结肠癌作为最恶劣癌症之一,在发病率和死亡率方面均位居前三位,现有的临床结肠癌治疗药物依然不能有效发挥作用。所以进一步了解结肠癌的发生发展机制,发现新的结肠癌发生发展Dorsomorphin相关的肿瘤基因,对于开发结肠癌靶向治疗药物依然十分重要。我们通过利用TCGA数据库分析发现NFATc1在临床结肠癌患者组织中表达显著升高,并且NFATc1高表达的临床结肠癌患者的预后明显变差。提示我们NFATc1在结肠癌发生发展中起到关键作用。我们通过收集临床结肠癌患者术后样本进行免疫组化染色,确认患者癌组织NFATc1表达显著高于癌旁组织。通过裸鼠荷瘤实验证实,NFATc1敲低显著减缓结肠癌细胞HCT116的肿瘤增殖速率。进一步的细胞实验结果显示,NFATc1敲低后结肠癌细胞的增殖和迁移速率均明显Living donor right hemihepatectomy下降。说明NFATc1在结肠癌发生发展过程中有关键作用。细胞周期运转脱离控制是肿瘤细胞的主要特征之一,也是肿瘤增殖加快的主要原因。所以我们首先考查了NFATc1缺失后细胞周期相关表型的变化。通过流式细胞计数发现NFATc1敲低后细胞周期堆积在G1期的数目明显增多;通过对G1期的细胞核进行染色发现微核的数目明显减少;对分裂期的细胞进行染点击此处色体数目统计,发现染色体数目异常的细胞数目明显减少。综合以上结果说明NFATc1影响了细胞分裂周期的多个阶段,从而影响结肠癌发生发展。p21是广泛型细胞周期因子抑制因子,并对细胞分裂期出现的染色体断裂、不均等分裂等异常情况都有抑制作用。所以我们推测NFATc1可能通过抑制p21导致细胞分裂周期各个表型变化。通过q RT-PCR、双荧光素酶报告基因实验和Western Blotting证实NFATc1显著抑制p21的转录活性和蛋白表达。利用UCSC数据库和KEGG数据库联合分析预测NFATc1在p21上游所处的通路位置以及直接调控的基因。发现NFATc1在MDM2的启动子区域有预测的结合位点。通过双荧光素酶报告基因实验和Ch IP实验证实NFATc1通过结合在MDM2的-303至-307的TTTCCA位点促进MDM2转录活性。另外,我们通过拯救实验进一步确认,NFATc1是通过激活MDM2从而促进结肠癌发生发展各个表型。由于钙通道的激活在肿瘤的发生发展过程中有不可或缺的作用。而NFATc1就是钙通道相关基因中的一员,钙通道抑制剂可以抑制NFATc1转位到细胞核,阻碍其与靶基因结合而发挥作用。硝苯地平(NIFE)是一种二氢吡啶l型钙…