细胞膜的多模式肿瘤治疗平台的开发提供了借鉴。

癌PLX5622症给人类的生命健康带来了极大的威胁。目前,治疗癌症仍是全人类的巨大难题。开发具有肿瘤靶向性和低毒性的有photobiomodulation (PBM)效治疗策略以控制肿瘤的生长、转移和复发,进而根除肿瘤,是对抗癌症的终极目标。近年来,无机纳米材料在纳米医学中取得了显著进展。其中,金属纳米材料具有独特的物理化学性质,表面易于修饰和连接各种功能基团,可使其同时具有治疗和诊断的功能,这为肿瘤的早期诊断和治疗提供了新的方法和思路。利用肿瘤组织特殊的微环境特点,将化学动力学治疗(CDT)与光热(PT)治疗(PTT)、化疗相结合,开发和构建了多功能的金属纳米体系,可同时发挥两者的协同作用和双重优势,实现高效的肿瘤杀伤。一方面,基于铜基纳米材料优异的类芬顿催化活性和光热性能,通过肿瘤特异性PLX-4720生产商靶向配体修饰实现靶向递送和酸响应性释放,最终实现肿瘤的CDT和PT的协同诊疗,开发了一种不依赖于化疗药物辅助的肿瘤治疗策略。另一方面,基于锰基纳米材料的类芬顿催化活性并利用仿生细胞膜作为药物递送载体,实现肿瘤化疗和CDT联合治疗,并克服肿瘤耐药问题。本研究工作包括以下四个部分的内容:1.我们通过微波一步合成法制备了铜钆氧(CGO)纳米簇,该纳米簇由铜单质、氧化铜和氧化钆组成。CGO具有丰富的多孔结构,且兼具优异的芬顿催化性能和PT性能。体外离子释放实验显示CGO具有pH响应性释放行为。通过修饰血小板衍生生长因子受体-β(PDGFR-β)识别环肽(PDGFB)赋予CGO肿瘤靶向能力,得到pH响应型的靶向纳米诊疗体系PDGFB-CGO。2.从细胞水平探究了 PDGFB-CGO纳米体系的抗肿瘤机制。实验结果表明,PDGFB-CGO能特异性识别肿瘤细胞,通过PDGFB/PDGFR-β的特异性结合启动受体介导的靶向内吞,其内吞机制主要与网格蛋白和小窝蛋白介导的内吞途径相关。抗肿瘤机理表明,PDGFB-CGO在肿瘤细胞中快速产生大量高活性的Cu(Ⅰ),通过类芬顿反应催化内源性过氧化氢(H202)转化为羟基自由基(·OH),实现高效的肿瘤CDT。另外,Cu(Ⅱ)在转变为Cu(Ⅰ)的过程中消耗了谷胱甘肽(GSH),使谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)失活,进一步提升了肿瘤细胞的氧化压力,增强CDT效果。当近红外激光照射后,光热作用不仅能够快速消融肿瘤,还能促进类芬顿催化速率,实现CDT和PT协同治疗。细胞实验结果显示,PDGFB-CGO可显著抑制肿瘤细胞的活力,对正常细胞的具有良好的生物相容性;PDGFB-CGO还能在体外抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭,其机制可能与抑制上皮间质转化(EMT)以及铜超载介导的抗肿瘤血管生成相关。3.从动物水平探究了 PDGFB-CGO纳米体系的抗癌活性。体内抗肿瘤实验结果证实,PDGFB-CGO具有优异的肿瘤靶向性能,显示出强大的CDT和PTT的联合抗肿瘤效果,且具有良好的生物安全性,提高小鼠生存率。与此同时,PDGFB-CGO作为铜供体,导致大量铜离子内流,通过打破铜稳态抑制EMT和肿瘤血管生成,进一步阻止了肿瘤细胞的生长和转移。通过建立实验性肺转移模型证实,PDGFB-CGO可有效抑制肿瘤细胞在肺组织的定植和转移。此外,PDGFB-CGO具有良好的T1成像性能,PDGFB-CGO的全身给药显著增强了小鼠肿瘤组织的T1加权信号,这将有助于癌症的精准诊断。该工作为癌症的精准诊疗提供新思路,为先进生物材料的开发提供了一个有前途的策略。4.探究了一种仿生锰基纳米药物递送平台BMMP-Mn2+/Se/DOX的抗癌机制。该纳米平台以膝氏假单胞菌细胞膜(BMMP)为纳米载体,通过Mn2+、超小纳米单质硒(Se)以及化疗药DOX的共递送实现对肿瘤细胞的高效杀伤。细胞实验结果显示,与红细胞膜(RCM)药物递送系统相比,BMMP-Mn2+/DOX具有更高的肿瘤细胞内化效率,以促进DOX的递送。在该纳米递送平台中,Se可激活SOD-1的表达,随后上调H2O2水平;释放出的Mn2+催化H2O2生成剧毒的.OH,诱导肿瘤细胞凋亡。此外,BMMP-Mn2+/Se纳米颗粒还能抑制GPX4的表达,进一步增加细胞内氧化压力。BMMP-Mn2+/Se/DOX表现出最低的IC50值,增强DOX的化疗效果,有效克服肿瘤细胞的耐药性。该研究为基于细胞膜的多模式肿瘤治疗平台的开发提供了借鉴。

背景及目的:自身免疫性疾病是影响全球数百万人的免疫系统慢性疾病,严重时甚至会导致死亡。目前临床上的治疗方法往往很难做到根治疾病并且长期使用还会降低机体自身的免疫反应,增加感染和罹患癌症的风险。免疫耐受是防止免疫系统对自身发生反应的必要条件,通过靶向在抗原呈递细胞上和T细胞上表达的共刺激分子有望通过调节T细胞功能实现免疫耐受诱导,在自身免疫性疾病治疗中具有潜力。CD40广泛表达于抗原提呈细胞表面,与其配体CD40L组成的共刺激途径对于自身免疫性疾病中的T细胞激活至关重要,通过阻断CD40途径可以抑制过度的免疫反应实现免疫耐受。针对CD40L的抗体的开发由于在临床试验中引发血栓的发生而被停止。开发针对CD40途径的替代治疗方法至关重要。RNA干扰(RNAi)是指在生物体内通过攻击细胞中目标基因的m RNA导致基因表达沉默。引入外源性合成的小干扰RNA(siRNA),通过特定的碱基互补配对可以诱导RNAi发生,对疾病相关基因有特异性和高效的敲除作用。然而siRNA在体内面临细胞内吞效率低、易被核酸酶降解等难题,需要一个载体来保护并有效的将它们递送到目标细胞。纳米输运系统成为了一个理想的解决办法。纳米颗粒因为其灵活的尺寸、结构和可改变的表面修饰,在递送siRNA上显示出巨大潜力。已有研究证明利用PEG-PLGA纳米颗粒作为CD40siRNA的载体可以靶向抗原提呈细胞,诱导免疫耐受产生,在同种异体皮肤移植排斥实验和实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型中起到了治疗效果。但是单纯利用NPs/siCD40进行治疗疗效有限,需要联用免疫抑制剂或其他siRNA来提升治疗效果。研究表明在PEG末端进行马来酰亚胺官能团修饰,通过马来酰亚胺-巯基反应可以提高纳米颗粒在体内的循环时间和靶向能力,因此考虑能否通过对PEG-PLGA纳米颗粒进行马来酰亚胺官能团修饰提升纳米颗粒输运系统靶向递送siRNA效率,并提升对自身免疫性疾病的治疗效果。本研究的目的是通过马来酰亚胺官能团修饰优化纳米颗粒,提升纳米输运系统递送siRNA的效率和在体内和体外水平降低树突状细胞CD40表达水平的能力,提高对于EAE的治疗效果。研究方法:本研究首先通过双乳化法合成包载siRNA的Mal-PEG-PLGA纳米颗粒和PEG-PLGA纳米颗粒,应用动态光散射仪(dynamic light scatterer,DLS)对纳米颗粒的粒径和表面电势进行表征。将Mal-NPs/Cy5-siNC、NPs/Cy5-siNC与骨髓来源树突状细胞共培养,随后应用流式细胞术检测两种纳米颗粒在体外递送siRNA的能力。将Mal-NPs/siCD40、NPs/siCD40与DC1.2和RAW264.7细胞共培养,应用流式细胞术和q PCR检测细胞上CD40表达。C57BL/6小鼠尾静脉注射Mal-NPs/Cy5-siNC和NPs/Cy5-siNC,应用小动物活体成像仪检测纳米颗粒在小鼠体内的分布情况、应用流式细胞术检测纳米颗粒在外周血、脾脏、骨髓中DC和巨噬细胞中的分布情况。C57BL/6小鼠在尾静更多脉注射Mal-NPs/siCD40、NPs/siCD40后处死,分离骨髓细胞后体外诱导骨髓来源树突状细胞,使用LPS刺激,应用流式细胞术检测树突状细胞的比例和CD40表达水平。应用EAE小鼠模型验证Mal-NPs/siCD40的生物学效果。研究结果:1.通过双乳化法制备Mal-NPs/siCD40和NPs/siCD40,其粒径分别为149.33±3.57nm和95.34±3.75 nm,表面电势分别为37.4±0.79m V和37.7±0.70 m V。2.MTamoxifen体内实验剂量al-NPs/siCD40能够在体外向骨髓诱导树突状细胞递送siRNA,与NPs/siCD40相比,Mal-NPs/siCD40在体外沉默细胞CD40表达的能力更强。3.与NPs/Cy5-siNC相比,Mal-NPs/Cy5-siNC在小鼠主要脏器,以及小鼠DC和巨噬细胞中富集更高。4.与NPs/siCD40相比,Mal-NPs/siCD40抑制骨髓细胞分化和沉默CD40表达的能力更强。5.与NPs/siCD40相比,Mal-NPs/siCD40对于EAE模型的治疗效果更好。结论:本研究利用双乳化法成功制备包载siRNA的马来酰亚胺修饰的PEG-PLGA纳米颗粒(Mal-NPsMedical organization/siCD40)。马来酰亚胺修饰增强PLGA纳米颗粒在小鼠主要脏器中的富集,并提高靶向树突状细胞和巨噬细胞递送siRNA的效率。马来酰亚胺修饰提高NPs/siCD40沉默树突状细胞中CD40表达的能力,并在EAE模型中取得更好地疗效。

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌类型,严重危害着人们的健康,是世界公共卫生的重大负担。近年来,乙型肝炎病毒(HBV)感染,丙型肝炎病毒(HCV)感染、大量饮酒、黄曲毒素和肥胖是引起HCC的主要诱因。其主要治疗方式包括:手术治疗、介入治疗、抗肿瘤药物治疗、免疫治疗和射频消融等,但是HCC患者的预后仍不能让人满意,因此寻找新的HCC预后预测生物标志物和治疗靶点具有重大意义。铁死亡(Ferro此网站ptosis)是一种新的不同于凋亡、坏死和自噬的铁依赖性的程序性细胞死亡形式。大量文献报道,铁死亡在肿瘤中发挥着重要作用,已经证明诱导HCC发生铁死亡能够抑制HCC的进展,并且能够逆转HCC耐药,为HCC的治疗提供了新的方向,有助于提高HCC患者的生存质量。脱氧胞苷三磷酸焦磷酸酶 1(deoxycytidine triphosphate pyrophosphatase 1,DCTPP1)可以通过调节dCTP的代谢,促进DNA的整体低甲基化,维持DNA复制的稳定性,并且其在多种肿瘤中表达上调,与肿瘤的不良预后和治疗耐药有关,已被证明能促进乳腺癌的进展,降低卵巢癌和胃癌对化疗药物的敏感性。然而,DCTPP1在HCC中的作用仍不明确。在这里,我们报道了 DCTPP1可以通过调节HCC细胞的铁死亡参与HCC的进展。DCTPP1在HCC样本中表达上调,并与HCC患者的总体生存(Overall Survival,OS)和无复发生存(Recurrence Free Survival,RFS)相关。在机制上,敲低DCTPP1通过促进BOLTBI biomarkerA2B(BOLA family member 2B)启动子CPG岛的高甲基化水平,从而抑制BOLA2B的表达,而BOLA2B表达水平下降可导致SPOPL(Speckle Type BTB/POZ Protein Like)表达水平升高。SPOPL与Cullin3形成E3泛素连接酶复合物,增加谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)的泛素化降解,最终导致HCC铁死亡的发生,从而抑制HCC的进展。在HCC组织中,DCTPP1、BOLA2B和GPX4的表达水平呈正相关,并且DCTPP1的表达水平是HCC患者OS和RFS的独立危险因素。我们的研究发现DCTPP1下selleckchem Ferrostatin-1调通过BOLA2B/SPOPL/Cullin3轴促进GPX4泛素化降解,从而诱导HCC铁死亡,抑制HCC的增殖、迁移和侵袭等生物学进程。而DCTPP1抑制剂boronate 30治疗可以有效抑制HCC的进展。这些数据表明DCTPP1是HCC的潜在治疗靶点,boronate 30可能是HCC的潜在治疗药物,为HCC的治疗提供了新的思路。

目的 探duck hepatitis A virus讨低分子肝素对下肢创伤患者术后住院期间下肢深静脉血栓的预防作用。方法 收集2019年6月至2022年6月于沧州市人民医院住院接受手术治疗的102例下肢创伤患者的临床资料，按照住院期间是否采用低selleck合成分子肝素治疗分为治疗组（n=49）和对照组（n=53）。比较两组患者的手术相关指标，包括手术时间、麻醉方式、术中出血量。比较两组患者住院期间D-二聚体水平及下肢深静脉血栓发生情况。结果 两组患者全身麻醉情况、手术时间、术中出血量比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。术后，治疗组患者D-二聚体水平、D-二聚体水平升高（﹥0.5 mg/L）比例均低于对照组患者，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。治疗组患者下肢深静脉血栓发生率低于对照组患者，差异有统计学意义（P﹤0.0GSK1265）。两组患者均未发生其他明显出血事件。结论 低分子肝素可有效降低下肢创伤患者术后住院期间发生下肢深静脉血栓的风险，值得临床推广。

锰超氧化物歧化酶（MnSOD）催化两分子超氧自由基歧化为分子氧和过氧化氢。超氧自由基被Mn~(3+)SOD氧化成分子氧的反应以扩散的方式进行。超氧自由基被Mn~(2+)SOD还原为过氧化氢的反应以快循环和慢循环两条途径平行进行。在慢循环途径中，Mn~(2+)SOD与超氧自由基形成产物抑制复合物，然后该复合物被质子化而缓慢释放出过氧化selleck HPLC氢。在快循环途径中，超氧自由基直接被Mn~(2+)SOD转化为产物过氧化氢，快速循环有利于酶的复活与周转。本文提出温度是调节锰超氧化物歧化酶进入慢速或者快速循环催化途径的关键因素。随着在生理温度范围内的温度升高，慢速循环成为整个催化反应的主流，因而生理范围内的温度升高反而抑制该酶的活性。锰超氧化物歧化酶的双相酶促动力学特性可以用该酶保守活性中心的温度依赖性配位模型进行合理化解释。当温度降低时，1个水分子（或者OH~-）接近Mn、甚至与Mn形成配位键，从而干扰超氧自由基与Mn形成配位键而避免形成产物抑制。因此在低温下该酶促反应主要在快循环通路中进行。最后阐Canagliflozin使用方法述了几种化学修饰模式对该酶的调节，说明锰超氧化物歧化酶受到多种形式的快速调节（变构调节与化学修饰）。这些快速调节直接改变酶的活化状态，进而调节细胞中超氧自由基和过氧化氢的平衡与流量，为揭示锰超qatar biobank氧化物歧化酶和超氧自由基的生理作用提供新理论。