目的:本研究通过建立伊立替康(CPT-11)炎症性腹泻大鼠模型,以附子理中丸作为干预药物,通过IκB/NF-κB途径观察和研究附子理中丸抗炎止泻的效应和分子生物学机制。为临床上缓解伊立替康的限制性毒性作用提供新的策略以及一定的理论基础。方法:将56只Wistar雄性大鼠按体质量随机分为对照组,模型组,小檗碱组,IKK-β抑制剂组,附子理中丸低、中、高剂量组,每组各8只大鼠。除对照组外,其余大鼠按照125 mg·kg~(-1)体质量腹腔注射伊立替康溶液连续5 d建立炎症性腹泻模型,对照组大鼠则腹腔注射相同剂量生理盐水;待造模成功后,对各组大鼠灌胃相应的药物给予治疗,对照组大鼠则灌胃等量生理盐水,连续30 d。之后通过苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,HE染色)观察各组大鼠结肠组织病理学变化;透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM)观察各组大鼠结肠组织中各种超微结构的变化;酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISAselleck NMR)测定各组大鼠结肠组织中的白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)、环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10);实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reactin,q RT-PCR)检测各组大鼠结肠组织中NF-κB亚单位p65和p50、IKK-β、NLRP-3、Caspase-1、GSDMD、ASC m RNA的相对表达量;蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测各组大鼠结肠组织中NF-κB亚单位p65和p50、IKK-β、NLRP-3、Caspase-1、ASC蛋白相对表达量。结果:(1)HE染色可以观察到模型组的大鼠结肠组织的肠黏膜较对照组的腺体排列紊乱,隐窝缺失,上皮细胞减少,炎症细胞有大量浸润,小檗碱组,IKK-β抑制剂组,附子理中丸低、中、高剂量组较模型组大鼠的结肠组织均有不同程度的改善。(2)透射电子显微镜可以看到模型组较对照组的肠黏膜上皮细胞损伤相对明显,细胞膜局部破损,细胞器明显肿胀;微绒毛大面积退化、缺失,小檗碱组,IKK-β抑制剂组,附子理中丸低、中、高剂量组较模型组均有不同程度的改善。(3)ELISA法可以得出模型组大鼠结肠组织的IL-1β、IL-18、TGF-β1、COX-2、TNF-α含量均比对照组高,差异有统计学意义(P<0.01),小檗碱组,IKK-β抑制剂组,附子理中thylakoid biogenesis丸低、中、高剂量组较模型组相比均有不同程度的降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而模型组大鼠结肠组织中IL-4和IL-10含量均比对照组低,差异有统计学意义(P<0.01),小檗碱组,IKK-β抑制剂组,附子理中丸低、中、高剂量组较模型组相比均有AZD9291不同程度的升高,差异有统计学意义(P<0.01)。(4)q RT-PCR法表明模型组大鼠结肠组织的p65、p50、IKK-β、NLRP-3、Caspase-1、GSDMD、ASC m RNA的表达水平均比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),小檗碱组,IKK-β抑制剂组,附子理中丸低、中、高剂量组与模型组相比m RNA表达水平均有不同程度的降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(5)Western blot结果显示模型组大鼠结肠组织的p65、p50、IKK-β、NLRP-3、Caspase-1、ASC的蛋白表达水平与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,小檗碱组,IKK-β抑制剂组,附子理中丸低、中、高剂量组大鼠结肠组织的p65、p50、IKK-β、NLRP-3、Caspase-1、ASC蛋白表达水平均有不同程度的降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:附子理中丸可以改善伊立替康诱导炎症性腹泻大鼠的肠黏膜结构,这可能与其减少促炎因子的含量,增加抗炎因子的含量,以及下调IκB/NF-κB途径的p65和p50、IKK-β这一机制相关。