目的:评价注射用重组新蛭素治疗急性冠脉综合征(ACS)的效果和安全性,为进一步的临床研究提供参考。内容:通过犬冠状动脉血栓模型评价新蛭素的临床前药效学特征;通过I期临床试验评价新蛭素在健康受试者的安全性、耐受性和药代动力学特NN2211细胞培养征;通过ACS患者评价新蛭素应用于患者的安全性、耐受性、药效学特征和药代动力学特征;通过大鼠动静脉旁路模型探究新蛭素及其活性产物水蛭素在血栓和外周血中的分布情况;通过大鼠的脊髓损伤模型,探究新蛭素在脊髓损伤后预防深静脉血栓的作用。方法:1)通过Folt法建立比格犬冠状动脉血栓模型,经股静脉注射生理盐水、新蛭素0.3、1.0和3.0 mg/kg及阳性对照药物低分子肝素(LMWH)85 IU/kg,观察对犬冠状动脉血栓形成的抑制效果及出血风险。2)I期临床试验:44名健康受试者采用剂量递增(0.2-2.0 mg/kg)静脉推注单次给药,18名健康受试者分为0.15、0.30、0.45 mg/kg/h 3个剂量组,静脉持续给药24小时,观察新蛭素在健康受试者中的安全性、耐受性和药代动力学特征。3)24例ACS患者分为低、中、高3个剂量组,静脉推注新蛭素0.4 mg/kg后,分别静脉滴注0.15、0.30、0.45 mg/kg/h 3天或5天,给药后评价新蛭素的安全性、耐受性、药效学和药代动力学特征。4)制备大鼠动静脉旁路模型,尾静脉给予生理盐水、新蛭素3、6、12和18 mg/kg/h,或阳性对照药水蛭素2.88 mg/kg/h,观察新蛭素及其活性产物水蛭素在血栓和外周血中的分布情况。5)用Allen法建立大鼠脊髓损伤模型,再用结扎法诱导大鼠下腔静脉血栓形成。通过研究新蛭素对脊髓损伤并发深静脉血栓形成的剂量-时间效应关系以及多重剂量-效应关系,观察新蛭素在脊髓损伤后预防深静脉血栓的效果及出血风险。结果和结论:1)新蛭素可以剂量依赖性抑制犬冠状动脉血栓形成,0.3、1.0和3.0 mg/kg新蛭素对犬冠状动脉血栓形成的抑制作用分别为66.7%、83.3%和100%,EH在0.3~3.0 mg/kg剂量范围内对冠状动脉血栓形成有显著的剂量依赖性抑制作用。在新蛭素和LMWH作用强度相近的情况下,新蛭素30min的出血时间较短,30~120 min的出血量较少(P<0.05和P<0.05~0.001)。新蛭素抗血栓形成作用与LMWH相似时,其出血副作用低于LMWH。2)新蛭素在健康受试者中进行的单次给药和持续给药的安全性高、耐受性好,且没有严重不良事件出现。单次给药和持续给药后,血清新蛭素浓度在5 min时达到峰值,且随给药剂量的增加暴露量增加。新蛭素的平均半衰期(T1/2)为1.7~2.5h,清除率(Cl)为123.9~179.7 m L/h/kg,表观分布体积(Vd)为402.Galunisertib体内7~615.2 m L/kg。3)新蛭素在ACS患者中是安全的、耐受的,未发生严重的不良事件或不良反应,未发生入选30天内卒中及体循环栓塞、心肌梗死、需要紧急血运重建的复发、死亡,即未出现临床复合终点。与试验药物相关的药物不良反应均较轻,包括血红蛋白降低、网织细胞百分比和网织细胞计数增加。新蛭素的低、中、高剂量组治疗后的APTT和TT较治疗前均显著升高,凝血酶活性在给药后明显下降,停药后恢复至正常水平。在给药剂量范围内,新蛭素的暴露随给药剂量的增加而增加,半衰期约为2 h。4)在大鼠动静脉旁路模型中,新蛭素持续给药15 min、持续给药1 h、停药后1 h,均可剂量依赖性减小血栓湿重,对血栓形成有抑制作用。新蛭素在血栓周围血浆和外周血血浆中含量差别不明显,血栓匀浆液中可检测到明显的新蛭素。此外,外周血血浆、血栓周围血浆及血栓匀浆液中均可检测到水蛭素,且血栓周围血浆及血栓匀浆液中的水蛭素水平稍高于外HCC hepatocellular carcinoma周血血浆。提示新蛭素可在血栓局部转变成水蛭素发挥抗血栓作用,对全身外周凝血系统影响较小。5)新蛭素预防脊髓损伤后静脉血栓实验中,剂量效应结果表明新蛭素可以剂量依赖性降低血栓重量。时间效应结果表明,新蛭素对血栓形成的抑制作用在脊髓损伤后2小时给药作用最为明显。多次给药可以增加新蛭素抑制血栓的作用,而不增加出血风险。脊髓损伤后给予新蛭素既不会增加受伤脊柱出血,也不会损害神经功能。新蛭素能有效减少脊髓损伤大鼠血栓的形成,且出血副反应较低分子肝素明显减轻。综上,新蛭素即可有效抑制血栓的形成,又明显降低了出血副作用,为急性冠脉综合征患者提供了一种有效、安全性更好的新型抗凝药物。