目的:为了扩大抗肿瘤药物的应用范围,利用胆酸内源性以及肝肠循环的生理特点,并结合脂质体载药系统的优势,制备胆酸-盐酸伊立替康纳米脂质体(CA-CPT-11-Lip),实现盐酸伊立替康(CPT-11)肝靶向给药,增强抗肝癌作用,为肝癌靶向制剂的开发提供思路。方法:1.胆汁酸类化合物对CPT-11脂质体的影响。以包封率为评价指标,通过薄膜分散法、乙醚注入法、硫酸铵梯度法建立CA-CPT-11-Lip的制备方法。选择游离胆汁酸与结合胆汁酸类成分,分别制备胆酸-盐酸伊立替康脂质体、牛磺熊去氧胆酸-盐酸伊立替康脂质体,以包封率、载药量、粒径和多分散指数(PDI)评价胆汁酸类化合物替代胆固醇的可能性及影响。2.CA-CPT-11-Lip最佳制备工艺筛选。采用单因素方法考察胆酸用量、卵磷脂用量、卵磷脂-胆固醇用量比、CPT-11用量、水化温度、水化时间以及水化体积对制备CA-CPT-11-Lip的影响。基于单因素结果进一步采用Box-Behnken De-sCell Cycle抑制剂ign实验设计优化CA-CPT-11-Lip制备工艺,并对优化后的脂质体进行质量评价,包括形态、包封率、载药量、粒径、Zeta电位、PDI、稳定性Media coverage和体外释放。同时,对比研究新型脂质体CA-CPT-11-Lip与传统脂质体CPT-11-Lip(未添加胆酸的CPT-11脂质体)的差异。3.CA-CPT-11-Lip靶向性研究。口服给药后,取不同时间点小鼠组织样品,采用高效液相(HPLC)法测定CPT-11含量,对比CA-CPT-11-Lip、CPT-11-Lip和CPT-11-S(CPT-11水溶液)三种不同载药系统,分析CA-CPT-11-Lip的肝靶向性。4.CA-CPT-11-Lip体外抗肝癌活性研究。综合分析CA-CPT-11-Lip、CPT-11-Lip和CPT-11-S对肝癌细胞HepG-2的作用。采用CCK-8法评价三种制剂对肝癌细胞HepG-2的细胞毒性;使用流式细胞法观察三种制剂对HepG-2细胞周期和凋亡的影响;采用测定细胞内CPT-11浓度与细胞内总蛋白含量方法,评价HepG-2对三种制剂的摄取效率。结果:1.采取薄膜分散法制备的CA-CPT-11-Lip包封率高,重复性良好。同时,胆汁酸类化合物参与制备的脂质体具有类似胆固醇脂质体的包封率、载药量、粒径与PDI,其中胆酸组脂质体的粒径和PDI均小于牛磺熊去氧胆酸组,后续实验选择胆酸作为辅料用于CPT-11脂质体的制备。2.通过单因素和Box-Behnken Design实验设计,优化后的CA-CPT-11-Lip最佳制备工艺为:卵磷脂用量为104.80 mg,卵磷脂-胆固醇比例为6.28:1,CPT-11用量为6.45 mg,水化温度为35℃,水化时间为1.5 h,水化体积为10 m L。制备的CA-CPT-11-Lip呈类球形,包封率为82.04%,载药量为3.72%,粒径为154.16nm,电位为-56.93 m V,PDI为0.146,15天内外观均一,粒径恒定,体外具有缓释作用。与CPT-11-Lip相比,CA-CPT-11-Lip包封率高,粒径小,PDI范围窄,酸性环境下药物释放速度更快。3.口服给药后CA-CPT-11-Lip在肝脏内分布最多,心脏内分布最少,4 h后在体内快速消除。与CPTNirogacestat分子式-11-S和CPT-11-Lip相比,CA-CPT-11-Lip在肝脏内相对浓度高,持续时间长。4.在体外细胞实验中,与CPT-11-S相比,CA-CPT-11-Lip和CPT-11-Lip抑制肝癌细胞HepG-2增殖作用增强,IC_(50)值分别降低到6.02mM和6.86mM,主要影响细胞的S期和G2期,能促进细胞凋亡,增加细胞对CPT-11的摄取量,提升了CPT-11的抗肿瘤活性,其中CA-CPT-11-Lip对细胞凋亡和细胞摄取的作用更显著。结论:胆酸作为辅料制备的CPT-11脂质体包封率高,稳定性好,减少了胆固醇的使用,具有替代胆固醇制备脂质体的潜力。CA-CPT-11-Lip具有肝脏靶向的趋势,增强了CPT-11对肝癌细胞的作用,为肝癌靶向制剂的研发提供参考。