目的:本研究基于既往工作的基础,对云南省傣族人群地中海贫血、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的基因进行诊断,通过恶性疟原虫侵染患有这两种疾病的人以及正常人的红细胞,了解有缺陷的红细胞和正常红细胞之间的原虫侵染情况是否存在差异,以此了解疟疾流行程度与上述疾病的关系。方法:1.采集云南省德宏州盈江县弄璋镇傣族人群的全血样本;2.对全血样本进行地中海贫血的基因诊断、G6PD缺乏症的酶活性检测以及基因突变位点分析;3.使用恶性疟原虫株3D7对患有地中海贫血、G6PD缺乏症疾病的人以及正常人的红细胞进行侵染。4.应用光学显微镜、分析型流式细胞仪、化学发光仪、酶联免疫检测仪对体外培养的疟原虫进行形态学观察、感染率以及疟色素含量的测定。5.应用透射电镜技术对培养过程中的红细胞和疟原虫内部结构变化进行深层次分析,了解它们在微观视野中的变化。结果:1.基因诊断结果:地中海贫血基因诊断结果:52份样本中selleck LEE011有地贫患者共28例。其中α-地贫的占比最高,α复合β地贫的占比最少,二者比较有显著差异性(P<0.05,Fisher's exact test)。G6PD缺乏症的基因型、构成比结果:本次样本中,G6PD缺乏症患者共有29例,女性占比高于男性,统计学分析有显著差异性(P<0.0001,Fisher's exact test);G6PD基因突变位点以1311 C>T位点占比最高,和392 G>T位点的占比比较有统计学差异(P<0.01,Fisher's exact test)。2.光学显微镜结果显微镜观察样本血涂片:1)地中海贫血、G6PD缺乏症以及同时具有两种疾病的患者:它们的红细胞在体外培养Adenovirus infection恶性疟原虫96小时后,观察红细胞外形,大多出现了细胞皱缩、畸形的情况;观察疟原虫生活史红内期发育阶段,疟原虫出现了发育迟缓以及入侵、寄生红细胞困难等问题,导致虫体胞质分散呈现不健康的状态。2)正常红细胞:观察红细胞外形,形态正常,并未出现红细胞淡染区消失或其他特殊形态;观察疟原虫生活史红内期发育阶段,疟原虫发育时期较一致,虫体状态较好。原虫密度的统计学分析:正常人红细胞比地中海贫血、G6PD缺乏症以及同时具有两种疾病的患者红细胞培养的恶性疟原虫的原虫密度高,统计结果均具有显著性差异(P<0.05,One Way ANOVA)。但有缺陷的红细胞培养恶性疟原虫,原虫密度比较没有统计学差异。3.原虫感染率结果:1)流式细胞仪:地中海贫血比G6PD缺乏症、合并两种疾病的的患者红细胞的原虫感染率低,统计学结果具有显著差异(P<0.05,One Way ANOVA)。正常人比地中海贫血、G6PD缺乏症、合并两种疾病的患者的红细胞的原虫感染率高,统计学结果具有显著性差异(P<0.0001,One WayMRTX1133供应商 ANOVA)。2)化学发光仪:地中海贫血和G6PD缺乏症、合并两种贫血的患者的红细胞之间比较原虫感染率,结果没有统计学差异。正常人比地中海贫血、G6PD缺乏症、合并两种疾病的患者红细胞的原虫感染率高,统计学结果具有显著性差异(P<0.0001,One Way ANOVA)。以上原虫感染率的比较结果均证明,正常红细胞更容易被疟原虫侵染。4.透射电子显微镜结果:有缺陷的红细胞(地中海贫血和G6PD缺乏症、合并两种贫血的患者的红细胞)培养后多出现外形显著改变,形态奇异,呈不规则形、长尾状等。除了外形多变,胞质内空泡多见且细胞膜表面不完整,有局部或多处崩解。正常人的红细胞电镜下外形规则、大小均一,胞膜完整少有开口。结论:1.云南省傣族人群的样本中,α-地贫比β-地贫的占比高;G6PD缺乏症的5个常见的基因突变位点的类型以1311 C>T为主;2.有缺陷的红细胞在培养恶性疟原虫后多出现红细胞变形以及原虫发育迟缓等问题,而正常人的红细胞培养疟原虫后依旧保持外形正常,且原虫发育不受限。3.正常红细胞相比地中海贫血、G6PD缺乏症患者的红细胞,恶性疟原虫更易侵染。4.电镜下,有缺陷的红细胞在培养后,红细胞外形多变,胞质内出现许多大空泡。