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目的探讨黑碳对肺上皮正常及肿瘤细胞增殖的影响,深入揭示黑碳通过DNA甲基化改变促进肺上皮细胞恶性增殖的分子机制,为有效评价大气细颗粒物毒性组分的健康风险和毒性机制提供科学依据。材料和方法通过透射电子显微镜技术、原子力显微镜技术、Zeta电势等对不同黑碳材料进行表征;黑碳暴露小鼠后,应用HE染色和免疫组化技术来对小鼠肺组织进行组织学分析,检测小鼠肺组织5 mc和5hmc的水平,并通过Dot blot检测小鼠肺组织中DNA水平;通过Western Blot检测DNMT1、DNMT3A和TET1、TET2的蛋白水平。利用MT获悉更多T和BrdU筛选不同黑碳对肺癌细胞系A549和肺正常上皮细胞系BEAS-2B的促增殖浓度;使用划痕实验和Transwell实验来评估黑碳对细胞迁移和侵袭能力的影响;采用流式细胞仪来检测黑碳对细胞周期的作用;通过Dot blot和Western Blot检测细胞5 mc、5 hmc、DNA甲基点击此处化转移酶和DNA去甲基化酶的表达。进一步对小鼠组织和细胞DNA样本进行全基因组甲基化测序(MeDIPseq)和RNA-seq检测,获得差异表达基因,应用non-alcoholic steatohepatitis生物信息学手段进行关联分析,并通过基因功能分析、通路分析、聚类分析等筛选出与细胞恶性增殖相关的差异甲基化并差异表达的基因并进行验证。结果大部分黑碳具有良好的分散性和生物兼容性。黑碳体内暴露后引起了小鼠肺组织损伤、充血,并且Printex U和SA4B两种黑碳增强了小鼠肺组织DNA甲基化水平,在低浓度暴露下促进了A549细胞和BEAS细胞的增殖和周期,增强了氧化应激水平,并且Printex U还促进了A549细胞的迁移和侵袭。Printex U和SA4B在促增殖浓度暴露下增强了A549细胞和BEAS细胞的DNA甲基化水平,改变了DNMT酶和TET酶的蛋白表达水平。机制方面,黑碳暴露引起了细胞转运和分解代谢相关基因的差异甲基化改变。结论 Printex U和SA4B这两种黑碳颗粒通过DNA甲基化促进了正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌细胞A549增殖和周期,并增强了A549细胞的侵袭和迁移,并且引起了细胞运输和分解代谢相关通路基因的差异甲基化改变,深入的机制探索为有效评价大气细颗粒物毒性组分的健康风险和毒性机制提供科学依据。

[目的] 本试验旨在探究饲料中添加胆汁酸（Bile acids， BAs）对皮质酮（Corticosterone， CORT）诱导的肉鸡脂肪肝综合征的缓解作用。[Ferrostatin-1方法] 试验选取了120只 1日龄雄性AA肉鸡，随机分为两组，分别饲喂基础日粮和含BAs日粮。BAs添加分为前期，中期，后期三个阶段，剂量依次递增。28日龄时，从基础日粮组中选取肉鸡20只，随机分为对照组（Control， CON），皮质酮处理组(Corticosterone， CORT)；从胆汁添加组中随机选取10只设为皮质酮加胆汁酸组（CORT+BAs)。CON组颈部皮下注射酒精PBS溶液（15%酒精），CORT和CORT+BAs组注射4 mg/kg皮质酮，连续注射7天。于第40日龄屠宰selleckchem Pidnarulex采样，记录器官与组织重量，采集血清和肝脏组织以测定生化指标、脂代谢相关基因和蛋白表达水平。[结果] 饲料中添加BAs可显著缓解由CORT处理引起的腹脂率的升高及腿肌重的降低 (P < 0.05)。生化分析结果表明，CORT处理显著降低了40日龄肉鸡血清中高密度脂蛋白（HDLC）水平、增加血液游离脂肪酸（NEFA）水平，而BAs处理显著升高血清HDLC水平（P < 0.05）。与对照组相比，CORT处理组肉鸡肝脏内甘油三酯（TG）水平显著升高 （P < 0.01），肝细胞内脂滴显著富集且出现空泡化现象，而BAs处理可显著缓解肝脏内的TG沉积（P < 0.01）。CORT处理显著上调肝脏脂中硬脂酰辅酶A去饱和酶（Scd1）和乙酰辅酶A羧化酶（Acc）的表达水平（P < 0.05），并显著上调ACC和脂肪酸合成酶（FASN）的蛋白表达水平（P < 0.05），但下调过氧化物增殖激活受体Homogeneous mediator（PPARα）的蛋白表达水平（P < 0.05）；BAs处理可显著逆转皮质酮引起的以上基因和蛋白表达变化，并显著增加肉毒碱棕榈酰基转移酶1A（Cpt1a）的基因表达水平并显著降低脂肪酸转位酶（CD36）的蛋白表达水平（P < 0.05）。[结论] 日粮中添加胆汁酸可通过减少肝脏内TG合成、促进其分解、抑制肝细胞对脂肪酸的摄取，从而缓解注射皮质酮诱导的肉鸡脂肪肝综合征。

目的探讨并分析成人急性髓细胞白血病患者的免疫分型特点,同时对患者的临床预后情况进行简单的分析和探索,以便为临床的干预工作提供科学参考。方法本研究的研究对象均为我院在2016年1Wnt-C59生产商0月至2017年12月收治的成人急性髓细胞白血病患者,本研究选择100例患者作为研究对象,对于所有患者的临床资料进行回顾性分析,主要为患者选择采用CLapatinib配制D_(45)/侧向角散射设门方法进行流式细胞术免疫表型分析,研究成人急性髓细胞白血病免疫分型的特点,对患者的临床预后情况进行总结。结果本研究所收治的100例成人急性髓细胞白血病免疫谁系抗原表达的阳性率主要为CD_(117)为79%,CD_(13)为80%,CD_(33)为82%,HILA-DR为75%。在本研究100例患者当中,存在有32%的急性髓细胞白血Immunomagnetic beads病患者,存在有林系抗原表达变异的情况。结论临床对于成人急性髓细胞白血病患者,选择采用流式细胞术对于白血病进行诊断,对于患者的免疫分型和治疗预后等都具有重要的意义。

目的 探讨肿瘤相关物质(TAM)对非小细胞肺癌发生骨转移的评估意义。方法 选取2019年4月至2022年6月郑州大学第二附属医院收治的非小细胞肺癌患者110例，根据有无出现骨转移分为骨转移组与非骨转移组，回顾性采集并比较分析患者年龄、性别、病理类型、吸烟状况、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血清TAM、血清白蛋白(ALB)、血清钙(Ca)、血清碱性磷酸酶(ALP)、血常规数据。结果 骨转移组与非骨转移组病理类型(χ~2=4.365,P=0.037)、血清NSE(Z=2.518,P=0.012)、血清TAM(Z=4.142,P<0.001)、血清Ca(Z=3.066,P=0.002)、血清ALP(Z=4.203,P<0.001)、白细胞(WBC)(Z=2.143,P=0.032)、中性粒细胞(NE)(Z=2.461,P=0.014)比较差异均有统计学意义；血清TAM与血清ALP(r=0.220,P=0.021)、WBC(r=0.383,P<0.001)、NE(r=0.401,P<0.001)呈正相关；血清TAM(ORoral pathology=1.046,95%CIElexacaftor体外:1.0selleck产品13～1.080,P=0.007)、血清ALP(OR=1.023,95%CI:1.006～1.039,P=0.006)是非小细胞肺癌患者发生骨转移的独立危险因素；血清TAM、ALP评估非小细胞肺癌患者发生骨转移的曲线下面积分别为0.730、0.733,敏感性分别为70%、54%,特异性分别为78.3%、86.7%,最佳临界值分别为97.145 u/mL、105 u/L,两者的敏感性(χ~2=1.691,P=0.193)和特异性(χ~2=2.652,P=0.103)比较差异均无统计学意义。结论 TAM在评估非小细胞肺癌是否发生骨转移方面有较好的临床价值。

目的:本研究拟探究白细胞介素35(Interleukin35,IL-35)在人脑胶质瘤中的表达及预后意义,以期找到胶质瘤新的治疗靶点。方法:收集某三甲医院2019年1月-2022年1月经手术治疗的77位胶质瘤患者的肿瘤标本(术前均未进行放化疗)及1Pulmonary microbiome5例脑外伤患者行颅内减压术切除的正常脑组织,MLN8237根据世界卫生组织(WHO)分级,将脑胶质瘤主要分为I级(恶性程度最低、预后最好)到IV级(恶性程度最高、预后最差),其中低级别胶质瘤(WHO I级13例、WHO II级25例),高级别胶质瘤(WHO III级16例,WHO IV级23例)。研究采用免疫组化(IHC)及免疫印迹法(Western Blotting)分别检测组成IL-35的两个亚基p35和EBi3在不同级别脑胶质瘤患者及脑外伤患者行颅内减压术切除的正常脑组织的表达情况。随访调查统计不同级别胶质瘤患者的生存周期与组织中p35和EBi3表达量是否相关。应用SPSS24.0软件进行处理;计量资料以`x±s表示,采用c~2检验探究正常脑组织及不同级别胶质瘤中p35和EBi3的表达差异;生存曲线采用Kaplan-Meir法分析。结果:人脑胶质瘤中p35和EBi3强阳性表达率高于对照组(P<0.05),且高级别脑胶质瘤组中的p35和EBi3强阳性表达率高于低级别组(P<0.05)。长期随访调查显示,IL-35表达高的患者较IL-35表达低的患者生存周期短,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在人脑胶质瘤中,IL-35的表达越高,胶质瘤恶性程度越高,且患者的生存周期越短,IL-35有望作为评价胶质瘤恶性程度及胶质Z-IETD-FMK试剂瘤患者预后情况的指标。

目的探讨高迁移率族蛋白A2(HMGA2)和基质金属蛋白酶(MMP-2)在星形细胞瘤中的表达与侵袭性、病理学分型的关系及HMGA2和MMP-2之间的相互关系。方法应用免疫组化(S-P)方法对78例星形细胞瘤组织中的HMGA2和MMP-2进行检测。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测HMGA2和MMP-2的mRNA表达。结果 78例星形细胞瘤中HMGA2和MMP-2的蛋白阳性率分别为92.30%和89.74%,HMGA2基因表GSK1349572达水平在胶质母细胞瘤(2.56倍,P<0.01)和LY2835219体内实验剂量间变性星形细胞瘤(1.98倍,P<0.01)中显著高于星形细胞瘤,Populus microbiome而在胶质母细胞瘤与间变性星形细胞瘤之间无显著区别(1.29倍,P=0.118)。HMGA2与MMP-2之间的蛋白及mRNA表达水平存在相关关系(P<0.01)。结论 HMGA2及MMP-2的增强表达与星形细胞瘤恶性程度增高及肿瘤侵袭性增强有密切关系,其表达可作为判断星形细胞瘤患者预后的指标。

目的:探讨固本健脑方通过调节AD大鼠肠道菌群,从而作用于C/EBPβ/AEP信号通路,起到治疗AD的目的。方法:50只SD雄性大鼠正常喂养1周后,通过随机分组法分为正常组、模型组、固本健脑方高低剂量组(以下简称固高、固低组)、益生菌组共5组,每组10只。造模时,正常组不予任务处理,模型组和治疗组双侧大脑海马区注射Aβ_(25-35)建立AD模型。造模结束第4天开始,固高组、固低组给予固本健脑方灌胃,益生菌组给予双歧杆菌三联活菌片灌胃,连续灌胃8周后用水迷宫试验检测大鼠的空间记忆能力;用尼氏染色检测尼氏小体分布及数量;用HE染色检测各组大鼠神经元数量形态;通过Western blot法检测大脑海马C/EBPβ/AEP信号通路蛋白的表达,包括C/EBPβ、p-C/EBPβ、AEP;16Sr RNA检测大鼠粪便菌群门水平和属水平的丰度和多样性。结果:1.水迷宫实验证实,在定向航行测试中,正常组的大鼠逃避潜伏期Plant biomass时间明显短于模型组(P<0.05),模型组的大鼠逃避潜伏期时间明显长于固高组、固低组和益生菌组(P<0.05mTOR抑制剂),且运动轨迹杂乱无章。在空间探索实验中,与正常组相比,模型组大鼠穿越目标象限平台的次数明显减少(P<0.05),而与模型组相比,各给药组大鼠穿越平台的次数显著增加(P<0.05)。2.尼氏染色实验证实,正常组的细胞胞核圆满,排列整齐,神经元尼氏体数量丰富。而模型组的胞核破裂不完整,排列分散,细胞内尼氏体数量稀少。与模型组相比,益生菌组和固高组、固低组神经元细胞数目受损较少,胞核形态明显改善,尼氏体排列相对有序均匀紧密。3.HE染色表明,正常组海马神经元数量最多,形态完整,而模型组数量明显减少,排列稀疏散乱,各治疗组较模型组而言,神经元细胞数量增多,且细胞排列相对整齐均匀。4.Western blot显示正常组的三个蛋白表达量均低于模型组(P<0.05),和模型组相比,固高组、固低组、益生菌组的C/EBPβ、p-C/EBPβ、AEP三个蛋白的表达量均下降(P<0.05)。5.在16Sr RNA实验证实,通过Shannon曲线、稀释曲线、Rank abundance、物种累积曲线等Alpha多样性分析,展示了物种微生物的多样性和丰富度。在门(phylum)水平上,模型组的脱硫杆菌门(Desulfobacterota)丰度高于空白组和药物组,在属(genus)水平上,与药物组相比,模型组的苏黎世杆菌属(Turicibacte-r)和布劳特氏菌属(Blautia)丰度相对降低(P<0.05),而和药物组比,模型组毛螺菌科NK4A136属(Lachn-ospiraceae NK4A136 gApoptosis抑制剂roup)、葡聚糖菌属(Colidextribacter)和脱硫弧菌属(Desulfovibrionaceae)的丰度相对增加(P<0.05)。结论:固本健脑方可改善由Aβ_(25-35)诱导的AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与其调节肠道菌群,发挥“肠-脑轴”机制,从而抑制C/EBPβ/AEP信号通路的表达有关。

目的 研究桑皮苷A(Mul A)对人肺癌细胞A549紫杉醇(Taxol)化疗作用的影响及机制。方法 将A549细胞分为溶媒对照组(二甲基亚砜)、紫Serratia symbiotica杉醇单用组(50 nmol·L~(-1)紫杉醇处理48 h)、桑皮苷A组(10、20、40μmol·L~(-1 )桑皮苷A处理48 h)、紫杉醇联用桑皮苷A组(50 nmol·L~(-1 )紫杉醇+10、20、40μmol·L~(-1)桑皮苷A处理48 h)。用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响；用流式细胞仪检测药物对细胞凋亡和细胞Berzosertib半抑制浓度周期分布变化的影响；分别用聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测桑皮苷A对A549细胞中P-糖蛋白(P-gp)mRNA表达、蛋白表达及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关蛋白的影响。结果 桑皮苷A可显著增强紫杉醇对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用，其中20, 40μmol·L~(-1)桑皮苷A与紫杉醇联用可分别使细胞存活率显著下降约17.28%和27.38%。同时，与紫杉醇单用相比，10、20、40μmol·L~(-1)桑皮苷A与紫杉醇联用可使G_2/M期细胞量点击此处占比分别显著增加0.73、1.54和2.82倍；此外，20、40μmol·L~(-1)桑皮苷A与紫杉醇联用使G_0/G_1期细胞量占比分别显著减少26.74%和50.27%。细胞凋亡实验结果显示，桑皮苷A可明显增强紫杉醇诱导的A549细胞凋亡。与对照组相比，桑皮苷A可降低A549细胞内P-gp的mRNA和蛋白表达水平，10、20与40μmol·L~(-1)可分别使P-gp mRNA表达水平显著下降26.76%、41.43%和62.30%。此外，研究还发现桑皮苷A显著性增强A549细胞内转录因子p65(RelA/p65)的核转位、升高细胞质中磷酸化核因子-kappa B抑制蛋白α(p-IκBα)蛋白水平。结论 桑皮苷A对人肺癌细胞A549进行紫杉醇化疗具有增敏作用，其机制可能与激活细胞内NF-κB信号通路，进而下调P-gp的表达水平有关。

沙棘是少有的在果肉中高积累生物SAHA IC50活性油和黄酮的植物。为了解沙棘果肉成熟过程中重要生物活性成分的合成代谢差异，采用超高效液相色谱串联质技术，对2个沙棘品系发育期间(绿色和橙色)的果肉进行非靶向代谢组学研究。结果表明：4组样品存在较大的代谢差异，依据不同品系发育期样品组间变量投影重要度(variable importance in the projection，VIP) > 1且t检验的P < 0.05，共筛选到124个显著差异代谢物，主要包括有机酸、碳水化合物、脂类、黄酮类和次生代谢物等；根据KEGG代谢通路分析，分别识别到Metabolism抑制剂15个、7个和4个显著差异代谢物与脂类、黄酮和5-羟色胺合成代谢相关，以及其他8个与抗癌功能相关的显著差异代谢物。沙棘果肉磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine，PC) (16:0/16:0)和甘油磷酰胆碱的显著上调与油脂高积累密切相关；显Mediterranean and middle-eastern cuisine著上调的异鼠李素则是果肉富含黄酮的关键；N-乙酰羟色氨、卡培他滨和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)等抗癌相关生物活性成分在果肉发育期间呈现出相对较高的含量。这为解析沙棘生物活性成分合成代谢机制以及相关功能产品开发提供科学依据。

landscape dynamic network biomarkers目的探讨替吉奥辅助化疗对行胰头十二指肠切除术的老年胰腺癌患者术后免疫功能及预后的影响。方法选取收治的老年胰腺癌患者79例,均行胰头十二指肠切除术治疗,将患者随机分为对照组(n=39)及观察组(n=40),对照组患者采用吉西他滨辅助化疗,观察组患者在对照组的基础上联合替吉奥辅助化疗。检测化疗前后两组肿瘤标志分子水平、免疫球蛋白含量、T淋巴细胞亚群及NK细胞比例;统计两组近远期临床疗效及治疗期间不良反应。结果与化疗前比较,化疗后两组血清CA19-9、CA50、CA125及CA242水平明显降低(P<0.01),且观察组显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);与化疗前比较,化疗后两组血浆IgG、IgA及IgM含量均明显升高,且观察组显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);与化疗前比较,化疗后两组CD4~+、CD8~+比例及NK细胞比例均显著降低,但观察组CD4~+比例及NK细胞比例显著高于对照组,CD8~+比例显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);化疗前后对照组CD4~+/CDR428细胞培养8~+比值无显著变化,而观察组化疗后CD4~+/CD8~+比值明显增加,且显著Tofacitinib试剂高于对照组(P<0.01)。观察组总有效率为82.50%,显著高于对照组的58.97%(P<0.05),且观察组术后1年、2年生存率也显著高于对照组(P<0.01)。两组均无严重不良反应。结论替吉奥辅助化疗可显著降低行胰头十二指肠切除术的老年胰腺癌患者术后血清肿瘤标志分子水平,保护其免疫功能,提高患者临床疗效及远期生存率,并具有一定的安全性。