Author: admin

目的:GW4869生产商探究肺鳞癌中Beclin 1表达的临床病理意义及抑癌作用。方法:肺鳞癌SQ-5细胞过表达Beclin 1,分别通过CCK-8、海马能量监测GW-572016分子量、油红O染色、流式细胞术、β-半乳糖苷酶染色、transwell、免疫荧光和Western蛋白印记检测细胞增殖、糖代谢、脂肪堆积、细胞周期与凋亡、衰老、迁移与侵袭、肿瘤生长及表型相关蛋白表达。Becn1 mRNA表达水平与肺鳞癌临床病理特征相比较。结果:与对照组比较,Beclin 1抑制肺癌SQ-5细胞增殖、迁移与侵袭以及肿瘤生长,诱导凋亡、S/G2期阻滞、促进脂肪积累、自噬与衰老,体内外实验Becn1转染体对顺铂耐药。转染体中Bcl-2、β-连环蛋白和HSP90表达下调,LFocal pathologyC-3B、ADFP、细胞色素C、p-p38和p-NF-кB表达升高。生物信息学分析表明,肺鳞癌中Becn1 m RNA表达上调(p<0.05),Becn1基因表达与N分期、TNM分期、TP53野生型和不良预后呈现负相关(p<0.05)结论:异常Beclin 1表达抑制肺鳞癌发生与演进,其过表达可逆转增殖和侵袭等恶性表型,可作为肺鳞癌预后潜在靶点。

目的 观察阿司匹林与氯吡格雷抵抗相关基因的多态性，探究其与复发性脑梗死的关系。方法 选取2019年4月至2020年12月我院神经内科收治的脑梗死患者98例，回顾性分析脑梗死患者阿司匹林及氯吡格雷抵抗相关基因多态性与性别、复发性脑梗死的关系。结果 在脑梗死患者中，阿司匹林重度抵抗型患者在规范抗血小板治疗情况下较敏感型患者更容易出现复发性脑梗死(P<0.05);阿司匹林中/重度抵抗型合并氯吡格雷中LY2157299/慢代谢型患者比阿司匹林敏感型和(或)氯吡格雷快代谢型患者更容易出现复发性脑梗死(P<0.05);不同氯吡格雷药物相关基因表型复发性Protein Gel Electrophoresis脑梗死占比差异无统计学意义(P>0.0Naporafenib体内5);不同性别阿司匹林、氯吡格雷抵抗相关基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 治疗脑梗死时进行阿司匹林、氯吡格雷抵抗相关基因型检测十分重要，需要根据检测结果，适当调整治疗方案，以期提高脑梗死治疗效果。

目的 探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)诱导树突状细胞(dendritic cells, DCs)向免疫耐受型转化的作用及机制。方法 将树突状细胞分为4组：对照组(DC)、VEGF组(DC中加入外源性VEGF)、共培养组(DC与SCC7细胞共培养)及抗VEGF组(DC与SCC7细胞共培养后加入VEGF抗体),采用流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测DC表面标记分子的表达情Kidney safety biomarkers况；为了检测DC对T细胞增殖的影响，将实验分为5组：空白组(T细胞)、对照组(T细胞+DC)、VEGF组(T细胞+DC+VEGF)、共培养组(T细胞+DC+SCC7细胞上清)及抗VEGF组(T细胞+DC+SCC7上清+VEGF抗体),采用混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction, MLR)检测；分别应用Western blot、real time PCR及FCM检测各组DC中吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase, IDO)和程序性死亡受体配体1(programmed cell death l ligand 1,PD-L1)的表达情况；收Baricitinib研究购买集肿瘤细胞抗原致敏的DC诱导形成的细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocyte, CTL)与肿瘤细胞共培养，检测其对肿瘤细胞的杀伤活性，实验分为LGX818价格4组：对照组(T细胞+DC)、IDO抑制剂组(T细胞+DC+IDO抑制剂)、抗PD-L1组(T细胞+DC+PD-L1抗体)及联合用药组(T细胞+DC+IDO抑制剂+PD-L1抗体);小鼠荷瘤模型中观察IDO抑制剂及抗PD-L1抗体对瘤体大小及脾脏指数的影响。结果 与对照组比较，VEGF组、共培养组和抗VEGF组DC表面标记分子的表达均有所降低；但是，抗VEGF组DC表面标记分子的表达稍高于VEGF组及共培养组。VEGF组及共培养组DC刺激T细胞增殖显著弱于对照组，而抗VEGF组DC刺激T细胞增殖能力有所恢复。与对照组相比，VEGF组、共培养组DC中IDO和PD-L1的表达均显著升高，而抗VEGF组DC中IDO和PD-L1的表达均有所下调。IDO抑制剂组、抗PD-L1组和联合用药组DC表面CD86、CD11C表达、刺激T细胞的增殖能力及对肿瘤细胞的杀伤活性均显著高于对照组，其中联合用药组升高最明显。小鼠体内荷瘤实验结果显示，IDO抑制剂组、抗PD-L1组和联合用药组肿瘤体积均明显缩小，其中联合用药组瘤体缩小最为显著；3组小鼠的脾脏指数较对照组均有所升高。结论 OSCC微环境中的VEGF通过刺激IDO和PD-L1的表达，抑制DC的成熟分化，使其向免疫耐受型DC转化，从而促进肿瘤局部免疫耐受微环境的形成。

目的 探讨不同年龄的阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome, OSAS)患者自主神经功能的变化特征。方法 选择158例OSAS患者，并按照不同年龄分别纳入青年组(<40岁，38例)、中年组(40～70岁，56例)、老年组(>70岁，64例)。选择同期住院且无OSAS的患者40例作为对照组。各组患者均进行2GSK2118436纯度4 h动态心电图监测，记录心率变异性(heart rate variability, HRV)时域指标，包括commensal microbiota昼夜正常RR间期标准差(SDNN_(Day)、SDNN_(Night))、昼夜连续5 min正常RR间期标准差(SDANN_(Day)、SDANN_(Night))、昼夜相邻RR间期差值均方根(rMSSD_(Day)、rMSSD_(Night)),以及HRV频域指标，包括昼夜低频功率(LF_(Day)、LF_(Night))、昼夜高频功率(HF_(Day)、HF_(Night))、昼夜低频功率与高频功率之比(LF_(Day)/HF_(Day)、LF_(Night)/HF_(Night))。结果 老年组的颈围及体重指数显著高于其他各组(P<0.05);青年组呼吸暂停低通气指数(apnea hypopnea index, AHI)显著高于对照组，中年组AHI显著高于对照组和青年组，老年组AHI显著高于其他各组(P<0.05);青年组、中年组和老年组SDNN_(Day)、SDNN_(Night)、SDANN_(Day)、SDANN_(Night)、LF_(Day)、LF_(Night)、HF_(Day)、LF_(Day)/HF_(Day)、LF_(Night)/HF_(Night)显著高于对照组，rMSSD_(Day)、rMSSD_(Night)、HF_(Night)显著低于对照组(P<0.05);中年组和老年组SDNN_(Day)、SDNN_(Night)、SDANNPF-6463922采购_(Day)、SDANN_(Night)、LF_(Day)、LF_(Night)、HF_(Day)、LF_(Day)/HF_(Day)、LF_(Night)/HF_(Night)显著高于青年组，rMSSD_(Day)、rMSSD_(Night)、HF_(Night)显著低于青年组(P<0.05);老年组LF_(Day)显著高于中年组，HF_(Night)显著低于中年组(P<0.05);中年组和老年组心律失常发生率显著高于青年组，老年组心律失常发生率显著高于中年组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示，OSAS患者年龄与SDNN_(Day)、SDNN_(Night)、SDANN_(Day)、SDANN_(Night)、LF_(Day)、LF_(Night)、HF_(Day)呈正相关，与rMSSD_(Day)、rMSSD_(Night)、HF_(Night)呈负相关。结论 随着年龄的增长，OSAS患者交感神经活性增高且迷走神经活性降低，交感神经与迷走神经之间的失衡现象更加明显。动态心电图监测HRV对心血管并发症的防治具有指导意义。

背景 骨桥蛋白(osteopontin,OPN)可参与低氧引起的血管重塑，使肺动脉压力升高。但OPN调控低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)自噬在低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)形成中的作用机制尚不明确。目的 探讨低氧条件下OPN对PASMCs增殖及通过PI3K/AKT/mTOR通路对PASMCs自噬的调控作用。方法 原代分NSC 119875核磁离PASMCs，采用免疫细胞化学法进行平滑肌细胞鉴定。将细胞分为常氧对照组(Normoxia)、低氧对照组(Hypoxia)、低氧+OPN干扰空病毒组(H+OPN EV)、低氧+OPN干扰慢病毒组(H+OPN shRNA)、低氧+PI3K抑制剂LY294002组(H+LY)。各组分别用EdU阳性标记率法检测细胞增殖能力；Western blot法检测各组PASMCs中的OPN、PI3K、AKT、mTOR及自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达；透射电镜、免疫荧光法观察各组PASMCs自噬情况。结果 与Normoxia组相比，Hypoxia组OPN、PI3K、AKT、mTOR、Beclin1、LC3B蛋白表达量升高(P<0.05)，细胞增殖能力增强(P<0.05)，自噬小体数量增多，LC3B、Beclin1红色荧光强度增强(P<0.05)。与Hypoxia组相比，H+OPN EV组各项Oncology (Target Therapy)指标无统计学差异(P>0.05)，而H+OPN shRNA组和H+LY组OPN、PI3K、AKT、m TOR蛋白表达量降低(P<0.05),Beclin1、LC3B蛋白表达量升高(P<0.05)，细胞增殖能力DS-3201浓度减弱(P<0.05)，自噬小体数量增多，LC3B、Beclin1红色荧光强度增强(P<0.05)。结论 在低氧条件下，OPN可促进PASMCs增殖并通过PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制PASMCs自噬。

背景:胃癌在全球范围内的发病率正逐年增加,是当下因癌症引发死亡的第三大病因。当前,手术被视为根治性治疗手段,但因早期胃癌缺少典型症状,致使早期诊断率低,故大多患者确诊时己属晚期,丧失最佳手术时机。此外,以铂类药物为代表的化疗是胃癌治疗的重要手段,可有效改善胃癌患者的生存期及生活质量;但化疗耐药是不可避免的临床难点,这是胃癌患者治疗和管理需面临的挑战。以免疫检查点阻断疗法为首的免疫治疗的出现为肿瘤治疗带来新的希望,其有效延长黑色素瘤、肺癌等患者生存期并改善预后;而在不同的癌种中,免疫治疗的临床反应率差异极大,限制其在肿瘤治疗中的广泛应用。近年来,PD-L1的表达已被证实是筛选患者响应免疫疗法的重selleck激酶抑制剂要生物标志。T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域1(TIM1)参与肺癌、脑胶质瘤、宫颈癌、肾透明细胞癌等肿瘤的进程,但TIM1是否参与调控胃癌的生物学行为、影响铂类化疗的敏感性、调节PD-L1的表达仍不清楚。目的:本研究探讨TIM1在胃癌临床样本中的表达及与临床病理特征的相关性,进一步探究TIM1对胃癌的恶性生物学行为(增殖、迁移、侵袭、凋亡及周期等)、铂类化疗的敏感性、PD-L1的表达的影响及潜在调控机制。方法:第一部分:借助GEPIA、TCGA和GEO(GSE62254)查询TIM1在胃癌中的表达及其预后,并以免疫组织化学(IHC)染色检测临床胃癌样本中TIM1的水平,阐述TIM1与临床病理特征的相关性。第二部分:q RT-PCR和WeCutimed® Sorbact®stern-blot(WB)检测胃上皮细胞及胃癌细胞系中TIM1的水平;CCK-8及平板克隆形成实验用于评价TIM1对胃癌细胞增殖的影响;细胞划痕及Transwell侵袭实验评价TIM1对胃癌细胞迁移和侵袭的作用;流式周期评价TIM1对胃癌细胞周期的影响;借助裸鼠皮下成瘤模型验证TIM1对体内GC细胞增殖的影响。第三部分:1流式细胞术检测TIM1对胃癌细胞凋亡的影响;流式细胞术及CCK-8检测TIM1调控胃癌细胞对铂类化疗敏感性的影响;WB检测TIM1对胃癌细胞中Bcl-2和Bax蛋白的影响;PLX-4720体外借助裸鼠化疗敏感性实验体内探究TIM1对铂类制剂敏感性的影响;2 q RT-PCR和流式检测胃上皮细胞、胃癌细胞及裸鼠皮下成瘤中PD-L1的表达;通过胃癌细胞及Jurkat T细胞构建T细胞介导的细胞杀伤试验评价TIM1对T细胞介导的胃癌细胞杀伤能力的影响;乳酸脱氢酶和CCK-8检测TIM1对胃癌细胞的毒性和活力的影响;3行转录组测序及生物信息学分析探讨TIM1对胃癌细胞调控的潜在机制,并进行WB实验验证。结果:第一部分:TIM1在胃癌中的表达和临床意义1访问GEPIA、TCGA和GEO(GSE62254)中胃癌队列,相较癌旁组织(对照组),胃癌组织中TIM1水平上调,相应的生存曲线均展示TIM1高表达的胃癌患者预后更差,而TIM1低表达的胃癌患者预后较好(p<0.0001);2 IHC染色检测胃癌及癌旁组织TIM1的表达,TIM1在胃癌中的阳性率为62.6%(57/91),而在癌旁组织的阳性率为17.5%(16/91),有统计学差异(p<0.05);胃癌标本中TIM1高表达46例,低表达45例,且TIM1高表达患者的生存预后较低表达者差(p<0.0001);3分析TIM1表达与临床病理特征相关性,TIM1表达高低与淋巴结转移(p<0.001)和TNM分期(p=0.013)相关,与性别、年龄、浸润层次、分化程度、家族史和肿瘤大小无关(p>0.05)。第二部分:敲低TIM1可抑制胃癌的恶性生物学行为1 q RT-PCR和WB检测发现,与GES-1细胞(胃上皮细胞)相比,胃癌细胞系中TIM1表达均增高;其中,MGC-803和MKN-45细胞中TIM1表达最高,故用于后续实验;2因TIM1在胃癌细胞中高表达,故构建2条敲低TIM1的质粒并命名sh1与sh2,以q RT-PCR和WB评估下调效率;结果为sh1和sh2可有效下调TIM1的m RNA及蛋白表达,即sh1和sh2均具有可靠的敲低效率并可用作后续实验;此外,在敲减效率最明显的sh2上过表达TIM1且命名sh2+TIM1~(RES)用于回复实验,q RT-PCR及WB均显示sh2+TIM1~(RES)可上调TIM1的表达;3与sh NC(对照)组相比,敲低TIM1(sh1和sh2)能有效阻滞MGC-803和MKN-45细胞的增殖、抑制克隆数目和体积、抑制细胞迁移及侵袭能力、增进G1期的细胞占比,而回复TIM1(sh2+TIM1~(RES))可促进MGC-803和MKN-45细胞的活力、增加克隆形成能力、提升细胞迁移与侵袭、削减G1期的细胞比例;4裸鼠皮下成瘤实验中,和sh NC组相比,敲低TIM1(sh2)组可延缓瘤体生长速率,而回复TIM1(sh2+TIM1~(RES))组的瘤体生长速率增快;另外,sh2组的瘤体HE和IHC染色数据亦展现细胞坏死减轻、Ki-67(增殖相关标志物)水平下调,而sh2+TIM1~(RES)组细胞坏死程度加剧、Ki-67表达水平增加。第三部分:敲低TIM1促进化疗敏感性、抑制PD-L1的表达及分子机制1 TIM1对铂类化疗敏感性的影响1.1检测MGC-803和MKN-45细胞的凋亡率,发现敲低TIM1(sh1和sh2)促进细胞凋亡,而sh2+TIM1~(RES)可延缓细胞凋亡;其中,MGC-803细胞的sh NC、sh1和sh2组凋亡率各自约为3.0%、9.5%和12.5%,但sh2+TIM1~(RES)组凋亡率降至5.7%;sh NC、sh1及sh2组在MKN-45细胞中的凋亡率约为5.1%、9.9%和13.1%,而sh2+TIM1~(RES)组凋亡率下调至8.0%;1.2检测铂类药物处理MGC-803和MKN-45细胞后的凋亡率,发现各组胃癌细胞凋亡的百分比随药物浓度的递增而上升;其中,sh1组和sh2组的细胞经铂类药物干预后细胞凋亡率增加尤为明显,而sh2+TIM1~(RES)组可减轻经铂类药物导致的凋亡;此外,CCK-8法发现,经铂类药物干预后,各组细胞活性均为浓度依赖性下降,sh1组和sh2组下降最显著,sh2+TIM1~(RES)组可逆转该下降趋势;1.3与sh NC组相比,sh1组和sh2组Bcl-2的表达下降,在sh2+TIM1~(RES)组中Bcl-2的表达量增加;此外,Bax在sh1组和sh2组的水平上升,在sh2+TIM1~(RES)组中Bax水平下调;1.4在裸鼠皮下成瘤实验中,与sh NC组相比,sh2组、顺铂组、奥沙利铂组、联合组1(sh2+顺铂)、联合组2(sh2+奥沙利铂)的瘤体生长均受抑制,其中联合组1和联合组2的下降趋势最为明显。2 TIM1对PD-L1的表达及T细胞介导的胃癌细胞杀伤能力影响2.1 q RT-PCR及流式细胞术数据显示,相较sh NC组,sh1组和sh2组PD-L1的表达被抑制,而sh2+TIM1~(RES)组PD-L1的表达上调;另外,裸鼠皮下瘤体的q RT-PCR及IHC染色结果中,sh2组PD-L1的表达下调,sh2+TIM1~(RES)组PD-L1的表达上升;2.2胃癌细胞和被激活的T细胞共培养后,结晶紫染色发现sh1组和sh2组胃癌细胞存活率较sh NC组明显下降,而sh2+TIM1~(RES)组中细胞存活率增加;乳酸脱氢酶活性检测发现sh1组和sh2组的细胞毒性较sh NC组明显增加,而sh2+TIM1~(RES)组的细胞毒性减弱;CCK-8检测细胞活力得出,相较sh NC组,sh1组和sh2组细胞活力下降明显,sh2+TIM1~(RES)组细胞活力上升,以上趋势均与T细胞数量呈正相关。3 TIM1对胃癌细胞调控的潜在机制3.1转录组测序及生物信息学提示,sh NC VS sh2的差异表达基因有1491个,其中928个基因上调,563个基因下调;KEGG富集分析中前10的信号通路依次为:MAPK信号通路、IL-17信号通路、细胞凋亡、C型凝集素受体信号通路、JAK-STAT信号通路、Fox O信号通路、癌症中的异常转录调控、c AMP信号通路、细胞衰老及Notch信号通路,其中,MAPK信号轴所占比例最大,差异最明显;3.2 WB实验检测MAPK信号轴的关键蛋白,各组间ERK、c-Jun和p38蛋白表达均无明显差异,sh1组和sh2组中p-ERK、p-c-Jun和p-p38的表达较sh NC组均下调,sh2+TIM1~(RES)组中p-ERK、p-c-Jun和p-p38的表达均增加。结论:1 TIM1在胃癌中高表达,其表达与胃癌患者的预后呈负相关;2敲低TIM1可抑制体内和体外胃癌的恶性生物学行为;3敲低TIM1可提升胃癌细胞对铂类化疗的敏感性;4敲低TIM1可抑制PD-L1的表达和增加T细胞介导的胃癌细胞杀伤能力;5 TIM1可能通过MAPK信号通路调控胃癌细胞。

目的 分析原发性高血压(EH)孕妇尿酸(UA)、可溶性Fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)水平变化及对子痫前期(PE)的风险评估价值。方Roxadustat体外法 选取新疆医科大学第一附属医院EH孕妇177例及同期健康孕妇177例。基于Logistic回归建立EH孕妇发生PE的列线图预测模型，决策曲线分析UA、sFlt-1水平评估EH孕妇PE发生风险的获益情况并验证。结果 孕12～16周、孕20～24周、孕28～32周、≥孕37周EH孕妇UA、sFlt-1水平均高于健康孕妇(P<0.05)。年龄≥35岁、初产、合并妊娠期糖尿病、子痫前期史、原发性高血压病程≥3年及UA、sFlt-1水平高是EH孕妇发生PE的独立危险因素(P<0.05)。年龄、初产、合并妊娠期糖尿病、子痫前期史、原发性高血压病程、UA、sFlt-1预测EH孕妇发生PE的一致性指数分别为0.581(95%CI为0.505～0.655)、0.528(95%Imidazole ketone erastin采购CI为0.452～0.604)、0.591(95%CI为0.514～0.Biodiesel Cryptococcus laurentii664)、0.542(95%CI为0.466～0.617)、0.552(95%CI为0.476～0.627)、0.723(95%CI为0.651～0.787)、0.769(95%CI为0.700～0.829);风险阈值为0.10～0.80时，UA、sFlt-1联合检测的净受益率大于单独检测。UA~+/sFlt-1~+患者PE发生率明显高于UA~+/sFlt-1~-、UA~-/sFlt-1~+、UA~-/sFlt-1~-(P<0.05)。结论 随孕周增加，EH孕妇UA、sFlt-1水平上升，二者高表达时EH孕妇发生PE的风险较高。

目的 探究分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)、微小RNA-126-5p在三阴乳腺癌组织中表达及与临床病理特征的关系。方法 选取2014年10月至2016年10月在沧州市人民医院接受手术切除治疗的三阴乳腺癌病人78例作为研究对象，取其癌组织及癌旁组织（距离肿瘤边缘5 cm），以SP免疫组化法检测SFRP4表达情况，以RT-qPCR分析法检测miR-126-5p水平。收集病人资料，分析SFRP4、miR-126-5p表达与三阴乳腺癌病人临床病理特征的关系。以Spearman等级相关性分析SFRP4、miR-126-5p表达的相关性。绘制K-M生存曲线分析病人生存状态，行Cox多因素分析影响三阴乳腺癌病人预后的因素。结果 三阴乳腺癌组织中SFRP4阳性率[53.85%(42/78)]明显高于癌旁组织[37.18%(29/78)](P<0.05),miR-126-5p表达0.78±0.21明显低于癌旁组织1.00±0.00(P<0.05)。对纳入病人进行临床病理特征分析，结果显示，SFRP4表达与淋巴结转移[78.13%(25/32)比36.96%(17/46)]、肿瘤浸润程度[65.12%(28/43)比22.86%(8/35)]、细胞增殖抗原Ki-67表达[83.33%(20/24)antibiotic selection比40.74%(22/54)]有关（P<0.05），而与年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学分级无关（P>0.05）。miR-126-5p与淋巴结转移[81.25%(26/32)比30.43%(14/46)]、Ki-67表达[70.83%(17/24)比42.59%(23/54)]有关（P<0.05），而与年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学分级及肿瘤浸润程度无关（P>0.05）。行Spearson相关性分析，结果显示，SFRP4、miR-126-5p在三阴乳腺癌组织中具有相关性（P<0.05）。对病人进行为期5年的随访，生存63例，死亡15例。miR-126-5p低表达组病人生存28例，死亡12例，miR-126-5p高表达组生存35例，死亡3例，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;SFRP4阳性组病人生存29例，死亡13例；SFRP4阴性组病人生存34例，死亡2例，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。行多因素Cox分析，结GSKJ4供应商果显示，有淋巴结转移、Ki-67阳性、miR-126-5p低表达、SFRP4阳性为影响三阴乳腺癌病人预后的独立危险因素（P<0.05）。结CHIR-99021分子量论 三阴乳腺癌组织中miR-126-5p呈低表达，SFRP4阳性率高，两者表达具有相关性，可作为预测三阴乳腺癌病人预后的重要指标。

目的 探讨四次跨膜蛋白1(Tspan1)过表达对奥沙利铂（OXA）诱导的人结直肠癌细胞系HCTCB-839临床试验116细胞凋亡的影响并分析其可能作用机制。方法 将Tspan1过表达质粒及其阴性对照空载质粒分别转染至HCT116细胞中，q RT-PCR和Western blot法检测胞中Tspan1 m RNA及其蛋白表达水平。采用14.15μg/mL OXA或联合5 mmol/L自噬抑制剂3-MA干预转染后HCT116细胞，MTT检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡水平；免疫荧光检测细胞中LC-3B蛋白表达情况；Western blot法检测细胞中自噬相关蛋白LC-3、Beclin1和p62蛋白表达水平。结果 Tspan1过表达可显著上调HCT116细胞中Tspan1mRNA和蛋白表达水平，降低HCT116细胞对OXA的敏感性，抑制OXA诱导的HCT116细胞凋亡，并增强细胞中LC3B蛋白荧光强度，上调细胞中LC-3II/LC-3I比值及Beclin1蛋白表达水平，下调p62蛋白表达水平。然而，联合3-MA处理可逆转Tspan1过表达对OXA诱导HCT116细胞凋亡的抑制作用，提高细胞对OXA的敏感性。结论 Tspan1过表达可拮抗OXA诱导的HCT116细胞凋亡，其机制可能是通bio-responsive fluorescence过诱selleck导细胞自噬来实现的。

目的：观察细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在舌鳞癌中的表达及SAHA与临床病理特征和预后的关系，探讨体外沉默Cdc42基因对舌鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化（EMT）的影响及作用机制。方法：通过免疫组织化学法检测Cdc42基因在舌鳞癌及癌旁组织中的表达，分析Cdc42表达与舌鳞癌临床病理学参数的相关性及对预后的影响。将人舌鳞状细胞癌CAL27和SCC-4细胞随机分为3组，分别为Cdc42-siRNA组、阴性对照组和空白对照组。设计并构建针对人Cdc42基因序列的3条小干扰RNA (siRNA)，应用脂质体介导转染方法分别将Cdc42-siRNA和NCsiRNA转染至Cdc42-siRNA组和阴性对照组，空白对照组仅加入转染试剂。通过实时荧光定量反转录PCR(qRTPCR)和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞Cdc42的mRNA及蛋白表达，将沉默效率最高的Cdc42-siRNA转染组作为后续实验组。Western blot检测EMT及MAPK JNK/p38通路相关蛋白的表达，CCK-8、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测各组细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果：Cdc42在44例舌鳞癌患者中的阳性表达率为70.5%(31/44)，在癌旁组织中的阳性率为38.6%(17/44），差异具有统计学意义（P<0.05）。Cdc42表达与不同颈淋巴结转移、临床分期、浸润深度相关（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，Cdc42阳性表达的舌鳞癌患者预后与阴性表达患者无显著差异（P>0.05）。体外实验中，Cdc42-siRNA组细胞Cdc42 mRNA和蛋白表达显著下降（此网站P<0.05）,EMT相关蛋白间叶标志物N-cadherin、Vimentin表达显著降低（P<0.05）,MMP-9表达显著降低（P<0.05），而上皮标记物E-cadherin相对表达量显著增加（P<0.05）;MAPK JNK/p38通路相关蛋白p38-MAPK和JNK蛋白相对表达量差异无统计学意义（P>0.05），而recent infectionp-p38-MAPK、p-JNK蛋白表达水平显著下降（P<0.05）,Cdc42-siRNA组细胞增殖、侵袭和迁移能力显著下降（P<0.05）。结论：舌鳞癌患者中Cdc42表达增加，并且其表达与颈淋巴结转移、临床分期及浸润深度相关。沉默Cdc42可能通过阻断MAPK JNK/p38通路抑制舌鳞癌细胞EMT过程，进而抑制侵袭迁移，同时可负向调节舌鳞癌细胞增殖。