Author: admin

研究背景胃癌是最常见的胃肠道恶性肿瘤之一,幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染是胃癌的重要致病因素。mRNA发生N4-乙酰胞苷(ac4C)修饰可调节mRNA稳定性和翻译效率。新近研究显示mRNA ac4C修饰异常与肿瘤发生发展有关。然而幽门螺杆菌是否通过调控mRNA ac4C修饰介导胃癌发生报道甚少。因此,研究mRNA ac4C修饰在幽门螺杆菌介导的胃癌发生发展的作用有重要意义。研究目的本研究旨在探究mRNAac4C修饰异常在幽门螺杆菌介导胃癌发生发展中的作用及机制,寻找胃癌诊断和治疗新靶点,阐明幽门螺杆菌感染上调NAT10表达,介导GNA13 mRNA发生ac4C修饰,促进胃癌发生发展的具体分子机制。研究方法免疫组化和TCGA数据库评估胃癌NAT10表达水平与临床信息的相关性。qRT-PCR检测胃癌组织及其癌旁组织中NAT10表达水平。细胞功能实验检测NAT10与幽门螺杆菌感染对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。qRT-PCR和western blot检测幽门螺杆菌感染胃癌细胞对NAT10表达的影响,及幽门螺杆菌感染同时敲低NAT10后的回复实验。裸鼠皮下成瘤和尾静脉转移探究NAT10在体内对肿瘤生长和转移的影响。利用acRIP-seq、RIP和RNA稳定性实验等确定在胃癌中NAT10通过调控GNA13 mRNA ac4C修饰调控其表达。细胞功能实验检测GNA13对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响,以及过此网站表达NAT10同时敲低GNA13后功能回复实验。实验结果1.NAT10在胃癌组织中高表达且与患者预后不良相关TCGA数据库、免疫组织化学染色和qRT-PCR结果显示NAT10在胃癌组织中高表达,且NAT10高表达与胃癌患者预后不良相关。2.敲低NAT10抑制胃癌细胞增殖和迁移CCK8、EdU、克隆形成和Transwell实验表明敲低NAT10抑制胃癌细胞增殖和迁移,过表达NAT10促进胃癌细胞增殖和迁移。3.敲低NAT10在体内抑制肿瘤生长和转移裸鼠皮下成瘤和尾静脉注射结果表明稳定敲低NAT10抑制肿瘤生长和转移。4.幽门螺杆菌感染胃癌细胞可引起NAT10高表达使用幽门螺杆菌标准菌株Hp26695和Hp11637以浓度和时间梯度感染胃癌细胞MKN-45和MGC-803,NAT10的mRNA和蛋白水平均升高,说明存在菌株感染浓度依赖性和时间依赖性。5.幽门螺杆菌通过调控NAT10促进胃癌细胞增殖和迁移幽门螺杆菌感染促进胃癌细胞增殖和迁移,同时敲低NAT10会抑制幽门螺杆菌感染引起的胃癌细胞增殖和迁移能力的升高。6.NAT10调控GNA13 mRNA乙酰化修饰通过acRIP-seq分析胃癌细胞敲低NAT10组和对照组中mRNA的ac4C修饰变化,筛选出候选分子GNA13,通过acRIP-qPCR和RIP-qRCP确定NAT10可biofortified eggs以调控GNA13 mRNA ac4C修饰,敲低NAT10后GNA13表达水平下调,说明NAT10通过调控GNA13 mRNA ac4C修饰水平从而调控GNA13表达。7.敲低GNA13抑制胃癌细胞增殖和迁移,NAT10通过调控GNA13发挥促进胃癌细胞增殖和迁移的作用EdU、克隆形成和Transwell实验显示敲低GNA13抑制胃癌细胞的增殖和迁移,敲低GNA13部分回复NAT10过表达引起胃癌细胞增殖和迁移能力的增强。8.NAT10调控GNA13激活RhoA\β-catenin通路促进胃癌细胞增殖和迁移通过String网站与KEGG通路分析发现GNA13可以结合Rho-GEF从而调控RhoA/β-catenin发挥促癌作用。Western blot验证敲低GNA13可下调RhoA和β-catenin表达。敲低NAT10也会下调GNA13、RhoA和β-catenin的表达。实验结论NAT10在胃癌组织中高表达且与胃癌患者预后不良相关。NAT10高表达在体内和体外促进胃癌细胞增殖和迁移。幽门螺杆菌感染胃癌细胞可上调NAT10表达。NAT10通过调控GNA13 mRNA的ac4C修饰,从而调控GNA13的表达。NAT10通过调控GNA13激活RhoA\β-catenin通路从而促进胃癌的发生发展。我们的研究揭示了 mRNA乙酰化修饰在幽门螺杆菌介导胃癌发生中的作用机制,为胃癌的干预和治疗提供GW-572016试剂了新的潜在的分子靶点。

目的 研究依托咪酯对四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用及相关机制。方法 将48只SPF级Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、依托咪酯0.5 mg/kg组、依托咪酯1 mg/kg组、依托咪酯2 mg/kg组、水飞蓟素（SIL）组（200 mg/kg，阳性对照），每组6只。对照组和模型组静脉注射生理盐水0.2 mL，依托咪酯给药组分别静脉注射0.5 mg/kg、1 mg/kg、2 mg/kg依托咪酯0.2 mL,SIL组静脉注射200 mg/kg SIL 0.2 mL，每天1次，连续给药14 d，然后模型组、依托咪酯给药组和SIL组腹腔注射0.2%CCl4(10 mL/kg)，对照组腹腔注射等量橄榄油，24 h后处死大鼠。测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平；HE染色评估肝组织病理损伤；ELISA检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平；检测超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平；TUNELProtein Biochemistry染色评估肝组织中细胞凋亡情况；免疫组化检测大鼠肝组织中NF-κB p65阳性表达；Western blot检测相关蛋白的表达。结果 与对照组相比，模型组大鼠血清ALT和AST水平明显升高，肝组织病理损伤明显，TNF-α、IL-6、MDA水平显著升高，SOD水平显著降低，肝组织细胞凋亡数量明显增加，Bax/Bcl-2、cleaved caspase-3/caspase-3及p-NF-κB p65/NF-κB p6点击此处5明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比，依托咪酯1 mg/kg组、依托咪酯2 mg/kg组、SIL组肝组织病理损伤明显改善，炎症因子diABZI STING agonist抑制剂释放、氧化应激和肝组织细胞凋亡得到抑制，p-NF-κB p65/NF-κB p65降低。结论 依托咪酯对CCl4诱导的大鼠急性肝损伤具有较好的缓解作用，其机制可能与抑制NF-κB通路有关。

小胶质细胞作为中枢神经系统固有的免疫细胞，在阿尔茨海默症（AD）中发挥免疫应答功能，一方面吞噬清除异常蛋白及凋亡神经元，避免损伤进一步扩大，另一方面诱导慢性神经炎症，进一步加剧病理损伤。以往的研究认为小胶质细胞激活后的功能变化是AD病理所引起的，然而近年来基因组学的发现打破这一认知。unmet medical needs大规模全基因组关联分析（GWAS）和全基因组/外selleckchem GDC-0068显子测序研究已经明确了70余个AD风险位点。在这些风险基因座中，大部分基因变体参与编码小胶质细胞功能相关分子或影响小胶质细胞功能基因的转录活性。功能及通路分析发现上述风险位点主要Caspase抑制剂富集在调控小胶质细胞吞噬功能、脂质代谢和免疫应答等功能的信号通路上，提示小胶质细胞不仅作为对AD病理的“应答者”，同时也是AD病理发生的“参与者”。对上述易感基因的深入研究有助于进一步拓展小胶质细胞在AD的调控机制与功能谱。现基于遗传学研究对目前发现的小胶质细胞相关AD易感基因及其调节机制进行综述。

该研究旨在通过建立三维定量构效关系（3-dimensional-quantitative structure-activity relationship,3D-QSAR）模型，探究1,4-二氢吡啶（1,4-dihydropyridines,1,4-DHPs）结构与急性毒性之间的构效关系以及引起急性毒性变化的可能机制。将11种1,4-DHPs三维结构和半数致死量（lethal dose,50%,LD50）值进行相应处理后，分别采用比较分子力场分析（comparative molecular field analysis,CoMFA）和比较分子相似性指数分析（comparative molecular similarity index analysis,CoMSselleck合成IA）构建3D-QSARBarasertib溶解度模型；随后进行3D-QSAR模型内外部验证和应用域确定。结果显示：（1）CoMFA和CoMSIA模型的交叉验证系数（q~2）分别为0.509和0.521，非交叉验证系数（R~2）分别为0.988和0.989，对急性毒性的预测与试验相符合；（2）1,4-DHPs急性毒性变化主要受立体场、静电场、疏水场和氢键受体场影响，表现为在1,4-DHChromatography Search ToolPs的吡啶3号位取代基上施加4种分子场，在吡啶5号位取代基上施加立体场和氢键受体场，在苯环取代基上施加立体场、静电场和疏水场均可影响1,4-DHPs的急性毒性变化。因此，该研究建立出具有较高预测能力的1,4-DHPs急性毒性3D-QSAR模型，不仅能为预测1,4-DHPs急性毒性提供技术支持，也可为新型1,4-DHPs类钙通道阻滞剂的设计提供思路。

目的SBE-β-CD体内实验剂量 探讨血清胱抑素C与子痫前期子代出生体重的相关性。方法 回顾性纳入2019年1月至2021年12月在福州市第一医院住院的规范产检并诊断子痫前期的孕妇为子aromatic amino acid biosynthesis痫前期组，同期就诊的正常妊娠孕妇作为对照组。采用Pearson相关分析和线性回归分析确定不同孕周血清胱抑素C与子痫前期子代出生体重的相关性。结果 共纳入24例子痫前期孕妇和19Laduviglusib IC500例正常妊娠孕妇。子痫前期组孕妇在孕12、26和38周三个不同时期的血清胱抑素C显著高于对照组，且子痫前期组孕妇的新生儿出生体重明显低于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。Pearson相关分析显示，孕26和38周孕妇血清胱抑素C与出生体重呈负相关（r=-0.605、-0.426,P <0.05）。线性回归分析显示，孕26周（β=-0.17,95%CI:-850.61～-97.47,P=0.01）和孕38周（β=-0.18,95%CI:-667.05～-55.07,P=0.02）血清胱抑素C与出生体重呈独立负相关。结论 血清胱抑素C可能影响子痫前期子代出生体重。

目的:本研究以京大戟醇提物为示例药物,以佐剂性关节炎大鼠和正常大鼠为研究对象探讨京大戟对佐剂性关节炎模型大鼠和正常大鼠的疗效及毒性;运用网络药理学方法预测京大戟95%乙醇提取物抗类风湿关节炎的作用靶点及信号通路;并通过动物实验对与类风湿关节炎相关核心靶点进行验证;利用16Sr DNA高通量测序分析京大戟对佐剂性关节炎模型动物肠道菌群变化的影响,为其临床安全合理应用和进一步研究开发提供科学依据。方法:1.采用网络药理学方法,收集京大戟95%醇提物有效成分并筛选相应的作用靶点,搜寻与RA疾病相关的靶点,构建“药物-有效成分-作用靶点”网络,基于PPI数据库构建京大戟成分靶点疾病相关靶点之间的网络,并根据节点的2倍中位数筛选关键靶点,采用Metascape平台分析靶点关联的主要GO与KEGG,分别进行通路富集分析,利用分子对接软件将与疾病相关的前10位核心靶点与对应的前10位化学成分进行分子对接。2.按照随机数字法将54只健康SD雄性大鼠分为6组,分别为空白组、模型组(adjuvant-induced arthritis,AA)、阳性雷公藤多苷片组(9mg/kg)、模型给药高剂量组(360.4mg/kg)、模型给药中剂量组(180.2mg/kg)、模型给药低剂量组(90.1mg/kg)。适应性饲养七天,复制大鼠佐剂性关节炎模型,连续治疗给药4周,观察模型给药各组大鼠足跖肿胀度,ELISA法检测血清中有关指标的影响,并进行足趾滑膜组织病理学检查。3.SD大鼠81只,分为9组,分别为正常组、模型组、阳性组(9mg/kg)、模型给药高、中、低剂量组(360.4mg/kg、180.2mg/kg、90.1mg/kg)、正常给药高、中、低剂量组(360.4mg/kg、180.2mg/kg、90.1mg/kg),除正常和模型组给予相应药物,观察并对比京大戟对模型给药组与正常给药组给药4周后毒性特点及毒性靶器官。4.肠道菌群分析:实验结束后收集大鼠粪便,以16S r RNA 341F-806R区进行测序。探讨京大戟对类风湿关节炎(AA)大鼠肠道菌群的影响。结果:1.网络药理学实验结果显示,从京大戟中筛选得到的25个活性成分,进而得到376个成分靶点,疾病数据库搜索到5017个类风湿关节炎疾病靶点,成分-疾病靶点取交集后229个。化合物-交集靶点拓扑分析得知7,4’一二羟基二氢黄酮(degree=73)、芹菜素(degree=71)、山柰酚(degree=66)、鼠李素(degree=66)、槲皮素(degree=65)、邻苯二甲酸二丁酯(degree=61)、7-羟基香豆素(degree=46)、鞣花酸(degree=41)、大戟醇(degree=39)、甘遂甾醇(degree=38)在网络中占主导地位。PPI网络拓扑分析结果显示,TNF、AKT1、SRC、EGFR、MMP9、ERBB2等43个靶蛋白为较为核心蛋白。交集靶点涉及1944个生物学过程,200条KEGG通路(p<0.01),京大戟主要通过调控癌症的通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路、T细胞受体等信号通路来达到治疗RA效果。2.京大戟醇提物对AA大鼠治疗作用研究结果显示:(1)足趾的肿胀度:与正常组相比,大鼠造模组均足肿胀度显著升高(p<0.01),与模型组相比各治疗组均呈现不同程度的消肿作用(p<0.05),其中高剂量组消肿效果最好,且效果呈剂量相关性。(2)酶联免疫测定结果:与正常组比较:模型组RF、TNF-α、CD4、CD25、IL-2、MMP-9、IFN-γ显著升高(p<0.05或p<0.01),CD8、IL-10、TGTofacitinib使用方法F-β降低(p<0.05或p<0.01)。与模型组相比各治疗组RF、TNF-α、CD4、CD25、MMP-9、IFN-γ均降低(p<0.05或p<0.01)、IL-10、TGF-β升高(pTotal knee arthroplasty infection<0.05),京大戟中、低剂量组IL-2降低(p<0.05),高、中、低、剂量组CD8升高(p<0.05)。(3)HE滑膜病理结果:正常组滑膜细胞单层排列、无增生,未发现炎性细胞;模型组踝关节滑膜组织增生,有大量炎细胞浸润且关节腔内有炎性渗出,骨量严重流失;经治疗后滑膜细胞增值情况明显好于模型组,炎性细胞浸润、软骨侵蚀、滑膜增生及血管翳形成等病变均有不同程度的好转。3.京大戟醇提物的毒性作用研究结果显示:(1)对生化指标的影响:与正常组比较,模型给药高、正常给药各剂量组AST升高(p<0.01或p<0.05);正常给药各剂量组ALT升高(p<0.01或p<0.05);正常给药中剂量组UREAL升高(p<0.05);模型给药高剂量组CREP升高(p<0.05)。(2)对脏器指数的影响:与正常组比较,正常给药各组心、肝脏指数升高(p<0.01或p<0.05);阳性组肺脏指数升高(p<0.05);阳性组、模型给药低剂量组、正常给药各组肾脏指数升高(p<0.01或p<0.05);模型组脾脏指数降低(p<0.05),与模型组比较,模型给药中、低剂量组脾脏指数升高(p<0.01或p<0.05)。4.16sr DNA高通量测序结果:与正常组比较,模型组差异菌为芽孢杆菌目、放线菌目、耐盐咸海鲜球菌、葡萄球菌科、巴斯德氏菌目、巴氏杆菌科、嗜粘蛋白-阿克曼氏菌、疣微菌目、疣微菌门、疣微菌科、奇异菌属、丁酸弧菌属、嗜血杆菌属等13个差异菌,而给药组差异菌有苏黎世杆菌目、苏黎世杆菌属、苏黎世杆菌科、棒状杆菌属、棒状杆菌科、气球菌科、费克蓝姆菌属、奈瑟Y-27632 IC50氏菌科、奈瑟菌属、奈瑟菌目、颤杆菌克属、动球菌科、芽孢八叠球菌属、毛绒厌氧杆菌属等14个差异菌。结论:京大戟醇提物能明显改善AA大鼠足趾肿胀度和滑膜病理改变,调节AA大鼠血清中TNF-a、RF、IL-2、MMP-9、CD4、CD8、CD25、TGF-β、IFN-γ、IL-10等细胞因子的水平,故京大戟对佐剂性关节炎大鼠具有明显的治疗作用;其机制可能通过7,4’一二羟基二氢黄酮、芹菜素、山柰酚、鼠李素、槲皮素、邻苯二甲酸二丁酯、7-羟基香豆素、鞣花酸、大戟醇、甘遂甾醇等25个活性成分作用到TNF、AKT1、SRC、EGFR、MMP9、ERBB2等43个靶蛋白通过癌症通路、MAPK、PI3K-Akt、T细胞受体、TNF等核心通路直接起到作用或作用机制可能为苏黎世杆菌目、苏黎世杆菌属、苏黎世杆菌科、棒状杆菌属、棒状杆菌科、气球菌科、费克蓝姆菌属、奈瑟氏菌科、奈瑟菌属、奈瑟菌目、颤杆菌克属、动球菌科、芽孢八叠球菌属、毛绒厌氧杆菌属等14个差异菌来回调肠道细菌活性来调节AA大鼠体内类风湿因子RF,炎症细胞因子TNF-a、IL-2,T细胞相关因子CD4、CD8、CD25,B细胞相关因子TGF-β、IFN-γ、IL-10等的含量进而发挥抗RA作用,缓解大鼠足趾肿胀度及滑膜病理改变。京大戟毒性靶器官为肝、肾,且正常状态下给药毒性大于病症状态下给药。

目的 探讨地塞米松联合丙泊酚MLN4924麻醉对单肺通气（OLV）患者缺血再灌注肺损伤、氧化应激水平及炎性因子水平的影响。方法 选取江苏省扬州市第一人民医院2021年1月至2022年10月行麻醉术的OLV患者92例，按随机数字表法分为对照组（丙泊酚麻醉）和观察组（地塞米松联合丙泊酚麻醉），各46例。结果 两组患者OLV、手术及机械通气时间比较无显著差异（P> 0.05）。OLV后，两组患者的动脉血氧分压（PaO2）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）显著低于OLV前，但观察组均显著高于对照组（P <0.05）；动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、丙二醛（MDA）、血清Clara细胞分泌蛋白-16(CC16)及表面活性蛋白（SP-D）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素10(IL-10)水平均显著高于OLV前，但观察组均显著低于对照组（P <0.05）。观察组和对照组患者并发症发生率相当（4.35%比10.87%,P> 0.05）。结论 地塞米松联合丙泊酚麻醉可减轻OLV患者更多的氧化应激反应，抑制炎性反应，减少肺损伤lung immune cells，且安全性良好。

目的：探讨依达拉奉右莰醇治疗急性进展性大动脉粥样硬化（LAA）型脑梗死的临床效果。方法：回顾性选取2021年11月—2023年4月蚌埠医学院第二附属医院收治的100例急性进展性LAA型脑梗死患者的临床资料。根据治疗方案的不同将其分为对照组（n=50）和观察组（n=50）。对照组给予常规治疗，观察组在对照组基础上给予依达拉奉右莰醇治疗。比较两组治疗前后氧化应激指标、炎症因子、神经功能和预后情Bacterial cell biology况及不良反应。结果：治疗后，观察组谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平高于对照组，活性氧簇（ROS）水平显著低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05BAY 73-4506说明书）。治疗后，观察组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平均显著低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后3个月，两组美国国立卫生研究院卒中量表Naporafenib使用方法（NIHSS）评分、改良Rankin量表（mRS）评分均降低，观察组NIHSS评分、mRS评分均显著低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：依达拉奉右莰醇应用于急性进展性LAA型脑梗死患者的治疗中，能够有效抑制氧化应激反应和炎症反应，促进受损神经功能修复，改善预后，不会增加不良反应的发生。

目的：探讨黄芪-山楂预防给药对于多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）大鼠卵巢生殖功能的的影响及炎性作用机制。方法：将50只21日龄雌性大鼠随机按10只一组分为5组，分别为正常组、模型组、黄芪组、山楂组、黄芪-山Medicina perioperatoria楂组。除正常组外，其余各组均喂食高脂饲料来造模。各给药组在造模期间分别以黄芪、山楂、黄芪-山楂水溶液灌胃，持续干预15周。CX-5461第8周开始镜下观察各组大鼠动情周期并计算紊乱占比；HE染色法观察卵巢的组织变化；采用ELISA测定大鼠血清中性激素、促炎因子和抗炎因子的水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠出现动情周期紊乱占比升高（P<0.01）；卵巢组织多囊改变，可见较少数量的黄体和具有许多滤泡卵巢囊肿的窦卵泡；促黄体生成素/卵泡刺激素（LH/FSH）、睾酮（T）、白介素6(IL-6)、白介素17A(IL-17A)、肿瘤坏死因子（TNF-α）水平显著升高；白介素10(IL-10)水平显著降低（P<0.05Wnt-C59化学结构）。与模型组比较，黄芪-山楂组大鼠出现动情周期紊乱占比降低（P<0.01）；卵巢组织中的囊性卵泡数减少，成熟卵泡和黄体数增多；黄芪组、山楂组、黄芪-山楂组LH/FSH、T、IL-6,IL-17A水平显著降低；黄芪组、黄芪-山楂组TNF-α水平显著降低；山楂组、黄芪-山楂组IL-10水平显著升高（P<0.05）。与黄芪组比较，黄芪-山楂组T水平显著降低；IL-10水平显著上升（P<0.05）。与山楂组比较，黄芪-山楂组T、IL-17A水平显著降低（P<0.05）。结论：黄芪-山楂预防给药可以改善PCOS大鼠的卵巢生殖功能，其作用机制可能与降低促炎因子IL-6、IL-17A、TNF-α水平，提高抗炎因子IL-10水平，减轻炎症状态有关。

目的 分析青少年抑郁症患者非自杀性自伤（medium vessel occlusionNSSI）行为的影响因素。方法 选取2019年4月—2021年4月某院收治的90例青少年抑郁症患者作为研究对象，根据是否存在NSSI行为分为NSSI组（57例）和无NSSI组（33例），比较两组患者的抑郁状态、合并焦虑状态、既往负性生活事件、冲动感情况，并采用单因素及多因素logistic回归分析患者发生NSSI的影响因素。结果 单因素分析发现，年龄、合并焦虑、负性生活事件、冲动感、抑郁程度与青少年抑郁症患者发生NSSI行为有关（P<0.05）。多因素logistic回归分析结果显示，合并焦虑、负性生活事件、重度抑郁是青少年抑郁症患者发Caspase抑制剂生BYL719化学结构NSSI行为的独立危险因素（P<0.05）。结论 在临床治疗中应更加注重青少年抑郁症患者的情绪变化，并适时采取正向心理干预，以促进青少年患者的心理健康。