Author: admin

目的 探讨山药多糖通过调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路对高糖诱导心肌细胞损伤的保护作用。方法 将H9c2细胞随机分为对照组(5.55 mmol/L葡萄糖)、高糖组(33 mmol/L葡萄糖)、山药多糖组(33 mmol/L葡萄糖+0.20 mg/mL山药多糖)、山药多糖+LiCl(Wnt/β-catenin信号通路激活剂)组(33 mmol/L葡萄糖+0.20 mg/mPulmonary Cell BiologyL山药多糖+40μmol/L LiCl),培养48 h后，此网站CCK-8法检测各组细胞活力，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，试剂盒检测各组细胞活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶Z-IETD-FMK体内(SOD)活性，ELISA法检测各组细胞IL-1β、IL-6水平，Western blot检测各组细胞中Wnt3α、β-catenin、糖原合成激酶3β(GSK-3β)蛋白表达。结果 与对照组比较，高糖组细胞活力、SOD活性、GSK-3β蛋白表达降低(P<0.05),细胞凋亡率、ROS、MDA、IL-1β、IL-6水平和Wnt3α、β-catenin蛋白表达升高(P<0.05);与高糖组比较，山药多糖组细胞活力、SOD活性、GSK-3β蛋白表达升高(P<0.05),细胞凋亡率、ROS、MDA、IL-1β、IL-6水平和Wnt3α、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05);而LiCl能逆转山药多糖对心肌细胞损伤的保护作用(P<0.05)。结论 山药多糖对高糖诱导的心肌细胞损伤具有保护作用，可以增强细胞活力，抑制细胞凋亡、氧化应激及炎性因子水平，该机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

目的 构建CK2天然产物类抑制Docetaxel使用方法剂的定量构效关系（quantitative structure-activity relationship,QSAR）模型，揭示影响该类抑制剂活性的结构因素，为新型CK2抑制剂的开发提供理论基础和实验依据。方法 基于文献报道的115个多骨架CK2天然产物类抑制剂，采用遗传算法（genetic algorithm,GA）联合多元线性回归（multiple linear regression,MLR）方法，建立了基于优选的Dragon描述符的QSAR模型，以留一法交叉验证系数Q~2_(LOO)以及相关系数R~2作为模型内部验证的评价指标；通过Q~2_(ext)和R~2_(ext)评估模型的外部预测能力。结果 最优2D-QSAR模型由8个描述符组成，基于训练集内部验证的统计学参数为Q~2_(Loo)=0.7914、R~2=0.8220；基于测试集外部验证的统计学参数为Q~2_(ext)=0.792 1、R~2_(ext)=0.799 8，表明该模型具有较高的可靠性和Q-VD-Oph化学结构预测能力。结论 影响CK2天然产物类抑制剂活性的分子描述符包括IVDE、CATS2D＿08＿DA、nArX、IC1、Chi＿D/DtHalf-lives of antibiotic、SdssC、F08[C-O]以及C-006。本研究可为新型CK2抗癌抑制剂的发现提供实验指导。

目的 了解结核分枝杆菌跨膜蛋白Rv3737对耻垢分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的作用。方法 通过PCR扩增结核分枝杆菌Rv3737目的基因，T4连接酶连接Rv3737及穿梭质粒pMV261，构建pMV261-Rv3737，双酶切及测序验证pMV261-Rv3737，通过电转将pMV26SAHA体内实验剂量1-Rv3737及pMV261-Vector电转至耻垢分枝杆菌感受态细胞中以构建过表达Rv3737的耻垢分枝杆菌菌株（MS::pMV261-Rv3737）和对照菌株（MS::pMV261）,PCR及Western blot验证过表达Rv3737的耻垢分枝杆菌菌株。利用分光光度计检测OD600评估过表达Rv3737Ferrostatin-1体外对耻垢分枝杆菌体外生长的影响。将neurogenetic diseasesMS::pMV261-Rv3737及MS::pMV261感染巨噬细胞，通过菌落形成单位（CFU）计数检测耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活，用Western blot及激光共聚焦检测自噬相关蛋白LC3II的变化。结果 Rv3737不影响耻垢分枝杆菌的体外生长，但促进耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活，过表达Rv3737明显抑制LC3II的表达，激光共聚焦结果显示过表达Rv3737后LC3II自噬点明显减少。结论 结核分枝杆菌跨膜蛋白Rv3737可能通过抑制巨噬细胞自噬来促进耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活，有望成为抗结核药物作用的靶点，为结核病的治疗提供一定的理论依据。

目的 拟探讨新生期心肌细胞中肌浆网上两种主要的钙离子释放通道1,4,5-三磷酸肌醇受体(1,4,5-trisphosphate receptors, IP_3Rs)及雷诺丁受体(ryanodine receptors, RyRs)对细胞内钙振荡的调节作用。方法 以体外培养原代新生SD大鼠心肌细胞为实验材料，通过钙离子指示剂fura-2荧光成像，分别利用IP_3Rs及RyRs通道的激动剂phenylephrine(PE)、caffeine,以及抑制剂2-APB和tetracaine作用于细胞，研究这两类通道对细胞内钙振荡信号的影响。结果 培养的单层新生大鼠心肌细胞有自发的同步的钙振荡；PE处理使得钙振荡频率增加，而2-APB则抑制self medication胞内钙振荡的频率，但它们对钙振荡幅度无明显影响；caffeine增加钙振荡频率但扰乱细胞跳动节律，而tetracaine则完全抑制心肌细胞的钙振荡信号，使细胞停止跳动。此外，应用PE分别作用于STM2457小鼠培养3 d、7 d及10 d的新生大鼠心肌细胞后，发现其对钙振荡频率的调增作用随培养时间增加而明显下降。结Trichostatin A配制论 新生大鼠心肌细胞内钙振荡频率主要受IP_3Rs调节，而RyRs是大量钙离子释放的主要通道，决定钙振荡的幅度。

目的 探究仙鹤草（APL）对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制。方法 裸鼠皮下注射肝癌Hep G2细胞，建立裸鼠移植瘤模型；将裸鼠随机分为5组：对照组（Control）、仙鹤草低剂量组（APL 6g/kg）、仙鹤草中剂量组（APL 12g/kg）、仙鹤草高剂量组（APL 24topical immunosuppressiong/kg）和5-氟尿嘧啶组（5-FUBMS-354825作用 20mg/kg）。30d后检测肿瘤重量；检测30d期间肿瘤体积变化；TUNEL检测肿瘤组织凋亡；Western blot检测Caspase-3、Bax、Bcl-2、LC3-I、LC3-II、Beclin1、p62蛋白表达水平；免疫组化染色检测Ki67、VEGF阳性细胞数。结果 与Control组比较，APL各剂量组和5-FU 20mg/kg组裸鼠肿瘤重量、体积显著降低，裸鼠肿瘤组织细胞凋亡率显著升高，裸鼠肿瘤组织细胞凋亡率显著升高，Bcl-2蛋白水平显著降低，LC3-II/LC3-I比值和Beclin1蛋白水平显著升高，p62蛋白水平显著降低，Ki67、VTalazoparibEGF阳性细胞数显著降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 仙鹤草抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长，可能参与机制为诱导肿瘤细胞凋亡和自噬，抑制肿瘤细胞增殖。

目的 通过对神经元抗体阳性的32例儿童自身免疫性脑炎(AE)临床GSI-IX采购特点的分析,为临床医师提供参考依据。方法收集2017年1月至2020年10月新疆医科大学第一附属医院儿童神经内科确诊的儿童AE32例,分析其临床表现,总结其临床特点。结果32例患者,年龄11个月～14岁,以抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)抗体阳性脑炎为主,占75%(24/32)。临床主要表现有癫痫发作且对抗癫痫药物治疗欠佳、认知障碍、精神症状、语言障碍及运动障碍等,脑脊液检查细胞数升高占50%(16/32),蛋白定量升高占68.8%(23/32);有1例颅咽管瘤患儿,手术切除2年后出现头痛症状selleck Empagliflozin,诊断抗NMDAR抗体脑炎;56.2%(18/32)的患儿头颅磁共振(MRI)异常,87.5%(28/32),脑电图(EEG)异常,选择同期确诊抗体阴性的AE患儿22例作为对Post-operative antibiotics照组,抗体阳性组在癫痫发作、脑脊液蛋白定量两方面比例高于抗体阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗方案方面,5例(15.6%)患儿单用大剂量激素冲击治疗,18例(56.3%)患儿大剂量激素冲击+丙种球蛋白治疗,9例(28.1%)患儿大剂量激素冲击+丙种球蛋白治疗+吗替麦考酚酯口服治疗,治疗预后分别进行两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论儿童短时间内出现新发症状,包括药物难以控制的癫痫发作,运动、语言、认知障碍,需警惕AE;副肿瘤综合征在儿童中发生率相对低,需要长期随访;早期免疫治疗可以减少使用抗癫痫药物的种类、剂量。

目的 观察慢性射血分数降低性心力衰竭(HFrEF)合并糖耐量受损(IGT)患者服用恩格列净的有效性和安全性。方法 选择2020年12月至2021年2月于郑州大学第一附属医院就FUT-175诊的慢性HFrEF合并IGT的患者，以1:1的比例随机分为恩格列净组(n=55)和对照组(n=55)，记录其治疗前后的心功能指标和血糖情况和治疗期间的不良事件。结果 经12周的治疗，两组各剩余50例患者，两组患者的心功能指标、血糖情况均有改善，与对照组相比，恩格列净组的心功能指标、血糖情况改善更为显著[恩格列净组的增幅 vs.对照组的增幅：左心室射血分数(LVEF)：(6.77±4.21)% vs.(3.17±4.68)%；左心室舒张末期内径(LVEDD)：[-(4.18±4.71)mm vs.-(2.15±4.35)mm]；N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)：[-(1645.34±892.36)pg/ml vs.-LGK-974(1051.22±782.23)pg/ml]；空腹血糖：[-(0.64±0.72)mmol/L vs.-(0.35±0.61)mmol/L]；糖负荷后2 h血糖：[-(0.92±0.65)mmol/L vs.-(0.63±0.74)mmol/L]；糖化血红蛋白：[-(0.24±0.12)% vs.-(0.16±0.16Glutamate biosensor)%]，P均<0.05]。12周的治疗期间，两组患者中不良事件[低血压、肾功能异常、血钾水平异常(高血钾、低血钾)、泌尿生殖系统感染、再入院、死亡]的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 慢性HFrEF合并IGT患者服用恩格列净后心功能和血糖情况均有改善，不良事件并未明显增加。

目的：探讨胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)受体激动剂艾塞那肽(exenatide/exendin-4,Exe)对胰岛β细胞功能的作用及机制。方法：通过高脂饮食(high-fat diet,HFD)喂养C57BL/6J小鼠12周构建2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)模型后随机分为HFD+生理盐水(saline)组和HFD+Exe(24 nmol·kg-1·d-1)组，另设正常饮食对照(normal diet control,NC)组，每组10只。监测体重和空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)。HFD喂养12周及Exe干预8周时行腹腔注natural bioactive compound射葡萄糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)及腹腔注射胰岛素耐量实验(intraperitoneal insulin tolerance test,IPITT)。实验结束时留取胰腺组织行微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)免疫荧光染色，提取各组小鼠原代胰岛总蛋白检测过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptor δ,PPARδ)、LC3B-II和P62的蛋白水平。采用棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞，分别予Exe(20 nmol/L)和GW501516(10μmol/L)干预24 h后行葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)实验，并检测PPARδ、LC3B-II和P62蛋白水平。另外，取部分NIT-1细胞经PA诱导后分别予Exe或/和GSK0660(1μmol/L)干预24 h，并且进一步通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建PPARδ基因敲除(PPARδ-KO)细胞，经PA诱LGX818试剂导后予Exe干预24 h，验证PPARδ在Exe激活β细胞自噬中的作用。结果：在HFD喂养12周后，小鼠体重和FPG显著升高，糖耐量受损明显，成功构建小鼠T2DM模型；与HFD+saline组相比，Exe治疗可明显降低T2DM小鼠体重和FPG，改善受损糖耐量(P<0.05)。与NC组相比，HFD+saline组胰岛LC3B荧光表达降低，胰岛LC3B-II和PPARδ的蛋白表达量降低，P62蛋白表达升高；与HFD+saline组相比，Exe治疗后胰岛LC3B荧光表达增加，LC3B-II和PPARδ蛋白表达量升高，P62蛋白表达量降低(P<0.05)。此外，与PA组相比，Exe和GW501516干预组在高糖刺激下NIF-1细胞胰岛素的分泌量显著增加，且PPARδ和LC3B-II的蛋白表达升高，P62的蛋白表达下降(P<0.05)；与PA+Exe组对比，PA+Exe+GSK0660干预组LC3B-II蛋白表达下调，P62www.selleck.cn/products/PLX-4720蛋白表达上调(P<0.05)。进一步在PPARδ-KO NIT-1细胞中发现，与PA组相比，Exe干预PPARδ-KO细胞不能引起LC3B-II及P62蛋白表达改变。结论：GLP-1受体激动剂Exe可通过PPARδ激活自噬，从而改善胰岛β细胞功能。

自噬是一种溶酶体介导的在细胞应激过程中捕获并降解功能障碍的细胞器及无用蛋白的分解过程，在宫颈癌中发挥双重作用。在宫颈癌早期阶段，自噬通过抑制致癌p62蛋白聚集体的积累，抑制其发生发展；宫颈癌进展到晚期，抑制癌细胞自噬可增强癌细胞对化疗药物的敏感性，抑制其增殖。近年来，中药单体调控自噬治疗宫颈癌的研究方兴未艾，受到国内外学者的广泛关注。其可通过多通路、多靶点调控宫颈癌细胞自噬，增加细胞凋亡率，减少癌细胞对化疗药物的耐药性。故笔者就中药单体通过自噬抑制宫颈癌的机制展开综述，以期为宫颈癌预防性及治疗性药物的发现发展寻求新突破。通过回顾文献发现在宫颈癌早期阶段，中药单体激活癌细胞自噬促进其凋亡，主要机制为增加溶STM2457研究购买酶体膜通透性(LMP)、增加化疗药敏感性、激活完整自噬流；宫颈癌进展到晚期，抑制癌细胞自噬减少其对化疗药物的敏感性，机制为抑制自噬小体及自溶CyBio automatic dispenser酶体的形成。中药单体调节自噬治疗宫颈癌在体外实验取得了一定的Adavosertib效果，但临床实验研究较少，缺乏可靠的临床理论依据，因此开展更多的中药单体调节自噬治疗宫颈癌的临床实验研究以寻求治疗肿瘤更加可靠的理论依据是必不可少的。

目的：观察砭贴预处理对急性低压低氧脑损伤模型大鼠血清脯氨酸selleck化学羟化酶2(PHD2)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量的影响，探究砭贴预防高原脑损伤的可能作用机制。方法：将45只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、砭贴组、药物组、砭贴抑制剂组，每组9只。砭贴组和砭贴抑制剂组大鼠予砭贴预处理，穴取“太渊”“内关”和“人迎”，每次2 h，每日1次；药物组大鼠每日按280 mg/kg剂量灌胃大株红景天胶囊药液，均干预14 d。砭贴抑制剂组于造模前24 h按40 mg/kg剂量腹腔注射PHD抑制剂二甲基乙二酰氨基乙酸（DMOG）。干预结束后，除空白组外，其余4组大鼠均采用氧舱模拟高原环境建立急性低压低氧脑损伤模型。检测各组大鼠动脉血血气分析指标[血氧饱和度（Smedian incomeaO_2）、乳酸（Lac）、血钠（Na~+）、血钾（K~+）水平]和脑组织含水量；HE染色法观察大鼠脑皮质组织形态学；ELISA法检测血清PHD2、HIF-1α和血管内皮生长因子（VEGF）含量；Western blot法检测脑组织VEGF蛋白表达，实时荧光定量PCR法检测脑组织VEGFmRNA表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠SaO_2和Na~+水平降低（P<0.05）,Lac、K~+水平及脑组织含水量升高（P<0.05）。与模型组比较，砭贴组和药物组SaO_2水平升高（P<0.05）,Lac、K~+水平及脑组织含水量降低（P<0.05）；砭贴组Na+水平升高（P<0.05）。与砭贴组比较，砭贴抑制剂组SaO_2水平降低（P<0.05）,Lac水平及脑组织含水量升高（P<0.05）。模型组大鼠脑皮质组织细胞疏松紊乱，皮质血管扩张，细胞明显肿胀；砭贴组和药物组缺氧损伤表现较轻，砭贴抑制剂组缺氧损伤较砭贴组明显。与空白组比较，模型组大鼠血清PHDSAG体外2含量降低、HIF-1α含量升高（P<0.05），血清VEGF含量及脑组织VEGF蛋白和m RNA表达增加（P<0.05）；与模型组比较，砭贴组和药物组血清PHD2含量升高、HIF-1α含量降低（P<0.05），血清VEGF含量及脑组织VEGF蛋白和mRNA表达降低（P<0.05）；与砭贴组比较，砭贴抑制剂组血清PHD2含量降低、HIF-1α含量升高（P<0.05），血清VEGF含量及脑组织VEGF mRNA表达升高（P<0.05）。结论：砭贴“内关”“太渊”“人迎”可能通过调控血清PHD2/HIF-1α水平下调VEGF表达，减轻脑组织水肿、增强大鼠抗缺氧能力，从而达到预防高原脑损伤的目的。