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目的 基于结肠癌HCT116细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型研究灵芝组分(Ganoderma components,Gc)的抗肿瘤作用。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS鉴定3种Gc的化学组成；以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HCT116细胞3D培养模型，评价Gc1、Gc2、Gc3和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对2D和3D培养的medical consumablesHCT116细胞增殖的影响，并在HCT116细胞3D培养模型中分析Gc3对周期、凋亡、耐药、脂代谢及5-FU抗肿瘤活性的影响；采用CCK-8法检测细胞活力；Reaselleck Bemcentinibl-time PCR检测细胞mRNA表达水平；Western blotting检测细胞蛋白表达水平；采用HPLC检测细胞内5-FU含Staurosporine化学结构量。结果 从Gc1、Gc2和Gc3中分别鉴定出76,69和17个化合物；与2D培养相比，3D培养的HCT116细胞增殖率更低，周期促进蛋白CDK2、CDK4、CDK6及脂肪酸合成蛋白FASN、SREBP1的表达显著下调，周期抑制蛋白p21和p27、脂滴分解蛋白ATGL及药物抵抗基因ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达水平显著上调；Gc1、Gc2、Gc3和5-FU作用48h可呈浓度依赖性抑制2D和3D培养的HCT116细胞增殖，且Gc3的抑制作用显著强于Gc1和Gc2；在HCT116细胞3D培养模型中，Gc3可显著降低CDK2、CDK4、Bcl-xl、ATGL、LC3B的表达水平，升高p21、p27、Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved PARP1的表达水平，过表达LC3B或ATGL均可减弱Gc3诱导的细胞毒性；Gc3还可显著抑制ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达，提高细胞内5-FU的浓度，并加强5-FU的抗肿瘤活性。结论 Gc3通过抑制细胞自噬和脂滴分解而诱导3D培养的HCT116细胞凋亡，并通过抑制ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1mRNA的表达加强5-FU的抗肿瘤活性。

RNA甲基化在许多基本的生物学过程中起着关键作用，包括基因表达的调控、信使chronic virus infectionRNA的稳定性和稳态。m7G甲基化通过修饰各种RNA分子，包括信使RNA(mRNA)、核糖体RNA(rRNA)、microRNA和转运RNA(tRNA)等，参与生理和病理功能。m7G是发生确认细节在tRNA可变环中最普遍的修饰之一，由人类METTL1-WDR4复合物调控。m7G修饰调控mRNA的转录、microRNA的生物合成、生物学功能、tRNA的稳定性、18SrRNA的加工和成熟。作为m7G的甲基转移酶，METTL1在各种肿Pidnarulex临床试验瘤中发挥着重要作用，包括影响甲基化水平、肿瘤相关基因稳定性、癌细胞信号通路等多种调节机制。因此，阐明METTL1在肿瘤发生发展过程中的机理，对肿瘤的诊疗具有重要意义。本研究综述了METTL1介导的m7G RNA甲基化在急性髓细胞白血病(AML)、肝内胆管癌(ICC)、肝细胞癌(HCC)、结肠癌(CC)、肺癌、鼻咽癌、膀胱癌等各种肿瘤发生发展过程中调控作用的研究进展，探讨了METTL1与RNA稳定性的关系以及对多种肿瘤的调节机制，认为METTL1可能成为新的诊断标志物和治疗靶点。

目的 探讨龙葵碱（solanine）对乳腺癌细胞多柔比星耐药性的影响及其机制。方法 选用乳腺癌细胞MCF-7细胞和对阿霉素（adriamycin,ADM）或多柔比星耐药的乳腺癌细胞MCF-7/ADR细胞，转染pcDAN-Med19过表达中介体19(mediator 19,Med19)，应用CCK-8法检测细胞增殖水平，qRT-PCR和Western blot检测细胞中Med19和凋亡相关Bcl-2、Bax及Cleaved-Caspase-3表达水平，TUNEL染色和流式细胞术分析细胞凋亡确认细节水平。结果 龙葵碱显著降低MCF-7/ADM细胞活力。Med19高表达于MCF-7/ADM细胞，龙葵碱显著抑制MCF-7/ADM细胞中Med19表达，龙葵碱对多柔比星处理的MCF-7/ADM细胞活力的降低、凋亡的促进、凋亡相关蛋白Bax和Cleaved-Caspase-3水平的上调及Bcl-2水平的下调可被过表达late T cell-mediated rejectionMed19明显抑制。结论 龙葵碱通过抑制Med19表达而降低乳腺癌细胞MCF-7/ADM对多柔比星的耐R428临床试验药性。

背景与目的：环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类呈闭合环状结构的非编码RNA，在基因表达调控方面具有重要的潜能。CircRNA与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨hsa＿circ＿0001573对乳腺癌细胞生物学行为的影响及机制。方法：收集重庆医科大学附属第一医院2020年1月—2021年1月经手术切除的4例乳腺癌组织和癌旁组织，通过RNA微阵列芯片分析（microarray analysis）技术进行分析，并采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）验证40例乳腺癌组织和癌旁Tamoxifen作用组织以及正常人乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞（MCF-7和SK-BR-3）中hsa＿circ＿0001573的相对表达量。采用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）实验进一步检测其在细胞中的定位与表达。转染干扰质粒后，采用细胞计数试剂盒（cellcountingkit-8,CCK-8）、EdU实验检测细胞增殖；通过transwell小室实验、伤口愈合实验和克隆形成实验分别检测细胞侵袭和迁移；采用Hoechst33342、TUNEL与流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测CCND1、CCND2和CDK4的表达。探讨hsa＿circ＿0001573对裸鼠移植瘤生长的影响。采用RNA pull down实验检测与hsa＿circ＿0001573相互作用的蛋白，荧光原位杂交联合免疫荧光（fluorescence in situ hybridization and immunofluorescence,FISH-IF）进一步检测hsa＿circ＿0001573与GNB4的亚细胞共定位，探究潜在的分子机制。结果：hsa＿circ＿0001573在乳腺癌组织（P<0.05）和乳腺癌细胞（P <0.001）中显著上调，敲低hsa＿circ＿0001573能抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，诱导细胞凋亡，降低CCND1、CCND2和CDK4的相对表达量。体内实验结果表明，敲低hsa＿circ＿0001573可抑制移植瘤生长。RNA pull down实验显示，hsa＿circ＿0001573与GNB4蛋白结合，FISH-IF表明hsa＿circ＿0001573与GNGSK J4B4共定位于乳腺癌细胞中，且与GNB4相互作用能促进c-myc的表达。结论：环状RNA hsa＿circ＿0001573在乳腺癌中高表达，敲低hsa＿circ＿0001573对细胞增殖、侵袭Flexible biosensor能力及细胞凋亡和细胞周期有调控作用，并在体内抑制移植瘤生长，可通过与GNB4蛋白的相互作用，本研究结果可望为乳腺癌治疗提供新靶点。

目的 探讨心电散点图和常规心电图在心律失常中的诊断价值。方法 选取因疑似心律失常接受心电图3-Methyladenine临床试验检查的患者950例为selleck CH-223191研究对象。所有患者均行常规心电图、心电散点图检查，分析不同类型心律失常患者心电散点图B线斜率；采用受试者工作特征(ROC)曲线分析B线斜率诊断不同类型心律失常的效能以及常规心电图联合心电散点图的诊断效能。结果 常规心电图诊断准确率为73.78%(622/843),心电散点图诊断准确率为85.88%(724/843),常规心电图联合心电散点图诊断准确率为96.56%(814/843)。ROC曲线分析显示，心电散点图斜率诊断室上性早搏、心房颤动、室内差异传导、室性早搏的曲线下面积(AUC)分别为0.951、0.614、0.675、0.961;常规心电图、ECOG Eastern cooperative oncology group心电散点图单独和联合诊断心律失常的AUC分别为0.729、0.827和0.936。结论 心电散点图可快速诊断心律失常，联合常规心电图诊断可更好地降低漏诊率。

目的 总结急性肾损伤（Acute renal injury, AKI）患者发生谵妄的危险因素。方法 136例急性肾损伤患者，采用意识模糊评估表（CAM-ICU）观察AKI患者谵妄的发生情况，采用多因素Logistic回归法分析急性肾损伤患者发生谵妄的危险因Dolutegravir IC50素。结果 136例患者中65例发生谵妄。与未发生谵妄者比较，发生谵妄的AKI患者年龄大、高血压比例高、急性生理学与慢性健康评分Ⅱ高、营养筛查评分高、血清降钙素原Berzosertib IC50水平高、白细胞高、血清肌酐水平高、血尿素氮水平高，机械通气时间长、肾脏替代治疗时间长、ICU住院时间长（P均<0.05）。高血压、血清肌酐水平、机械通气时间、入住ICU时间是AKI患者发生谵妄的危险因素（OR=10.793,1.052,1.134,1.108;P均<0.05）。结论 存在高血压病史、血清肌酐浓度高、urinary metabolite biomarkers机械通气时间和入住ICU时间长是急性肾损伤患者发生谵妄的危险因素。

目的 探讨miR-483-5p对骨关节炎软骨细胞增殖及炎症因子的影响及机制。方法 分离培养骨关节炎软骨细胞，将其分为Con组、miR-483-5p inhibitor组、miR-483-5p inhibitor+LPS组；四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率；流式细胞仪检测细胞周期；酶liquid biopsies联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平；Western印迹检测蛋白表达。结果 与Con组相比，miR-483-5p inhibitor组软骨细胞存活率明显升高，G0-G1期细胞所占比例明显降低，S期细胞所占比例明显升高，TNF-α、IL-6水平明显降Decitabine说明书低，TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与miRBelumosudil体外-483-5p inhibitor组相比，miR-483-5p inhibitor+LPS组软骨细胞存活率明显降低，G0-G1期细胞所占比例明显升高，S期细胞所占比例明显降低，TNF-α、IL-6水平明显升高(P<0.05)。结论 干扰miR-483-5p可抑制骨关节炎软骨细胞的增殖及炎症因子的释放，其机制可能与Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路有关。

论文主要研究内容如下:第一部分:对有关新疆一枝蒿植物的化学成分(有机酸类、氨基酸类、挥发油、黄酮类、倍半萜类、生物碱类、多糖类、多肽类)、药用价值(抗过敏性鼻炎作用、抗病毒作用、抗流感作用、抗氧化作用、抗炎作用、抗菌作用、保肝作用、抗肿瘤作用、治疗荨麻疹、蛇虫叮咬、感冒发烧)、有效活性成分,和一枝蒿酮酸衍生物及其抗流感活性研究进展进行了综述。第二部分:对一枝蒿酮酸进行分离纯化及其抗肿瘤活性筛选。在1μM、20μM两个浓度下的一枝蒿酮酸DMSO溶液对Lncap、A2780、786-O、GBC-SD、CNE、HK-2、WPMY-1、Hela、KATO III、COLO 201、KYSE-70、769-P、HCCC9810、Hep-2、HT-1197、SKOV3、HCT116、Hep 3B、Calu-1、MS751、NCI-H1299、DU145、8305C、NCI-H1650、Capan-2、FHs 74 Int、HCC70、RL95-2、HFL-1、EC109、NCI-H526、HUH7和293T细胞成功进行抗肿瘤实验。结果表明,低浓度(1μM)的一枝蒿酮酸对癌细胞几乎没有抑制效果,抑制率均低于20%,对CNE抑制效果最好,也只有18.11%。在高浓度(20μM)Milk bioactive peptides时对293T细胞的抑制效果有75.9%,对SKOV3细胞的抑制效果只有61.8%,对HCT116细胞的抑制效果最好,高达86.5%。一枝蒿酮酸(20μM)对293T、SKOV3和HCT116展现出优异的抗肿瘤活性,具有作为药物中间体,开发成抗肿瘤新药的潜力。第三部分确认细节:基于一枝蒿酮酸抗癌活性,对一枝蒿酮酸进行结构修饰。尝试在不同条件合成其酰胺类衍生物,形成了一套,高效合成一枝蒿酮酸杂环酰胺类衍生物的方法:缩合剂选用HATU,DIEA做碱、DMF做溶剂,反应1-12 h,TLC跟踪判断反应终点。该方法操作简便、产率较高。在化合物合成,表征后,本课题组对衍生物的进行了抗肿瘤活性探究。第四部分:目前的抗肿瘤活性结果只是书面数据,无法实时观察癌细胞在给药之后的生理状态。课题组尝试将一枝蒿酮酸接入发光体系,给药之后可以观察到一枝蒿酮酸探针在细胞里的荧光聚集、细胞形态的变化。首先课题组对酮酸探针进行了紫外吸收光谱测试,得到最大吸收波长。然后在最大波长附近激发,探究不同溶剂ACN(乙腈)、DCM(二氯甲烷)、DMSO(二甲基亚砜)、EA(乙酸乙酯)、THF(四氢呋喃)、MeOH(甲醇)和纯水下探针的荧光发射光谱,发现探针在水中发射最强,MeOH最弱。在AIE测试中,选择MeOH和水混合溶剂,得出探针具有AIE(聚集诱导发光,aggregation-induced emission,AIE)效应。细胞成像中选择DMSO给药,成功实现了细胞成像,但细https://www.selleck.cn/products/Staurosporine.html胞成像稳定性较弱、定量困难,课题组对探针抗肿瘤活性结果无法直观得出,又做了细胞抑制率实验,证实探针对MDA-MB-231(三阴乳腺癌细胞)存在抑制结果,为探究一枝蒿酮酸作用机制提供新的思路。

目的 研究围绝经期乳腺癌组织中增殖细胞核抗原ki-67与雄激素受体(AR)的表达情况以及与预后的关系。方法 通过检测2017年6月至2018年6月期间的72例围绝经期乳腺癌手术标本中ki-67与AR的表达，分析两者与临床病理特征的关系，COX回归模型进行多因素分析、Kaplan-Meier法绘制生存曲线，探讨其与预后的关系。结果 免疫组化染色显示，72例围绝经期乳腺癌患者中有29例(40.28%)ki-67阳性表达，42例(58.33%)AR阳性表达。不同组织学分级、分子分型的亚PS-341半抑制浓度组病例间ki-67及AR的表达均有统计学差异(P<0.05),而在不同年龄、肿物大小、腋窝淋巴结状态亚组病例间的表达均无统计学差异(P>0.05)。COX多因素回归分析显示，乳腺癌组织中ki-67表达和分子分型是预后的独立影响因素[分别为HR=1.55,95%CI(1.01,2.34),P<0.05;HR=1.83,95%CI(1.29,2.62),P<0.05];而Kaplan-Meier生存曲线显示，乳腺癌组织中不同ki-67或AR表达状况的患者累积生存期无统计学差异(P>hereditary risk assessment0.05)。结论 ki-67、AR在围GNE-140采购绝经期乳腺癌组织中表达水平不同，联合检测有助于综合评价乳腺癌的发生发展，有助于临床对乳腺癌的精准诊疗和预后评估。

目的 探讨剔除目标成分后的丹参注射液对大鼠嗜碱性粒细胞白血病(RBL-2H3)细胞和大鼠过敏反应的影响。方法 选取RBL-2H3细胞，分别以2寻找更多5、50、100μg/ml的丹参和剔除目标成分后的丹参注射液处理24小时后，比较各组细胞脱颗粒、β-氨基己糖苷酶含量、组胺含量及蛋白(p-p38、p-cJNU、p-Syk)表达。将雄性SD大鼠随机分为丹参注射液组、剔除目标成分后注射液组、正常组和阳性对照组(天花粉蛋白)各8只，按照临床等倍剂量分别腹腔注射丹参注射液组、剔除目标成分后注射液组、生理盐水及天花粉蛋白。比较各组大鼠血清被动阿瑟斯反应、肺组织病理结构、组胺含量和总IgE浓度。结果 在RBL-2H3细胞中，丹参和剔除目标成分后的丹参注射液干预组RBL-2H3细胞的脱颗粒率、β-氨基己糖苷酶释放率、组胺含量和p-p38、p-cJNU和p-Sykpain biophysics蛋白的表达显著高于阴性对照组；相同浓度的丹参和剔除目标成分后的丹参注射液干预下，剔除目标成分后的丹参注射液selleck产品组细胞中的这些指标显著低于丹参组，差异有统计学意义(P<0.05)。在SD大鼠中，丹参和剔除目标成分后的丹参注射液干预组SD大鼠被动阿瑟斯反应、肺组织病理损伤、SD大鼠血清和肺组织中组胺含量和总IgE浓度显著高于正常组；剔除目标成分后的丹参注射组显低于丹参注射组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 相较于丹参注射液，剔除目标成分后的丹参注射液可减弱RBL-2H3细胞和大鼠过敏反应。