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目的：基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子A(VEGFA)信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌（TNBC）细胞的影响。方法：建立TNBC移植瘤模型，随机分为模型组，卡培他滨组（0.2 mg·kg-1），柴胡桂枝汤低、中、高剂量组（10.62、21.23、42.46 g·kg-1），每组10只，干预21 d。给药结束后，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中HIF-1α mRNA表达情况；免疫组化法（IHC）plant bioactivity检测肿瘤组织中HIF-1α、TNF-α、VEGFA的表达水平及CD34染色检测肿瘤内血管生成情况并计算微血管密度（MVD）；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGFA、表皮生长因子受体（EGFR）蛋白的表达。结果：与模型组比较，卡培他滨组、柴胡桂枝汤低、中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.Fer-1价格01）,HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01）,HIF-1α、TNF-α、VEGFA和CD34阳性细胞表达及MVD明显降低（P<0.05,P<0.01）,HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平显著降低（P<0.01）。与卡培他滨组比较，柴胡桂枝汤中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.01）,HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01）,HIF-1α、TNF-AY-22989体内实验剂量α和VEGFA阳性细胞表达显著降低（P<0.01）,CD34表达及MVD显著降低（P<0.01）,HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平均显著降低（P<0.01）。结论：柴胡桂枝汤可能通过调控HIF-1α/VEGFA信号通路，抑制TNBC细胞血管生成，从而发挥抗肿瘤作用。

目的 探讨川芎嗪对椎间盘退变中髓核细胞(NP)凋亡和炎性反应的影响及其机制。方法 选取成年SD大鼠54只,随机分为假手术组、对照组、川芎嗪组,每组18只。比较3组盘源性疼痛改善情况及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1表达情况,并在术后14 d时观察自噬小体形成情况,同时检测NP凋亡水平。结果 对照组和川芎嗪组各时间点机械回缩阈值低于假手术组(P<0.05)。川芎嗪组在应用川芎嗪治疗后,疼痛情况较对照组获得明显改善(P<0Bafilomycin A1.01)。对照组和川芎嗪组术后7、14 d时TNF-α和IL-1阳性细胞数量高于假手术组(P<0.01)。川芎嗪组术后7、14d时TNF-α和IL-1阳性细胞数量低于对照组(P<0.05)。对照组和川芎嗪组术后7、14 d时LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1表达水平高于假手术组(P<0.01)。川芎嗪组术后7、14 dmedial plantar artery pseudoaneurysm时LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1表PF-03084014浓度达水平低于对照组(P<0.05)。川芎嗪组术后14 d时自噬小体形成数量明显低于对照组(P<0.05)。对照组和川芎嗪组术后14 d时NP凋亡水平高于假手术组(P<0.01)。川芎嗪组术后14 d时NP凋亡水平低于对照组(P<0.01)。结论 川芎嗪可通过抑制椎间盘退变时炎症细胞因子IL-1和TNF-α表达水平来改善疼痛症状,同时通过有效抑制NP自噬性凋亡的发生来抑制椎间盘退变进展。

目的 采用高糖诱导H9c2心肌细胞损伤建立糖尿病心肌病（DCM）细胞模型，观察通心络胶囊对H9c2细胞的保护作用并探讨其可能机制。方法 以葡萄糖不同浓度（45、65、75、100 mmol·L~(-1)）及75 mmol·L~(-1)葡萄糖+通心络胶囊不同浓度（20、40、80、160、300μg·mL~(-1)）分别处理H9c2细胞24 h，采用CCK-8法测定细胞存活率。将H9c2细胞分为对照组、模型组（75 mmol·L~(-1)葡萄糖）、通心络胶囊组（75 mmol·L~(-1)葡萄糖+160μg·mL~(-1)通心络胶囊），给药干预24 h。采用DCFH-DA荧光探针法检测细胞活性氧（ROS）水平；JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位；ELⅠSA法检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）及丙二醛（MDA）水平；Western Blot法检测细胞自噬蛋白（P62、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ）及AMPK-mTOR信号通路蛋白的表达。结果 75 mmol·L~(-1)葡萄糖浓度组的H9c2细胞存活率约为70%，采用该浓度建立高糖损伤H9c2细胞模型。与对照组相比，模型组H9c2细胞存活率显著下降（P<0.01）,ROS绿色荧光强度显著增强（P<0.01），线粒体膜电位红/绿荧光强度显著降低（P<0.01）,LDH、MDA水平显著升高（P<0.01）, P62、 p-mTOR/mTOR蛋白表达显著上调（P<0.01）, Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及p-AMPK/AMPK蛋白表达显著下调（P<0.01）。与模型组比较，通心络胶囊各浓度组的H9c2心肌细胞存活率明显提高（P<0.05,P<0.01）,ROS绿色荧Docetaxel价格光强度显著减弱（P<0.01），线粒体膜电位红/绿荧光强度显著升高（P<0.01）,LDH、MDA水平显著降低（P<0.01）,P62、p-mselleckchem AZD9291TOR/mTOR蛋白表达显著下调（P<0.01）,Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及p-AMPK/AMPK蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论 通心络胶囊对高receptor mediated transcytosis糖环境下的H9c2心肌细胞具有保护作用，可能与其降低氧化应激，通过AMPK-mTOR通路上调细胞自噬水平有关。

目的 探讨血清丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(SerpinB1)、纤维胶凝蛋白-3(Ficolin-3)及亲吻素(Kisspeptin)水平与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性。方法 选取2018年4月—2020年4月天津市津南医院、天津医科大学第二医院收治的GDM患者92例为研究对象并纳入GDM组，另选同期在该院进行产前检查的健康孕妇50例为对照组。对GDM组患者和对照组受试者的血清SerpinB1、Ficolin-3及Talazoparib小鼠Kisspeptin水平及血糖指标、胰Autoimmunity antigens岛素抵抗指标进行检测对比，分析探讨血清SerpinB1、Ficolin-3及Kisspeptin水平与GDM的相关性，并采用logistic多因素回归分析对GDM的影响因素进行分析。结果 GDM组患者的SerpinB1水平低于对照组，Ficolin-3、Kisspeptin水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组患者的空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson检验分析，GDM患者血清SerpinB1与FPG、2hPG、HbA1c、FINS及HOMA-IR呈负相关性，而Ficolin-3、Kisspeptin与上述指标呈正相关性(P<0.05)。logistic多因素回归分析显示，血清SerpinB1是GDM的保护因素，而Ficolin-3、Kisspeptin是GDM发生的危险因素。结论 GDM人群中Serpselleck化学inB1呈现低表达，Ficolin-3、Kisspeptin呈现高表达，且与血糖和胰岛素抵抗指标有密切相关性，通过对孕妇SerpinB1、Ficolin-3及Kisspeptin水平的检测，能为GDM的预防、诊断及治疗提供相关的参考依据。

微生物可以产生许多结构、活性多样的天然产物,是新型抗生素和抗肿瘤药物的重要来源。耐药菌的不断出现,对人类的公共卫生造成了很大的威胁,因此从微生物中发现新结构或新作用机制的活性天然产物就变得尤为迫切。伯克氏菌目细菌是生态和代谢多样化的革兰氏阴性细菌,因其产生的天然产物数量较多、结构新颖较高、生物活性良好,逐渐成为重要的天然产物产生菌和天然产物挖掘的目标菌。此外,海洋环境也是新型天然产物的重要来源,许多海洋微生物为了适应复杂多变的海洋环境,产生大量结构独特的次级代谢产物,因此也是新型天然产物的重要生产者。本研究以挖掘新型活性天然产物为研究目标,以基因组序列为导向结合基因簇异源表达对伯克氏菌科的韩国几丁质单胞菌Chitinimonas koreensis DSM 17726进行天然产物挖掘;同时利用OSMAC(One Strain Many Compounds)策略对从青岛鳌山湾海洋沉积物中的分离获得的潜在新菌种Marinoscillum sp.YZ09进行天然产物分离和鉴定。主要的研究内容与结果如下:(1)基于基因组序列定向挖掘韩国几丁质单胞菌中非核糖体肽天然产物基因组序列分析表明韩国几丁质单胞菌ChitiZ-VAD-FMK小鼠nimonas koreensis DSM 17726具有四个未知的非核糖体肽合成酶(NRPS,Nonribosomal peptide synthetase)生物合成基因簇(BGCs,Biosynthetic gene clusters)—BGC1、BGC3、BGC10、BGC11,均与已知NRPS的相似度较低,推测可能产生新型的脂肽或环肽类化合物。BGC1大小为54 kb,含有12个NPPS模块且起始模块具有起始缩合结构域,推测其产物为带有脂链的十二肽类化合物。通过基因簇的直接克隆、插入转座元件及组成型启动子Papra,在异源宿主 Schlegelalla brevitalea DSM 7029-Aglb中进行异源表达,获得一系列的差异峰。通过分离纯化及高分辨率质谱、核磁共振和Marfey’s水解等方法分离并鉴定了其中的两个新型脂肽——chitinipVorinostat配制eptins A和B,该类化合物N端带有含正十四烷酰基连接在由十二个氨基酸缩合而成的多肽骨架上,其中包含了非天然氨基酸Dhb(dehydrobutyrine),D-Dab(2,4-二氨基丁酸),D-Ser,D-Lys,D-Glu,D-Asp。进一步通过二级质谱碎片分析,推测了另外四个化合物结构——chitinipeptins C、D、E和F。生物活性测试结果表明,该化合物具有微弱的细胞毒性,但有较强的表面活性剂活性,可以促进细菌在固体基质表面的集群运动。BGC3大小为61kb,其含有与Fe3+相关的透性酶基因和脱氢酶基因,其产产物可能为铁载体化合物。对该基因簇进行直接克隆、插入启动子和异源表达,通过HPLC-MS以及铁载体活性测试,检测到了 BGC3的产物,经过MS/MS分析发现该产物与Vibrio anguillarum serotype O2 strains产生的铁载体——vanchrobactin平面结构一致,但是基因簇组成具有一定差异,可能存在进化上的不同。铁载体可为细菌捕获外界环境中的Fe3+以供自身代谢所Fluimucil Antibiotic IT需。同时成功对BGC10与BGC11进行了直接克隆与异源表达,但初步发酵尚未检测到产物,需要进一步优化条件和方法。(2)海洋沉积物中潜在新菌的分离及其产物的分离与鉴定从来源于青岛市鳌山湾的海泥、海洋动物、海洋植物样品中,共分离得到9株细菌。通过16s rDNA的比对,发现YZ0菌株与Marinoscillum属的Marinoscillumluteum strain A03A-221 的一致性为 94.95%,可能是潜在的新菌种,将其命名为Marinoscillumsp.YZ09。利用OSMAC的方法对YZ09菌株进行了发酵检测和化学筛选,分离并鉴定了一个新型吡嗪酮生物碱类化合物marinopyrazinone C,该化合物以吡嗪酮环为基本母核,并由6-甲基辛基和另外两个甲基取代。并通过基因组序列分析和同位素氨基酸喂养实验初步推测该化合物的生物合成机制。综上所述,本研究利用基于细菌基因组序列的新型天然产物挖掘技术和经典的基于新菌株资源的OSMAC挖掘策略,从C.koreensis DSM 17726中的发现了一类新型脂肽类天然产物chitinipeptins,具有良好的表面活性剂活性;从海洋来源的潜在新菌种Marinoscillum sp.YZ09中获得了新型吡嗪酮生物碱marinopyrazinone C。本研究不仅发现和鉴定了新型天然产物,再次证明了基因组序列指导的基因组挖掘和筛选潜在新菌种资源是发现新型天然产物的重要手段,对于天然产物挖掘的重要性和可行性。

Nod样受体家族嘌呤结构域3 (NLRP3)炎症小体作为一种胞浆大分子蛋白复合物，可识别细菌、病毒等病原体及多种危险信号，在机体免疫系统中抵抗病原体入侵方面发挥重要作用，还可通过活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 (caspaBiochemistry and Proteomic Servicesse-1)诱导促EPZ-6438核磁炎细胞因子白细胞介素-1β (IL-1β)和IL-18释放，引起炎症反应。以往的研究已证实NLRP3炎症小体在自身免疫病和感染性疾病中发挥重要调控作用，如类风湿性关节炎、心血管感染等，然而目前关于GSK1349572NLRP3炎症小体在口腔黏膜病方面的研究尚处于起步阶段。本文结合近年来国内外的相关研究，简要总结NLRP3炎症小体与常见的口腔黏膜病（如口腔扁平苔藓、复发性阿弗他溃疡、自身免疫性大疱类疾病等）相关性的研究进展，为NLRP3炎症小体在口腔黏膜病方面的深入研究及其应用提供参考。

c-Jun N-氨基末端激酶selleck HPLC(JNK)信号通路是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的一个重要分支，在细胞周期、细胞凋亡和细胞应激等多种生理和病理过程中发挥重要作用。JNK信号通路能通过复杂的信号转导机制广泛地应对多种外界刺激，将信息转换、整合、放大并传递至细胞内诱selleck Torin 1导特定的基因表达，调控细胞生物学行为进而影响生物整体的病理生理反应。JNK信号通路的异常激活也是炎症、肿瘤、自身免疫性疾病、纤维化疾病、神经退行性疾病等的发病机制之一，因此，进一步探索JNK信号通路在不同疾病中的作用机制或许能让我们对这些疾病有新的认识，从而有望在基因、分子层面发现新的治疗手段。现综述JNK与转化生长因子-β(TGF-β)、非经典Wnt信号通路在眼部纤维化中的研究进展，以期为眼部纤维化的药物symbiotic cognition治疗提供新靶点。

目的 探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法 体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株，并将其分为空白对照（NG）组（空白对照细胞）、pcDNA组（转染阴性对selleck合成照质粒）、pcDNA-PinX1组（转染PinX1过表达质粒）、N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）组（加入信号通路抑制剂）。采用实时荧光定量PCR法检测各组PinX1 mRNA的表达水平。分别采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、凋亡情况。采用荧光探针法检测AZD9291细胞培养各组活性氧簇（ROS）水平。采用蛋白质印迹法检测各组腺苷酸激活蛋白激酶/信号转导与转录激活因子3(AMPK/STAT3)信号通路相关蛋白的表达水平。结果 经成功转染细胞后，与NG组、pcDNA组比较，pcDNA-PinX1组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均升高，而p-STAT3/STAT3均降低，差异均有统计学意义（P均<0.05）。与pcDNA-PinX1组比较，NAC组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均降低，p-STAT3/STAT3升高，差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 PinX1过表达可抑制人食管癌EC1细胞增殖并诱导其凋亡，可能medical biotechnology通过促进ROS/AMPK/STAT3信号通路活化来实现。

通过不对称合成方法制备具有连续手性立体中心,包括季碳中心的复杂分子一直是有机化学中的挑战性科学问题。对于成键反应,调节其反应性和控制其立体选择性都至关重要。本文主要发展了以手性路易斯点击此处酸促进的不对称光致烯醇化Diels-Alder反应(PEDA反应),并将其应用于Napyradiomycin类天然产物购买Fer-1的全合成研究中。1961年,杨念祖先生报道了第一例PEDA反应,由邻甲基二芳基酮底物在紫外光激发下形成高活性的富电子双烯,进而被缺电子的亲双烯体捕获,发生串联的Diels-AlImmune adjuvantsder反应。此反应可以通过简单片段一步构建较为复杂的多环骨架,步骤及原子经济性都很高。因此化学家们不断地拓展该反应的实用性,也对其对映选择性控制进行了一些研究。但是对于大位阻、多取代亲双烯体的PEDA反应,其反应性及立体选择性控制都是尚未解决的科学问题。我们在前期发展的Ti(Oi-Pr)_4促进的消旋PEDA反应基础上,通过加入TADDOL类手性配体,成功实现了三取代和四取代亲双烯体的不对称PEDA反应。研究发现:紫外光激发下形成的双烯中间体与大位阻的亲双烯体在含有手性配体的双核金属的作用下,可以高效且高对映选择性地发生环加成反应,其中配体加速效应及添加剂的作用均可以一定程度上降低消旋的背景反应速率,从而提高产物ee值并降低手性配体用量。由此可以一步构建含有单个或连续季碳中心的多环骨架结构,为相关天然产物及药物分子的合成提供了新的解决方案。此外,通过深入的研究,我们还发现对于芳基酮类的亲双烯体,在配体存在下可以exo构型的反应过渡态生成热力学能量更高的产物。在新发展的不对称PEDA反应基础上,我们展开了对Napyradiomycin类天然产物的全合成研究。在标准条件下,通过不对称PEDA反应顺利构建了含有连续季碳中心的三环骨架,其中包括一个氧杂季碳中心。通过串联的Barton反应实现了大位阻的苄位碳氢键氧化,然后通过氧化重排反应生成不饱和酮结构的分子骨架,最后以Wittig反应接入了完整的分子侧链完成了Napyradiomycin类分子全碳骨架的构建。此外,我们还研究了醛基底物的一锅法氧化串联脱羧氯代反应,以及不饱和酮的烯丙位卤代反应,为此类天然产物的合成奠定了基础。

低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是公认的导致动脉粥样硬化发生的主要危险因素，是动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）启动和进展的主要原因。随着健康方式以及药物的干预，尽管LDL-C显著降低，但患者仍有复发性ASCVD事件，即存在残余风险。甘油三酯（TG）、残余胆固醇（RC）、极低密度脂蛋白（VLDL）和富含甘https://www.selleck.cn/products/PD-0325901.html油三酯脂蛋白（TRLs）残余物，以及脂蛋白（a）[Lp(a)]等残留危险因素引起了人们的关注，对其危险因素的干预可以KPT-330浓度进一步降低ASCVD风险。随着对健康生活方式和药物干预的日益坚持，LDL-C的人群水平正在下降，但要实Medical range of services现最佳血脂控制，往往需要新兴的临床药物干预。新型降脂药物的发现可以改善ASCVD患者的预后并帮助指导预防性治疗，本文就新型降脂药物在ASCVD患者中的临床研究进展进行综述。