目的:本研究基于“痒为痛之渐,痛为痒之甚”的理论,通过2,4二硝基氟苯(DNFB)诱导的特应性皮炎(AD)小鼠模型中,观察芍药甘草汤能否缓解小鼠瘙痒症状,探索芍药甘草汤对AD小鼠非组胺依赖性瘙痒传导的影响。方法:本实验选取60只SPF级BALB/c小鼠(雌雄各半)随机分为空白组、模型组、富马酸酮替芬组、芍药甘草汤配比1组(白芍5g,炙甘草10g)、芍药甘草汤配比2组(白芍10g,炙甘草10g)、芍药甘草汤配比3组(白芍20g,炙甘草10g),每组10只。除空白组外,各组采用DNFB诱导建立小鼠AD模型,第1天在各组小鼠的颈背部皮肤处均匀涂抹100μL丙酮配置Developmental Biology的0.15%DNFB溶液,进行致敏,第8、11、14、17、20天在各组小鼠颈背部涂抹同样比例丙酮配置0.15%DNFB溶液50μL,激发和维持颈背部皮肤炎症反应。从第8天开始,空白组、模型组给予等量生理盐水,富马酸酮替芬组给予富马酸酮替芬0.33 mg/(kg·d)灌胃,芍药甘草汤配比1、2、3组分别给予芍药甘草汤3.08/(kg·d)、4.11/(kg·d)、6.16mg/(kg·d)灌胃,日行一次,持续两周(第21天),实验期间正常饮食。造模完成后,观察各组小鼠颈背部皮损表现及搔抓次数。在AY-22989 IC50最后一次干预结束后(第21天)处死小鼠,进行颈背部皮肤与DRG的新鲜取材。紧接着,进行分子实验,并分析各组数据:(1)比较各组小鼠皮损状态、搔抓次数,观察芍药甘草汤对小鼠瘙痒的影响;(2)苏木素-伊红(HE)染色观察皮损组织病理形态学改变;(3)通过ELISA检测皮肤与DRG中CXCL10蛋白表达的变化;(4)使用蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测小鼠皮肤与DRG中CXCR3、Mrpgpr A3、TRPV1蛋白表达情况;(5)RTPCR检测小鼠皮肤与DRG中CXCR3、Mrpgpr A3、TRPV1基因水平表达情况;(6)免疫荧光法检测小鼠皮肤中TRPV1的分布情况。结果:1.小鼠涂抹DNFB后,模型组小鼠的颈背部皮肤出现红色粟米状皮疹、片状破溃妆红斑、水肿、渗出、皮肤粗糙增厚等AD样皮损表现,伴随搔抓次数增加(P<0.05);芍药甘草汤配比1、2、3组与模型组相比,颈背部皮损表现有所缓解,搔抓次数明显减少(P<0.05)。2.组织病理显示,模型组小鼠皮肤组织病理表现为过度角化,棘层明显增厚,真皮内大量淋巴细胞浸润,与AD皮损病理特点一致;芍药甘草汤配比1、2、3组组小鼠皮肤组织病理表现为轻度角化,轻度表皮增厚,淋巴细胞数目增加。3.与模型组小鼠相比,芍药甘草汤组小鼠皮肤与DRG中CXCL10含量降低(P<0.05)。4.在皮肤中,与模型组相比,芍药甘草汤配比1、2、3组小鼠的CXCR3、Mrpgpr A3、TRPV1蛋白与基因表达均呈显著性下降(P<0.05)。5.在DRG中,与模型组相比,芍药甘草汤组小鼠的CXCR3的基因表达下降(P<0.05),芍药甘草汤组小鼠的Mrpgpr A3、TRPV1蛋白与基因表达有升高有降低,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:芍药甘草汤能改善DNFB诱导的小鼠AD样皮损表现,减轻瘙痒、炎性水肿及渗出,减少炎症细胞浸润,并降低CXCL10、CXCR3、Mrgpr A3、TRPCeralasertib作用V1表达,这可能是芍药甘草汤治疗AD小鼠非组胺依赖性瘙痒传导的机制之一,为芍药甘草汤治疗瘙痒提供思路。