胞外多糖(Exopolysaccharides,EPS)作为植物乳植杆菌的一种重要次级代谢产物,由于其安全selleckchem Bafilomycin A1无害且具有抗氧化、抗癌、改善产品质构及营养价值高等特性,近年来得到了研究人员的广泛关注。在应对氧化应激反应造成的机体不可逆的组织结构功能受损和多种疾病时,相较于目前一些人工合成的抗氧化剂,EPS的安全性使之成为天然抗氧化剂的合适候选者。为了解析植物乳植杆菌所产EPS的抗氧化能力,探究其合成机制,本论文以从新疆酸马奶中分离保存的高产EPS的植物乳植杆菌IMAU30043、IMAU40001、IMAU80103为研究对象,通过评价其EPS体外抗氧化活性,筛选出最优菌株并结合生物信息学手段对菌株EPS基因簇进行挖掘,探究其产生的EPS对细胞氧化损伤的保护作用。研究内容如下:1.3株植物乳植杆菌——IMAU30043、IMAU40001、IMAU80103的EPS产量分别为223.6 mg/L、259.7 mg/L、186.0 mg/L;IMAU30043具有最强的还原能力和超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力。2.IMAU30043所产EPS显著提高脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7的SOD活力,降低MDA和NO含量,在基因水平上显著降低i NOS、TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量,而显著上调IL-10的表达量,表明EPS对细胞氧化损伤具有保护作用。此外,EPS对模型细胞中Nrf2和HO-1的m RNA表达具有促进作用,而对NF-κB的活化具有抑制作用,说明该保护作用与Nrf2/HO-1/NF-κB通路的调节有关。3.通过离子色谱分析IMAU30043EPS的组成:IMAU30043所产EPS由岩点击此处藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和甘露糖醛酸组成,其摩尔比为4.5Medial sural artery perforator0:51.49:256.73:95.96:3.64:5.35:111.10:16.93。4.提取并测定IMAU30043的基因组:菌株IMAU30043基因组内包含一条染色体DNA和7个环状质粒。在染色体上识别到3条长度为分别为12.1 kp、12.5 kp、9.6 kp的EPS基因簇,从分子层面上说明IMAU30043具备产糖能力。本研究通过综合评估植物乳植杆菌IMAU40001、IMAU30043、IMAU80103产生的EPS的体外抗氧化活性,选出一株所产EPS最具抗氧化活性的菌株IMAU30043,进一步对其EPS的细胞氧化损伤修复作用及作用机制进行初步解析并探讨其合成机制,为植物乳植杆菌及EPS的开发利用提供理论依据和数据支持。