目的:建立大鼠“肾阳虚”下缺血性心肌损伤模型,观察鹿茸多肽对肾阳虚下缺血性心肌损伤大鼠心脏的保护作用,探讨鹿茸多肽修复心肌损伤与“壮肾阳、益精血”之间的关系,揭示其修复心肾不交的作用规律,阐明相关作用机制。方法:实验分为空白组(Normal组)、模型组(YD/MI组)、阳性药右归丸-酒Tumor immunology石酸美托洛尔组(YM组,500mg/kg+20mg/kg)、鹿茸多肽高剂量组(YD/MI+VAPH组,300mg/kg)、鹿茸多肽中剂量组(YD/MI+VAPM组,200mg/kg)、鹿茸多肽低剂量组(YD/MI+VAPL组,100mg/kg)。除空白组外其余各组大鼠连续肌注21天氢化可的松25mg/kg并同时肌注射阿霉素造模2.2mg/kg,随后进行灌胃给药28天。检测指标如下:观察各组大鼠体征及状态;Powerlab八通道生物信号采集处理系统检测各组大鼠心电图ST段变化;苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosinstaining,HE)检测各组大鼠心肌及肾脏组织病理变化;检测心肌酶指标CK-MB、LDH和肾阳虚指标SOD、MDA、cAMP、cGMP、cAMP/cGMP的变化;利用Western Blot方法检测肾脏组织中微血管损伤相关因子HIF-1、VEGF和肾纤维化相关因子TGF-β1表达的水平,探讨鹿茸多肽预处理对大鼠“肾阳虚证”下缺血性心肌损伤的保护作用。结果:1.各组大鼠的一般状态:空白组的大鼠眼神炯炯有神,动作敏捷,毛发光泽浓密,紧贴躯体,食量和排泄均正常;在模型组大鼠中,可以看到其两眼无神,精神萎靡,行动迟缓,活动耐力下降,尾凉色暗,皮毛干枯、直立、容易脱落,蜷卧缩肩,相互扎堆,足背水肿,体重下降,食欲不振,尿量减少,便溏等心肾阳虚型特征性表现。阳性药组和鹿茸多肽高剂量组大鼠一般状态接近于正常组;鹿茸多肽低剂量组和中剂量组大鼠一般状态介于鹿茸多肽高剂量组和模型组之间;饲养期间,给药组各组大鼠均有不同程度尿量增加,其精神、皮毛、背温、饮食等一般状态与阳性药组比较差异不明显。说明鹿茸多肽能明显改善缺血性心肌损伤下的肾阳虚型大鼠的一般状态。2.心电图结果:与Normal组相比较,YD/MI组大鼠降支后ST段显著抬高,提示大鼠MI模型建立成功。与YD/MI组比较,YM组、YD/MI+VAPH、M、L组ST段抬高的水平显著降低。3.心肌病理学变化:Normal组大鼠心脏肌纤维排列有序、结构清楚、形态完整;心梗后心肌纤维排列混乱,纤维化明显,有大量的炎症细胞浸润,间隔变大。YM组,YD/MI+VAPH、M、L组均明显降低心脏组织的侵袭及纤维化度,并有明显降低的趋势。4.肾脏病理学变化:Normal组肾脏被膜完好,没有结缔组织增生,没有炎症反应;在皮层中,肾小球无明显的血管增生和萎缩的纤维化,也无明显的变性和坏死;肾脏曲小管没有出现池肿变性、玻璃样变性、坏死性改变,在髓环和集流小管中没有发现有细胞和蛋白质形成的管状结构;组织中不存在充血和各种炎性细胞的浸润;肾盂内皮结构完好,无变性,坏死,脱落现象。YD/MI组肾小球萎缩、透明样变、基膜增厚以及管腔狭窄或闭塞,小管萎缩及纤维化,硬化早期可见上皮细胞肿胀、增殖,可见瘢痕形成。YM组、YD/MI+VAPH、Decitabine细胞培养M、L组肾小球萎缩及纤维化,但均较模型组有所减轻。5.检测血清、肾阳虚、心肌相关指标含量:YD/MI组与Normal组相比,心肌酶LDH、CK-MB活力明显升高(P<0.01);YM组,YD/MI+VAPH,M组,与YD/MI组相比,其心肌酶LDH、CK-MB活力明显低于YD/MI组(P<0.05,P<0.01);YD/MI组与Normal组相比,MDA和cGMP的含量明显升高,而SOD和cAMP的含量明显下降(P<0.01)。YM组与VAPH,M组均明显低于YD/MI组(P<0.05,P<0.01),血清中的SOD、MDA、cAMP和cGMP(P<0.05,P<0.01)均有显著性差异,特别是cAMP/cGMP的数值有着显著性的差异(P<0.01)。6.Western Blot检测结果:肾纤维化相关因子:YD/MI组TGF-β1蛋白表达水平高于Normal组(P<0.05)。给药后YM组与VAPH,M组TGF-β1蛋白表达均明显低于YD/MI组(P<0.05)。微www.selleck.cn/products/gsk-j4-hcl血管损伤相关因子:与Normal组比较,YD/MI组HIF-1蛋白表达量明显上升(P<0.01)。与YD/MI组比较,给药后YM组与VAPH,M,L组HIF-1蛋白表达量降低(P<0.01)。与Normal组比较,YD/MI组中的VEGF蛋白表达量显著降低(P<0.01)。与YD/MI组比较,给药后YM组与VAPH,M组的VEGF蛋白表达升高,(P<0.01).结论:1.鹿茸多肽可调节肾阳虚证下缺血性心肌损伤的多种指标(LDH,CK-MB,SOD,MDA,cAMP,cGMP,cAMP/cGMP)的水平。它发挥治疗作用的机理,可能是通过增加心肾阳虚模型大鼠血清中SOD、cGMP的含量,降低血清中MDA、cAMP含量,从而降低体内氧自由基的累积,改善心肌过氧化损伤,调节心肌细胞内外离子浓度,延长动作电位,达到抗心肌损伤及肾阳虚的效果。2.鹿茸多肽通过TGF-β1信号通路延缓肾间质纤维化进展,从而发挥心肌的保护作用。3.鹿茸多肽可能通过HIF-1/VEGF信号通路减轻肾阳虚下心肌损伤模型大鼠微血管损伤。4.不同给药剂量的鹿茸多肽对肾阳虚下心肌损伤模型大鼠有明显的改善效果,提示其量效关系,可为其在临床上的应用提供实验室给药剂量的依据。