目的 构建高糖环境下缺氧复氧损伤小鼠海马神经元HT22细胞模型，探讨褪黑素(melatonin, Mel)调控自噬对高糖环境下HT22细胞缺氧复氧损伤的影响。方法 小鼠海马神经元HT22细胞分为高糖组、高糖缺氧复氧组、高糖缺氧复氧+Mel组、高糖缺氧复氧+Mel+3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA)组。高糖组于高糖培养基、常氧环境中培养，建立高糖模型；高糖缺氧复氧组在建立高糖模型后，进行细胞周期同步化处理，无糖无血清培养基、低氧环境中培养6 h,高糖培养基、常氧环境中培养24 h,建立缺氧复氧模型；高糖缺氧复氧+Mel组和高糖缺氧复氧+Mel+3-MA组在建立高糖模型、细胞周期同步化处理后，分别加入100μmol/L Mel、100μmol/L Mel+5 mmol/L New medicine3-MA,于高糖培养基、常氧环境中预培养4 h,再建立缺氧复氧模型。造模后取4组细胞，采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，DCFH-DA荧光探针检测活性氧水平，TBA法检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平，WST-1法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)水平，Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin1、自噬相关蛋白14(autophagy related 14, Atg14)蛋白相对表达量并计算LC3Ⅱ/Ⅰ。结果 高糖缺氧复氧组细胞活力(0.37±0.14)、SOD水平[(51.88±11.76)u/mg]、Gefitinib-based PROTAC 3说明书LC3Ⅱ/Ⅰ(0.35±0.16)及Beclin1(0.31±0.15)、Atg14(0.32±0.16)蛋白相对表达量均低于高糖组[1.00±0.09、(151.54±24.25)u/mg、1.00±0.14、1.00±0.13、1.00±selleck合成0.11](P<0.05),细胞凋亡率[(28.26±5.37)%]、活性氧(5.38±0.85)、MDA [(20.77±3.58)nmol/mg]水平均高于高糖组[(7.83±2.35)%、1.01±0.69、(6.13±1.40)nmol/mg](P<0.05);高糖缺氧复氧+Mel组细胞活力(0.79±0.13)、SOD水平[(112.60±17.69)u/mg]、LC3Ⅱ/Ⅰ(0.69±0.16)及Beclin1(0.75±0.12)、Atg14(0.74±0.14)蛋白相对表达量均高于高糖缺氧复氧组(P<0.05),细胞凋亡率[(15.16±3.23)%]、活性氧(2.69±0.92)、MDA水平[(10.33±2.18)nmol/mg]均低于高糖缺氧复氧组(P<0.05);高糖缺氧复氧+Mel+3-MA组细胞活力(0.43±0.11)、SOD水平[(73.92±17.23)u/mg]、LC3Ⅱ/Ⅰ(0.39±0.15)及Beclin1(0.41±0.14)、Atg14(0.41±0.15)蛋白相对表达量均低于高糖缺氧复氧+Mel组(P<0.05),细胞凋亡率[(22.85±4.36)%]、活性氧(4.72±1.02)、MDA水平[(16.05±1.98)nmol/mg]均高于高糖缺氧复氧+Mel组(P<0.05)。结论 Mel可通过增强自噬、抑制氧化应激和细胞凋亡，减轻高糖环境下小鼠海马神经元HT22细胞缺氧复氧损伤，发挥神经保护作用。