近年来,植物来源的生物活性化合物因优异的抗氧化、抗炎、抗癌和免疫调节活性而受到广泛关注~([1])。在这些活性化合物中,丹参酮IIA(TanshinoneⅡA,TA)因卓越的抗炎、杀菌、抗肿瘤、抗氧化、抗心脑血管疾病、抗骨质疏松等活性,成为非常具有研究价值的活性成分。目前,TA的临床应用严重受到其理化性质的限制,TA在水中的溶解性很低,导致其口服生物利用度和绝对生物利用性极差(<3.5%);在苛刻的外界条件(比如光照、高温和酸碱等)下很快就会失去活性。本课题主要以酪蛋白酸钠(NaCas)及其酶解产物作为纳米蛋白载体,用于增强疏水活性物质的理化性质和生物活性,弥补TA在临床应用中的不足。通过对制备纳米颗粒的研究,希望为蛋白药物载体的创新做出一定贡献。包含的工作内容如下:1.选用目标酶对Nimplant-related infectionsaCas进行酶解处理,得到酶水解NaCas(Eh NaCas),优化条件为温度50℃,胰蛋白酶:NaCas=1:60(w/w),反应6 h。之后对Eh NaCas进行了SDS-PAGE、DLS分析、蛋白表面疏水性和酶解程度等表征实验,表明Eh NaCas分子量较小、亲水性较好、酶解程度较高。2.TA通过自组装法与Eh NaCas的疏水区域结合,制备出负载TA的Eh NaCas纳米颗粒(Eh NaCas@TA),在37℃、Eh NaCas:TA=30:1(w/w)时,Eh NaCas对TA有较高的包封率。TEM、FT-IR、XRD等结果证实了TA被Eh NaCas疏水区域成功捕获;DLS,溶解性,稳定性(常温放置,高温,光照和p H)结果显示Eh NaCas@TA粒子尺寸小,溶解程度高,溶液稳定性高;抗氧化实验结果显示,Eh NaCBMS-907351小鼠as与TA可以表现出协同抗氧化作用。3.Eh NaCas@TA可以影响变异链球菌(S.mutans)的生长,具有更低的MIC,MBC值;CLSM实验结果说明Eh NaCas@TA破坏了细菌细胞膜,诱导了细菌死亡。结晶紫~([2])生物膜染色,FESEM实验结果表明Eh NaCas@TA可以破selleckchem坏生物膜结构,抑制生物膜形成;细菌表面疏水性,聚集性和糖酵解活性实验显示Eh NaCas@TA通过影响S.mutans生物膜组成机制来限制其形成。