丹参多酚酸盐对H_2O_2诱导心肌细胞凋亡与自噬的影响及机制研究

目的：探讨丹参多酚酸盐（salvianolate,SAL）对过氧化氢（hydrogen peroxide,H_2O_2）诱导H9c2心肌细胞凋亡与自噬的影响及其机制。方法：以100μmol/L的H_2O_2干预对数生长期H9c2细胞4 h，建立心肌细胞氧化应激损伤模型，设H_2O_2组，SAL50、100、200 mg/L组，另取对数生长期H9c2细胞设为正常组。药物干预24 h后，CCK-8Panobinostat试剂法检测细胞增殖率，流式细胞术检测细胞凋亡，GFP-LC3质粒转染后观察自噬小体，Western blot法检测H9c2细胞蛋白激酶B(protein kinasstorage lipid biosynthesise B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylation Akt,p-Akt)、半胱氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 related X protein,Bax）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylation mammalian target of rapamycin,p-mTOR）、Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(microtubuCaptisol体外le-associated protein 1light chain 3,LC3)、P62蛋白表达。结果：与H_2O_2组比较，SAL 100、200μg/mL组H9c2细胞增值率显著升高而凋亡率显著降低（P<0.01），细胞内自噬小体数量减少，p-Akt、p-mTOR、bcl-2表达明显上调而Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3-I、LC3-Ⅱ、P62表达明显下调（P<0.05或P<0.01）,p-Akt/Akt、bcl-2/Bax比值升高而LC3-Ⅱ/LC3-I比值下降（P<0.01）。结论：SAL对H_2O_2所致H9c2心肌细胞凋亡与自噬具有抑制作用，其机制可能与激活Akt/mTOR/Beclin1通路而抑制促凋亡、促自噬相关蛋白表达和活化有关。