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背景：纳米复合水凝胶在骨关节炎治疗中有很大的EUS-FNB EUS-guided fine-needle biopsy研究前景和应用潜力。目的：综述纳米复合水凝胶在骨关节炎及软骨修复中的研究进展。方法：检索中国知网和PubMed等数据库，英文检索词为“nanocomposite hydrogel,nanogel,获悉更多osteoarthritis,cartilage,physical encapsulation,electrostatic interaction,covalent crosslinking”，中文检索词为“纳米复合水凝胶，纳米水凝Y-27632体内实验剂量胶，骨关节炎，软骨，物理包覆，物理包载，静电作用，共价交联”。根据纳入与排除标准对所有文章进行初筛后，保留相关性较高的71篇文章进行综述。结果与结论：在细胞或动物实验中，纳米复合水凝胶具有改善骨关节炎的效果。纳米复合水凝胶可以从改善关节间力学环境、搭载靶向药物、促进种子细胞软骨化等方面加速软骨修复，改善骨关节炎症内环境，达到治疗骨关节炎的目的。目前纳米复合水凝胶在骨关节炎疾病中的研究仍有巨大的发挥空间，继续深入材料制备研究，积极开展细胞、动物实验将有望为临床治疗骨关节炎开辟新途径。

近年来全球各地新冠、猴痘、流感等疫情频发，新增各类肿瘤患者数量呈不断上升趋势，传统药物对新发突发传染病、肿瘤、自身免疫病等的作用有限。随着杂交瘤技术的出现，单克隆抗体的应用日趋广泛，抗体药物在现代医学中发挥着越来越重要的作用。单克隆抗体经历了鼠源抗体、人鼠嵌合抗体、人源化抗体到全人源抗体的发展阶段，其免疫原性逐渐下降，用于人体的安全性逐渐上升。全人源抗体由于其序列均来自于人源，不会产生人抗鼠抗体反应，成为目前最安全的抗体形式。随着基因工程技术的发展，流式细胞术结合单个B细胞基因扩增技术使全人源单克隆抗体的构建和筛选更为容易，抗体药物的发展迎来新一波高潮，单克隆抗体药物的市场将会进一步扩展。本文综述了单克隆抗体的研究进展以及截至2023年10月1日美国食品药品监督管理局(Food and Drmedical birth registryug AdministAlpelisib半抑制浓度ration， FDA)批准的163种单抗药物，为国内单克隆抗E-616452使用方法体的研发及生产提供新的思路。

旨在研究鸭绿江流域(丹东段)细鳞鱼野生群体与养殖群体的遗传多样性，并探究其种质资源情况。基于细鳞鱼线粒体DNACytb基因和D-loop区序列，对宽甸(KD)和丹东江域(DD)2个野生细鳞鱼群体和1个养殖群体的遗传结构与遗传多样性等进行比较研究。结果表明：Cytb基因1 141 bp, A+T含量53.55%,G+Panobinostat生产商C含量46.45%,D-loop区序列988 bp, A+T含量62.75%,G+C含量37.25%;基于Cytb和D-loop序列在90个样本中分别检测到42和56个多态性位点，定义了21和26种单倍型，其中KD、DD和YZ群体Cytb基因的单倍型数分别为14、10和7,KD、DD和YZ群体D-loop区单倍型数分别为16、15和10;遗传多样性分析Cytb基因表现出高单倍型多样性(0.986)和低核苷酸多样性(0.004 66),而D-loop区表现出高单倍型多样性(0.981)和高水平的核苷酸多样性(0.019 82),基于Cytb基因和D-loop区序列KD和DD群体分别具有4个和2个相同单倍型，说明2个细鳞鱼野生群体间的分化程度较小，而养殖群体与野生群体间遗传分化为中度；分子方差分析(AMOVA)发现群体内部的遗传变异mycorrhizal symbiosis(Cytb:73.38%;D-loop:85.91%)占比明显高于群体间的遗传变异(Cytb:26.62%;D-CP-456773试剂loop:14.09%),表明鸭绿江流域(丹东段)细鳞鱼群体遗传变异主要来源于群体内，不同地理群体间的遗传变异不大；群体单倍型系统发育树表明，KD、DD和YZ群体间互有交叉，均未表现出明显的地理聚集，3个群体间尚未出现明显的地理谱系结构，结果与遗传多样性研究一致。Tajima’s D和Fu and Li’s中性检验显著偏离中性，推测细鳞鱼KD和DD群体可能经历过群体扩张事件，随后处于相对平衡稳定状态。

目的·研究磷酸核糖焦磷酸合成酶1 (phosphoribosyl pyrophosphate synthetase 1,PRPS1) I72位点突变是否能使急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia, ALL）细胞对巯嘌呤类化学治疗（化疗）药物6-巯基嘌呤（6-mercaptopurine,6-MP）、6-硫代鸟嘌呤（6-thioguanine,6-TG）产生耐药性，并解释其作用机制。方法·将临床上已发现的PRPS1基因的各突变（I72F、R177S、V316L）和2个ALL细胞系（KOPN72bi和RS4;11）中存在的PRPS1基因突变（V208A、V289A）分别插入融合了绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的载体pGV303中，用已证明的对巯嘌呤类化疗药耐药的PRPS1 A190T突变为阳性对照，对该类药不耐药的空载体pGV303 (Vector)、PRPS1野生型（wild type,WT）及PRPS1 I72V突变为阴性对照。将上述构建好的载Hepatitis A体瞬时转染入HEK-293T细胞（简称293T细胞）中，并采用蛋白质印迹法（Western blotting）检测PRPS1各突变体在293T细胞中的蛋白表达情况。采用药物敏感性实验检测并计算6-MP或6-TG对上述瞬转PRPS1各突变体的293T细胞的半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC_(50)）。随后，除PRPS1 I72F和I72V之外，将第72位异亮氨酸（isoleucine,I）变成其他氨基酸的多个突变即I72M、I72L、I72N、I72S、I72T分别插入载体pGV303中，瞬时转染入293T细胞后采用Western blotting、药物敏感性实验检测各突变体在293T细胞中的蛋白表达情况以及6-MP或6-TG的IC_(50)。采用慢病毒感染法将PRPS1 WT、I72F、I72V、A190T及载体pGV303感染REH细胞系，通过流式细胞术分选GFP阳性细胞以获得PRPS1各突变体稳定表达的IACS-010759浓度细胞，并采用Western blotting及药物敏感性实验检测各突变体在REH细胞中的蛋白表达情况以及6-MP或6-TG的IC_(50)，用以验证293T细胞获得的药物敏感性实验结果。采用AnnexinⅤ/DAPI双染法评估各REH细胞系的凋亡情况，并通过Western blotting检测各REH细胞系的DNA损伤相关蛋白[S139位点磷酸化的组蛋白H2AX (phosphorylated H2AX-S139,γ-H2AX)、磷酸化的细胞周期检验点激酶2(phosphorylated check point kinase 2,pCHK2)]和细胞凋亡相关蛋白聚（腺苷二磷酸核糖）聚合酶剪切体[cleaved poly(ADP-ribose) polymerase,cleaved PARP]的表达水平。使用PDB数据库（Protein Data Bank）中编号为2HCR (PDB code2HCR)的PRPS1晶体结构图，通过三维成像及PyMOL软件预测并绘制I72位点、I72V和I72F的氨基酸残基及空间构象图。结果·Western blotting结果显示，瞬时转染的外源性PRPS1各突变蛋白在293T细胞中成功表达；药物敏感性实验结果显示，表达PRPS1 I72F、R177S、V316L、V208A与阳性对照A190T的293T细胞对6-MP或6-TG的IC_(50)均远高于表达V289A及阴性对照Vector、PRPS1 WT、PRPS1 I72V的细胞（均P=0.000）。将第72位异亮氨酸变成其他氨基酸后，Western blotting结果显示瞬时转染的外源性PRPS1 I72位点的各突变蛋白在293T细胞中成功表达；药物敏感性实验结果显示，表达PRPS1 I72M、I72F、I72L、I72N、I72S、I72T与A190T的293T细胞对6-MP或6-TG的IC_(50)均远高于表达Vector、PRPS1WT、PRPS1 I72V的细胞（均P=0.000）。慢病毒感染REH细胞后，Western blotting结果显示在已构建的稳定细胞系中PRPS1 WT、A190T、I72F、I72V的蛋白高表达且表达量相似；药物敏感性实验结果显示，表达PRPS1 I72F、A190T的REH细胞对6-MP或6-TG确认细节的IC_(50)均远高于表达Vector、PRPS1 WT、PRPS1 I72V的细胞（均P=0.000），与293T细胞中瞬时转染得到的药物敏感性结果一致。AnnexinⅤ/DAPI双染法、DNA损伤和凋亡相关蛋白的Western blotting检测的结果均显示，经6-MP处理后，表达PRPS1 A190T、I72F的REH细胞系的DNA损伤和凋亡率明显低于表达Vector、PRPS1 WT、PRPS1 I72V的细胞（均P=0.000）。蛋白结构分析结果显示，PRPS1 I72F会使PRPS1的空间构象发生改变。结论·PRPS1I72F、R177S、V316L、V208A、I72M、I72L、I72N、I72S、I72T突变可使细胞获得对巯嘌呤类化疗药的耐药性，PRPS1V289A、I72V突变不影响细胞对巯嘌呤类化疗药的敏感性。293T中的药物敏感性实验结果和REH中的药物敏感性实验结果一致，证明293T细胞可以作为检测PRPS1突变对巯嘌呤类化疗药物耐药性的快速研究模型。PRPS1 I72位点突变对巯嘌呤类化疗药耐药性的影响可能与PRPS1结构发生改变有关。

目的 制备三七总皂苷多囊脂质体，优化制备工艺并进行质量评价，探究该制剂口服给药的可能性。方法 采用复乳化溶剂挥发法，分别以天然来源的大豆卵磷脂(SPC)、人工合成来源的二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)为主要磷脂成分，以形态、粒径、药物包封率为考察指标，正交实验对处方进行优化，制备2种三七总皂苷多囊脂质体，同时对其稳定性、体外释放和离体肠吸收进行考察。结果 制备了三七总皂苷-大豆卵磷脂-多囊脂质体(PNS-SPC-MVLsImmune evolutionary algorithm)、三购买Nirogacestat七总皂苷-二油酰磷脂酰胆碱-多囊脂质体(PNS-DOPC-MVLs),包封率依次为(63.41±3.64)%、(86.42±1.73)%,平均中值粒径依次为(42.50±6.34)、(21.13±Entinostat溶解度4.67)μm, Zeta依次电位为(-23.64±4.34)、(-18.73±3.54) mV,48 h累计释放量依次为(93.54±2.04)%、(82.46±1.05)%。离体肠吸收实验显示2种三七总皂苷多囊脂质体均可提高原料药在十二指肠、空肠和回肠部位的吸收，且PNS-DOPC-MVLs与原料药吸收相比具有统计学差异(P<0.05)。结论 采用DOPC为磷脂材料制备的PNS-DOPC-MVLs具有更高的包封率和稳定性，粒径分布较为集中，二者均可有效提高药物在离体肠道的吸收。

肺癌是常见的恶性肿瘤之一，非小细胞肺癌（NSCLPF-02341066体外C）是肺癌最常见的组织学分Tezacaftor IC50型，约占肺癌的85%。表皮生长因子受体（EGFR）突变是NSCLC最常见的驱动基因，针对EGFR突变的靶向药物治疗给晚期NSCLC患者带来了显著的临床获益，表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）已成为治疗EGFR突变型晚期NSCLC患者的主要方法。EGFR外显子20插入（EGFRexon20ins）突变作为EGFR罕见突变中最常见的亚型，约占EGFR突变型NSCLC的4%～12%。因EGFRexon20ins突变体结构独特，EGFRexon20ihost immune responsens突变型NSCLC对1～3代EGFR-TKIs原发耐药，且预后差。近年来，随着对NSCLC认识的不断深入及新药研发的不断推进，针对EGFRexon20ins的靶向治疗取得了突破，其中舒沃替尼治疗EGFRexon20ins突变型NSCLC患者的客观缓解率（ORR）达59.8%，给患者带来了显著的临床受益。基于此，本研究概述了EGFRexon20ins突变型NSCLC患者的治疗现状、针对EGFRexon20ins突变型NSCLC患者的新药研发及其临床研究，以期为EGFRexon20ins突变型晚期NSCLC患者的临床治疗及新药研发提供一定的参考。

目的 检测广西壮族自治区南宁市登革热媒介白纹伊蚊现场种群的击倒抗性基因型及其分布特点，以了解其抗药性水平，为科学防控白纹伊蚊提供依据。方法 2022年在南宁市采用勺捕法采集伊蚊幼蚊，送实验室饲养至成虫，经形态学方法鉴定后，将白纹伊蚊用75%乙醇溶液浸泡，于-20℃保存备用。采用磁珠法试剂盒提取单只成蚊DNA,PCR扩增电压门控钠离子通道（VGSC）基因部分片段，测序结果在美国国立生物技术信息中心进行BLAST比对，对确认为白纹伊蚊VGSC基因的序列使用DNAStar 7.1分析其VGSC基因单位点及多位点联合突变情况。结果 共检测175只白纹伊蚊，获得350条基因序列，长度约为400 bp,VGSC基因1532位点未发现突变，1016和1534位点均存在突变。1016位点有2种等位基因，分别为野生型1016V(148,78.28%)和突变型1016G(此网站49,21.72%);3种基因型分别为野生型纯合子1016V/V(126,72.00%)、突变型纯合子1016G/G(27,15.43%)和野生/突变型杂合子1016V/G(22,12.57%)。1532位点有1种等位基因，即野生型1532I(175,100%)；基因型均为野生型纯合子1532I/I。1534位点有3种等位基因，分别为野生型1534F(51,16.86%)、突变型1534S(116,36.29%)和突变型1534C(135,46.85%);6种基因型分别为野生型纯合子1534F/F(8,composite biomaterials4.57%)、野生/突变型杂合子1534FLY2157299分子量/S(21,12.00%)、野生/突变型杂合子1534F/C(22,12.57%)、突变型杂合子1534S/C(64,36.57%)、突变型纯合子1534S/S(21,12.00%)和突变型纯合子1534C/C(39,22.29%)。结论 南宁市VGSC基因突变率较高，应密切关注白纹伊蚊抗药性水平，科学、规范、高效地指导卫生杀虫剂的使用。

为探讨大叶桉(Eucalyptus robusta)化感作用的细胞学机制，该研究以大叶桉挥发油及其主要成分α-蒎烯和桉油精为供体，以蚕豆(Vicia faba)的根细胞和叶保卫细胞为靶标，运用显微技术、细胞化学技术和qRT-PCR技术，研究了大叶桉挥发物的毒性效应。结果表明：(1)在大叶桉挥发物作用下，蚕豆幼根生长受抑制并表获悉更多现为时间-浓度依赖效应，其化感效应强弱由大到Scalp microbiome小依次为挥发油、α-蒎烯和桉油精。(2)蚕豆根边缘细胞活性降低，分生区细胞微核率升高，有丝分裂指数下降且大部分细胞的细胞周期被阻滞在分裂前期。(3)蚕豆叶保卫细胞内NADPH氧化酶活性升高，活性氧(reactive oxygen species, ROS)爆发，微丝聚合，气孔开度下降；叶保卫细胞的核畸变率升高，细胞活性降低甚至发生caspase依赖性细胞凋亡，而Ca~(2+)通道阻断剂(LaCl_3)、活性氧清除剂(AsA)和硝酸还原酶抑制剂(NaN_3)均可显著提高保卫细胞存活率，说明大叶桉挥发物改变了信号分子Ca~(2+)、ROS和NO的信号调节。综上表selleck抑制剂明，大叶桉挥发物的细胞毒性和遗传毒性改变了受体细胞的信号转导途径，诱发了细胞遗传畸变，导致受体根边缘细胞保护功能障碍和气孔运动障碍，从而影响受体根系生长和光合作用，最终导致受体生长受阻。该研究结果为大叶桉种植区的科学种植和管理提供了理论依据。

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)是一种霉菌毒素,在被霉菌污染的农作物和相关制品中检出率很高,严重威胁动物生产和人类食品安全。ZEA及其代谢物可诱导生殖毒性、免疫毒性、基因毒性和细胞毒性。畜禽对ZEA有明显不同的耐受性,猪是最易受影响的物种。代谢物及代谢通路对评估和控制真菌毒素诱导的毒性至关重要。ZEA对代谢过程产生毒性影响,包括核苷酸和蛋白质合成、活性氧化物质产生和脂质氧化,但是其潜在功能和分子机制仍不清楚。本研究通过检测ZEA对猪小肠上皮细胞(Porcine intestinal epithelial cell line,IPEC-J2)的细胞活性、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)以及凋亡的影响,初步探究ZEA对IPEC-J2细胞的毒性作用;通过转录组学和代谢组学测序联合分析,筛选细胞对ZEA毒性反应的调控基因、信号通路和生物活性代谢物;通过体外添加关键代谢物L-精氨酸(L-Arginine,L-Arg)探究其在缓解ZEA毒性中的作用及分子机制。本研究主要结果如下:1.基于转录组测序筛选玉米赤霉烯酮诱导猪小肠上皮细胞毒性的差异表达基因为了探究ZEA诱导的IPEC-J2细胞毒性,本研究使用浓度10μg/ml的ZEA处理IPEC-J2细胞,24h后利用CCK8试剂盒检测细胞活性,发现IPEC-J2细胞活性显著下降(P<0.01);利用流式细胞仪检测处理组与对照组的活性氧水平和细胞凋亡情况,发现ZEA处理组细胞的ROS水平和凋亡率显著升高(P<0.01)。上述结果证明ZEA诱导IPEC-J2细胞毒性模型构建成功。为了筛选ZEA诱导IPEC-J2细胞毒性的差异表达基因,本研究采用RNA-seq技术对ZEA处理组和对照组的样品进行转录组测序分析。差异表达分析共检测出5646个差异表达基因,其中2740个差异上调基因,2906个差异下调Empagliflozin基因。基因集富集分析(GSEA)显示,上调基因(如DND1、GLE1、NAT10、ISG20等)主要富集在核糖体生物发生(categoriesofribosome biogenesis)、ncRNA 加工(ncRNAprocessing)和核糖核蛋白复合物生物发生(ribonucleoprotein complex biogenesis)等生物过程中;下调基因(如CKMT1A、GAMT、SLC27A1、HOGA1等)主要富集在细胞修饰的氨基酸代谢过程(cellular modified amino acid metabolic process)、抗原加工和呈递(antigen processing and presentation)以及脂肪酸生物合成(fatty acid biosynthetic process)等生物过程中。层次聚类分析将差异表达基因分成4组,其中cluster1包含144个基因,其表达趋势在ZEA处理组显著降低,表明它们与ZEA处理呈负相关。功能富集分析显示,cluster1的144个基因在脂质代谢过程(lipid metabolism process)、类固醇生物合成和代谢过程(steroid biosynthesis and metabolism processes)以及蛋白质转运类别(protein transport categories)中显著富集。此外,随机选择11个差异表达基因(OASL MX2,SERPI,GDPD2等)进行qRT-PCR验证,结果表明这些基因的表达趋势与RNA-seq分析一致,说明RNA-Seq数据分析的准确性和可靠性。2.整合分析筛选玉米赤霉烯酮诱导猪小肠上皮细胞毒性的差异代谢物及相关基因为了筛选ZEA诱导IPEC-J2细胞毒性的差异代谢物,本研究用液相色谱-串联质谱技术(LC-MS/MS)在正离子和负离子模式下对ZEA处理组与对照组进行代谢组分析。代谢物分类表明,所有的代谢物主要属于脂类和类脂类分子(lipiAdavosertib分子式ds and lipid-like molecules),有机酸及其衍生物(organic acids and derivatives)和有机杂环化合物(organoheterocyclic compounds)等10类。代谢物差异分析表明,正离子模式下ZEA处理组与对照组之间差异代谢物筛选出213种,其中81种代谢物上调,132种代谢物下调;负离子模式下两组间的差异代谢物筛选出112种,其中18种代谢物上调,94种代谢物下调。富集分析结果表明差异代谢物在甘油磷脂代谢(glycerophospholipid metabolism),抗坏血酸和醛酸代谢(ascorbateand aldaratemetabolism),丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢(alanine,aspartate and glutamate metabolism)以及精氨酸生物合成(arginine biosynthesis)等通路中显著富集。转录组与代谢组联合分析结果表明差异代谢物和基因在脂质代谢(lipid metabolism)、氨基酸代谢(amino acid metabolism)和碳水化合物代谢(carbohydrate metabolism)通路中显著富集。其中属于氨基酸代谢的精氨酸和脯氨酸代谢以及精氨酸生物合成的两个紧密联系的通路被富集,且ZEA处理组参与这两种通路的大多数基因和检测到的代谢物下调,表明ZEA可能通过干扰精氨酸合成和代谢过程对细胞产生毒性作用。3.L-精氨酸缓解玉米赤霉烯酮诱导的猪小肠上皮细胞毒性的分子机制为了探索L-精氨酸(L-Arg)对ZEA诱导的IPhepatic insufficiencyEC-J2细胞毒性的潜在影响,本研究采用不同浓度的L-Arg(20～450μM)作为外源物质加入ZEA处理的IPEC-J2细胞中,24h后发现ZEA处理的细胞活性显著升高,但是加入的L-Arg浓度大于200μM时细胞活性下降。进一步对活性氧和细胞凋亡的检测发现,添加80μM和200μM的L-Arg可显著降低ZEA处理细胞的ROS水平和凋亡率(P<0.01)。以上研究表明L-Arg的添加能够缓解ZEA对IPEC-J2细胞造成的毒性作用。为了探索L-Arg缓解ZEA对IPEC-J2细胞毒性的潜在分子机制,本研究通过ELISA试剂盒检测L-Arg对ZEA代谢代谢的影响,发现添加L-Arg的细胞中ZEA的浓度显著降低(P<0.01)。通过qRT-PCR检测L-Arg对编码解毒酶基因和抗氧化酶相关基因表达的影响,发现Ⅱ期解毒基因SULT2B1、GSTA1和GSTM3的表达在ZEA处理组显著降低,抗氧化酶相关基因GPX4的表达显著升高,且L-Arg可显著促进这些基因的表达(P<0.01)。通过Western blot检测添加L-Arg后细胞的自噬水平,结果显示LC3-Ⅱ水平增加,p62/SQSTM1水平下降,自噬相关蛋白Beclin1水平增加,表明自噬通路被激活。进一步利用自噬体-溶酶体融合抑制剂Bafa(0.1μM)抑制细胞自噬后发现L-Arg对ZEA诱导的细胞凋亡缓解作用被明显抑制(P<0.01)。综上结果证明,L-Arg能够通过影响解毒过程和自噬通路来缓解ZEA诱导的细胞毒性。综上所述,本研究成功构建ZEA诱导猪小肠上皮细胞毒性损伤模型,通过转录组与代谢组测序分析筛选了差异表达基因和差异代谢物,通过整合分析筛选到关键差异代谢物L-精氨酸可以缓解ZEA诱导的细胞毒性。

蛋白质和生物活性分子作为重要的生命物质,在整个生物发展过程及维持人类正常生命活动中都发挥重大的意义,蛋白质翻译后修饰能够协调并控制绝大多数蛋白的活跃程度,其中,蛋白质磷酸化、糖基化几乎在每个生物的各个方面都扮演着重要的角色,例如基因转录、信号转导、肿瘤发生等。生物活性分子如葡萄糖和唾液酸糖苷水平在疾病发生发展过程中也具有非常重要的作用,其中高血糖是导致心血管病死亡的一个独立的危险因素,葡萄糖可能通过影响胆固prescription medication醇在巨噬细胞的流动而加速巨噬细胞的泡沫化,从而诱导动脉粥样硬化病变的发生。过氧亚硝酸盐(ONOO~-)是一种高活性的活性氧,是重要的生物氧化剂,可在体内生成各种有毒物质,从而引起体内DNA损伤和细胞死亡。因此,多种活性物种的同时识别检测以及了解生物活性分子之间的作用关系对于探究疾病的发病机制是至关重要的。基于此,该论文利用金属有机框架PCN-224后修饰I_3~–Rh B缔合物与BSA包封小分子荧光探针分别设计了I_3~–Rh B@PCN-224和BSA-AB两种纳米荧光探针,分别实现了蛋白质磷酸化与葡萄糖水平和唾液酸与ONOO~-水平的同时检测与成像分析,探究了早期动脉粥样硬化(AS)老鼠血清中相关生物活性分子的水平变化。具体工作内容如下:1、利用金属有机框架PCN-224与I_3~–Rh B缔合物之间的静电吸附作用,构建了可同时识别葡萄糖和磷酸化位点的纳米荧光探针I_3~–Rh B@Pselleck HPLCCN-224,深入研究了动脉粥样硬化早期未形成斑块阶段蛋白质磷酸化与葡萄糖水平变化。利用荧光光谱检测实现了对葡萄糖和磷酸化位点的体外同时检测,并且证明确认细节了探针无细胞毒性,实现了在细胞中的成像分析,利用卟啉和葡萄糖识别单元双光子特性的优势,可以有效的降低背景荧光,提高成像灵敏度。最后通过高脂饮食喂养构建了AS大鼠模型,通过双光子荧光成像观察了早期AS老鼠模型中蛋白质磷酸化和葡萄糖的水平变化,结果显示早期AS老鼠体内蛋白质磷酸化和葡萄糖水平高于正常老鼠。该研究为进一步探究动脉粥样硬化的发病机理及早期诊断提供了合适的荧光工具。2、利用BSA包封两个小分子荧光探针制备了纳米复合探针BSA-AB,分别研究并制备了以2,7-二氨基芴为荧光团,以硼酸为活性中心的荧光探针FBA和以荧光素为荧光团,以硼酸为识别基团的荧光探针FIB,然后用牛血清白蛋白(BSA)包裹,合成的纳米复合探针BSA-AB在体外实现了对唾液酸和ONOO~-的同时荧光检测。并且证明探针无细胞毒性,可以用于体内成像分析,检测了早期AS老鼠血液与组织中SA与ONOO~-的水平变化,结果显示早期AS老鼠体内SA与ONOO~-水平高于正常老鼠。该工作为研究SA与ONOO~-相关的信号通道来揭示疾病机制提供新的分析方法。