羟氯喹抑制MEK/ERK/ROS通路减少中性粒细胞胞外诱捕网形成改善葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎

目的：探讨羟氯喹（hydroxychloroquine,HCQ）对葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium salt,DSS）诱导的结肠炎模型鼠肠道炎症的影响及其影响中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular trap,NET）形成的机制。方法：雄性C57BL/6鼠随机分为正常组、DSS组（自由饮用3%DSS溶液+200μL纯水每天灌胃）、DSS+HCQ组[自由饮用3%DSS溶液+200μL HCQ(60 mg/kg)每天灌胃]。评估小鼠疾病活动指数（disease GDC-0973临床试验activity index,DAI），造模7 d后处死小鼠，分析小鼠结肠长度，肠组织HE染色评估肠道炎症水平，荧光显微镜及荧光酶标仪检测各组小鼠结肠组织NET水平。收集志愿者外周血提取中性粒细胞进行细胞实验，荧光显微镜及荧光酶标仪检测NET水平，DCFH-DA荧光探针孵育后荧光酶标仪检测活性氧（reactive oxygen speMedian speedcies,ROS）水平，蛋白质印迹法检测p-MEK、MEK、p-ERK、ERK蛋白水平。结果：HCQ减轻DSS诱导的小鼠结肠炎并可抑制结肠炎模型鼠肠组织中NET形成。在细胞实验中，HCQ可抑制体外培养中性粒细胞ROS释放和NET形成，同时抑制MEK/ERK信号通路的激活。MEK激动剂C16-PAF可逆转HCQ对MEK/ERK信号通路的抑制作用，增加ROS的释放，并增加NET的形成。结论：HCQ可减https://www.selleck.cn/products/Decitabine.html轻DSS小鼠肠道炎症，机制可能是通过抑制中性粒细胞MEK/ERK信号通路，减少ROS释放，从而减轻NET导致的肠道损伤。