为研究日本曲霉酸性蛋白酶的分泌表达、性质及其在猪肉嫩化中的应用。将日本曲霉来源的酸性蛋白酶基因(Ajpro A1)在毕赤酵母中高效表达，经5 L发酵罐高密度发酵后测得该酸性蛋白酶酶活力为669.6 U·m L~(-1)，蛋白质量浓度为6.64 mg·m L~(-1)。氨基酸多重序列比对结果表明:该酸性蛋白酶属于天冬氨酸蛋白Nirmatrelvir MW酶A1家族，与海枣曲霉来源的酸性蛋白酶同源性最高(73%)，是一个新型的酸Biogenic mackinawite性蛋白酶。采用强阴离子RP56976半抑制浓度交换层析柱对该酸性蛋白酶进行纯化得到电泳级纯酶，纯化后分析测得该重组酸性蛋白酶(Ajpro A1)的最适催化条件为p H值3.0，反应温度为45℃，在p H值为3.0～6.0及温度为40℃以下具有良好的稳定性。该酸性蛋白酶对不同蛋白质水解的分析结果表明，该酶底物水解特异性广泛，对酪蛋白组分中的κ-酪蛋白表现出最高水解活力。利用该酸性蛋白酶对猪肉进行处理，发现该酶能够有效降低猪肉剪切力，起到嫩化效果。研究结果旨在为新型酸性蛋白酶的开发及其在肉类嫩化中的应用提供理论参考。