分子印迹整体柱结合了分子印迹聚合物的高选择性和整体柱的高通透性等优点,在天然产物分离分析中具有广泛的应用。采用孔结构已优化的无机整体柱为载体,通过表面印迹法制备分子印迹整体柱,有望克服目前分子印迹整体柱普遍存在的一些不足之处,如可以简化孔结构优化过程VX-445核磁,提高印迹效率增加表面均匀性,提高抗溶胀-收缩能力增加色谱柱稳定性等。本论文研究旨在以山奈酚为模板分子,具有均匀孔结构的氧化硅整体柱为载体,制备具有高选择性、高通透性、高柱效和高稳定性的分子印迹整体柱,为从复杂的天然产物体系中快速高效分离目标产物提拱新材料、新方法及基础实验数据。本论文主要研究内容如下:(1)详细筛选了山奈酚分子印迹聚合物(MIPs),并将其应用于从复杂体系中分离山奈酚等黄酮类组分。以山奈酚为模板分medical liability子,4-乙烯基吡啶为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯或二乙烯基苯为交联剂,GSK2118436丙酮或乙腈为溶剂,可成功制备对山奈酚具有高亲和力和高选择性的山奈酚分子印迹聚合物。扫描电子显微镜观察和Brunauer-Emmett-Teller测量结果表明,制备的分子印迹聚合物具有不均匀的孔结构和大的比表面积。进行静态和动态吸附实验以及固相萃取(SPE)实验,评估了分子印迹聚合物性能。研究结果表明,只有在动态实验中同时具有较高分布系数和印迹因子的MIPs才具有更好的保留山奈酚的能力。利用筛选出的MIPs作为SPE吸附剂,从银杏叶粗水解液中提取山奈酚和槲皮素,回收率高,纯度高。对照实验还表明,筛选的MIPs从粗提取物中分离山奈酚的能力优于市售吸附剂。(2)以硝酸为催化剂、PEG为致孔剂、TEOS为硅源,通过溶胶-凝胶法可成功制备得到孔结构均匀、通透性和渗透性好、孔隙率高的氧化硅整体柱。详细研究了硝酸含量、致孔剂(PEG)种类和含量以及正硅酸乙酯(TEOS)含量对氧化硅整体柱形貌结构的影响。结果表明,硝酸、PEG和正硅酸乙酯含量过多或过少,均不利于孔结构和骨架的形成;PEG分子量的大小对孔径的大小和分布范围有影响。氨处理有利于氧化硅整体柱孔结构和骨架的稳定。电镜扫描观察和孔径分析结果显示制备的氧化硅整体柱具有大量的大孔和中孔结构。测得氧化硅整体柱在甲醇中的孔隙率高达88%,渗透系数为6.67×10~(-6)m~2,表明其具有良好的通透性和渗透性。(3)氧化硅整体柱孔壁表面经氨基功能化后,直接采用热聚合法可以简便地在氧化硅整体柱孔壁原位附载山奈酚分子印迹聚合物,测得聚合物含量为26.5%。扫描电子显微镜和孔径分析结果显示,整体柱含丰富的大孔和中孔结构;孔隙率为74%。将4.6×20 mm的整体柱与高效液相色谱仪相连,以甲醇为流动相,测得渗透率为5.78×10~(-6)m~2。将其用于染料木素、山奈酚、异鼠李素、槲皮素混合样品色谱分析,结果显示其具有良好的分离效果,相邻两物质间分离度分别为2.60、0.99和1.82。进行方法学验证,测得染料木素、山奈酚、异鼠李素、槲皮素的线性关系决定系数R~2分别为0.997、0.999、0.998和0.968;检测限分别为0.51、0.21、0.50、12.25 mg·L~(-1);定量限分别为1.01、0.63、1.00、24.5 mg·L~(-1);加标回收率分别为87.55-87.73%、74.24-103.32%、78.18-78.94%、99.18-122.52%;测得山奈酚线性范围为1-900 mg·L~(-1),日内精密度相对标准偏差(RSD)为1.9%,日间精密度RSD为2.3%。用于银杏叶提取液中黄酮类物质的分离分析,杂质在5 min内已完全被洗脱,最后出现山奈酚与异鼠李素两个色谱峰。以上结果显示,该分子印迹整体柱可有效地用于结构相似类黄酮及银杏叶提取液中黄酮成分的分离分析。综上所述,本研究对于提高复杂体系中黄酮类组分的分离分析效率具有重要意义;同时,表面印迹法构建分子印迹整体柱也将进一步拓宽分子印迹整体柱在天然产物分离分析中的应用。