溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种常见的慢性肠道疾病,因其发病机制未知、疾病易反复、并发症严重已极大地影响人们的生活质量,当前对其治疗主要以药物控制为主,重症患者常需要手术进行治疗,但均不能根治,寻找副作用较小的新替代药物已成为当前的热点研究,其中中医药对溃疡性结肠炎的研究报道屡见不鲜。新疆一枝蒿是菊科蒿属植物岩蒿Artemisia rupestris L.的全草,也是维吾尔医的常用药材,其生长在海拔较高的地区,在当地民间沿用已久且药效显著,在众多“维药”中有相当重要的地位。《纲目拾遗》和《维吾尔药志》中均详细记载新疆一枝蒿具有“清热解毒、活血、祛阴寒”等功效,现代研究也表明其具有抗炎、抗病毒、保肝、抗氧化等多种药理作用,尤其是其抗氧化能力显著为治疗溃疡性结肠炎的潜在治疗药物。因此,本研究通过网络药理学和分子对接对新疆一枝蒿治疗溃疡性结肠炎的有效成分、作用靶点和作用通路进行分析,根据分析结果优化新疆一枝蒿的超声提取工艺,进行药效学考察,设计制备结肠靶向定位片剂,并对片剂进行初步质量检查和稳定性研究,以期对其临床应用提供思路,具体研究内容和结果如下:(1)网络药理学和分子对接分析新疆一枝蒿治疗溃疡性结肠炎的有效成分。通过文献检索和Swiss Target PrediImmunity boosterction,获取新疆一枝蒿的化学成分和成分作用靶点,并在Gene Cards等数据库检索UC相关靶点;通过STRING数据库对新疆一枝蒿与UC交集靶点进行PPI、GO、KEGG分析,用Cytoscape、微生信对结果作图;通过Auto Dock Vina对治疗UC关键成分与核心靶点进行分子对接验证。实验结果显示,符合要求的成分共有12个,成分作用靶点277个,UC靶点5045个,交集靶点174个;PPI结果显示,新疆一枝蒿治疗UC核心靶点25个,最核心靶点5个(TNF、AKT1、SRC、EGFR、HSP90AA1);GO分析结果显示,新疆一枝蒿治疗UC主要涉及对药物的反应、凋亡过程的负调控等生物过程;KEGG结果显示,主要涉及的通路有癌症通路、抗病毒感染、PI3K-Akt等信号通路;分子对接结果显示木犀草素、槲皮素、山奈酚、蒙花苷均与5个最核心靶点有较好的结合活性,木犀草素、槲皮素、山奈酚、蒙花苷为可能的治疗UC有效成分。(2)超声提取新疆一枝蒿的工艺优化。以总黄酮、多酚提取率、DPPH清除率和ABTS清除率为指标,通过单因素实验筛选提取工艺,Plackett-Burman试验筛选主要影响因素以及Box-Behnken设计优化实验工艺。单因素结果筛选工艺为一枝蒿20%-60%乙醇,浸泡0.5-1.0 h,20-40℃,30-60 k HZ,1:20-1:50 g/m L料液比提取10-40 min,反复提取3次;Plackett-Burman试验结果表明乙醇浓度、提取时间以及提取温度为主要影响因素;优化实验工艺为51%乙醇,33℃下提取28 min。(3)新疆一枝蒿治疗UC的药效学考察。以TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎,灌胃给药不同剂量的新疆一枝蒿提取物(1.05 g/kg获悉更多、2.1 g/kg和4.2 g/kg)进行治疗,实验结果发现模型组大鼠疾病活动指数(DAI)评分、组织损伤(CMDI)评分、组织病理学(HS)评分均显著(P<0.01)高于正常组,说明UC造模成功,且新疆一枝蒿中、高剂量组大鼠三者评分均显著(P<0.05)低于模型组。此外,新疆一枝蒿中、高剂量组大鼠能显著(P<0.05)降低造模大鼠体内的MPO、NO、MDA含量,增高SOD活力,降低TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子的表达水平。实验结果表明,新疆一枝蒿提取物对UC具有治疗作用。(4)制备新疆一枝蒿结肠靶向定位片。采用压制包衣、喷雾包衣的方法制备结肠靶向定位片,以总黄酮累积释放度为指标,分别考察压制包衣时滞材料处方比例、包衣用量、上下层填料比例,p H控释层处方比例与包衣增重等。经过考察,压制包衣处方为EC-PEG6000(4:1),压制包衣0.1 g,压制包衣上下层填料(1.5:1),p H控释层Eudragit FS 30D-Eudragit L30 D-55(2:1),包衣增重7%时制得结肠靶向定位制剂在0.01 mol/L盐酸(2 h)溶液中不释药,在p H 6.8 PBS溶液中(4 h)累积释放度小于10%,在p H 7.5 PBS溶液中(6 h)累积释放度大于80%。经过筛选后的结肠靶向定位片能够实现结肠定位释放的目的且体外释放稳定。(5)新疆一枝蒿结肠靶向定位片剂的初步质量检查和稳定性检查。按照2020版《中国药典》的要求,对制备的新疆一枝蒿结肠靶向定位片剂进行初步的含量考察、质量检查和影响因素实验。采用高效液相色谱法(HPLC)对片剂样品进行分析,测定其中关键活性成分槲皮素的含量,并从稳定性、精密度、线性与范围等方面进行方法学考察。考察结果显示高效液相色谱法测定专KD025属性强、测定结果稳定可靠。初步质量检查发现片剂的性状、重量差异、脆碎度、释放度等项均符合要求,稳定性实验显示片剂在60℃和湿度90±5%RH及光照影响因素条件下,有很好的稳定性。