内蒙古绒山羊属于绒肉兼用型品种,骨骼肌的生长和肉品质是影响绒山羊养殖经济效益的关键。肌纤维作为骨骼肌的基本组成单位,其形成关键时期为胚胎后期,并且肌纤维的数目、大小和类型与肌肉的理化特性、感官品质等有着密切关系。因此,胎儿期对哺乳动物的骨骼肌发育至关重要。为了研究胎儿期肌纤维组织学结构特征和变化规律,本试验首先使用HE染色技术对绒山羊胎儿期65 d、75 d、85 d、95 d、105 d、115 d、125 d和13medical malpractice5 d股二头肌肌纤维的数量、直径和面积进行分析;其次利用免疫组化技术对不同发育时期股二头肌肌纤维类型进行鉴定。为进一步挖掘影响次级肌纤维生长发育和数量增殖的相关基因,对次级肌纤维发育关键时间节点75 d、85 d和95 d进行转录https://www.selleck.cn/products/dorsomorphin-2hcl.html组测序。主要结果如下:1.内蒙古绒山羊初级肌纤维的形成时间在65 d之前。2.65 d-75 d初级肌纤维与次级肌纤维完成融合,75 d次级纤维开始发育。3.95 d为山羊胎儿期骨骼肌纤维由增殖分化向增大增粗转变的关键节点。65d-95 d胎儿骨骼肌的发育主要表现在肌纤维数量的增加,而95 d后胎儿骨骼肌的发育主要表现在肌纤维直径的增加。4.内蒙古绒山羊肌纤维按类型分类,发育早期主要为慢肌(Ⅰ型肌纤维),发育后期主要为快肌(Ⅱ型肌纤维)。5.利用转录组测序的方法,平均每个样品测得7.5G的数据量,差异表达分析发现75 d和85 d相比差异表达基因共76个(P<0.05),其中在75 d上调45个,下调31个;75 d和95 d差异表达基因共457个(P<0.05),其中在75 d上调257个,下调200个;85 d和95 d差异表达基因共171个(P<0.05),其中在85 d上调77个,下调https://www.selleck.cn/products/SB-203580.html94个。6.通过差异基因聚类热图(heatmap)分析,发现75 d、85 d和95 d的基因表达谱存在显著差异;通过GO功能分析发现总差异基因被富集到3222个GO term中,其中2360个(28.0%)差异基因显著富集在细胞成分(Cellular Component)上P<0.05,1942个(23.0%)差异基因显著富集在分子功能(Molecular Function)上P<0.05,4136个(49.0%)差异基因参与生物学过程(Biological Process)P<0.05;KEGG通路分析结果显示差异基因共富集276条通路中,其中与肌纤维发育相关的通路22条。7.构建75 d、85 d和95 d三个时期与次级肌纤维发育相关基因调控网络,结果显示,ALDOA、CAV1、CALM1、PYGM、PPP1R3A、COL15A1、P4HA1、ENO3、CLEC3B、TCAP和MYL1等基因处于调控网络的中心。8.实时荧光定量(q RT-PCR)检测候选基因MYL1、MYLPF、ACTN3和TNNC2在绒山羊胎儿期75 d至95 d呈上升趋势,与RNA-seq结果相同,验证了RNA-seq结果准确性的同时,初步探讨了这4个候选基因在绒山羊胎儿期次级肌纤维生长发育及数量增殖过程中可能发挥的作用。9.胚胎后期为肌纤维生长关键时期,几乎所有的肌纤维都是在胎儿期形成的,出生后肌纤维数量没有净增加,并且胎儿期肌纤维的生长能力或决定其终生的产肉性能,深入挖掘胎儿期次级肌纤维的生长发育分子机制对肉品质的研究意义重大。