目的:通过体外实验,探讨姜黄素是否能够通过抑制高糖环境下大鼠肾小球内皮细胞的坏死性凋亡,减轻内皮细胞的死亡和炎IACS-10759配制症因子的表达,进一步降低细胞炎症反应和减轻肾小球内皮细胞损伤。方animal biodiversity法:对大鼠肾小球内皮细胞进行体外培养,将其根据不同干预条件随机分为以下四组,分别为正常组(NG)、高糖组(HG)、甘露醇组(MG)、高糖+姜黄素组(HG+Cur),其中正常组葡萄糖浓度为5.5mmol/L、高糖组葡萄糖浓度30mmol/L、甘露醇组葡萄糖浓度5.5mmol/L+甘露醇浓度24.5mmol/L、高糖+姜黄素组为葡萄糖浓度30mmol/L+40μmol/L姜黄素。CCK8检测姜黄素的最佳药物浓度组及各组间rRGECs的活性。免疫细胞化学法(ICC)检测各组TNF-α、RIP1、RIP3、MLKL、IL-18、MCP1蛋白的定位及表达情况。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组TNF-α、RIP1、RIP3、MLKL、IL-18、MCP1的mRNA扩增情况。蛋白印迹法(WB)检测各组TNF-α、RIP1、RIP3、IL-18、MCP1的蛋白及MLKL和RIP3磷酸化的蛋白的表达。结果:1、采用CCK8检测不同浓度的姜黄素干预后培养48小时肾小球内皮细胞的活力可以得出姜黄素的最佳浓度为40μmol/L。2、CCK8法检测各组rRGECs的活性,实验结果表明HG组与NG组、MG组、HG+Cur组相比,细胞活力明显下降(P<0.05),余组间细胞活力差异无统计学意义(P>0.05)。3、ICC检测结果表明:TNF-α、RIP1、RIP3、MBIBW2992 NMRLKL和IL-18、MCP1主要在rRGECs胞浆中表达,HG与NG组和MG组相比,rRGECs内上述指标的蛋白表达均出现升高趋势(P<0.05);HG+Cur组与HG组相比,细胞内上述指标的蛋白表达均出现下降趋势(P<0.05),上述指标的蛋白在NG、MG、HG+Cur组表达均无显著性差异(P>0.05)。4、RT-PCR检测结果为:与NG组和MG相比,HG组rRGECs内TNF-α、RIP1、RIP3、MLKL、IL-18、MCP1的mRNA表达均升高(P<0.05),与HG组相比,HG+Cur组rRGECs内上述指标的mRNA表达均下降(P<0.05),余组间上述指标的mRNA表达均差异无统计学意义(P>0.05)。5、WB检测结果:HG与NG组和MG相比,HG组rRGECs内TNF-α、RIP1、RIP3、IL-18、MCP1的蛋白及MLKL和RIP3磷酸化的蛋白表达均升高(P<0.05),与HG组相比,HG+Cur组上述指标的蛋白表达均下降(P<0.05),余组间上述指标的蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:通过姜黄素干预后大鼠rRGECs中的TNF-α、RIP1、RIP3、IL-18、MCP1的蛋白及MLKL和RIP3磷酸化的蛋白均出现明显下降。表明姜黄素可能部分阻断TNF-α,从而抑制坏死性凋亡通路,达到减轻高糖环境下肾小球内皮细胞的死亡和IL-18、MCP1炎症因子的表达,从而进一步减轻rRGECs炎症反应及损伤。