基于SCF/c-kit信号通路探讨艾灸干预对腹泻型肠易激综合征大鼠免疫功能稳态的影响

目的:观察艾灸对IBS-D模型大鼠干细胞因子(SCF)/酪氨酸激酶受体(c-kit)信号通路及免疫功能的影响,探讨艾灸干预IBS-D的机制。方法:将6只健康SPF级孕鼠产下的52只幼鼠随机分为正常组12只,剩余40只采用母子分离、醋酸灌肠、慢性束缚应激三因素联合复制IBS-D大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型组、艾灸组、西药组,每组12只。艾灸组予悬灸“天枢”“上巨虚”,西药组予3 mL利福昔明(150 mg/kg)悬浊液灌胃,连续干预7 d。分别于醋酸灌肠前(35日龄)、造模后(45日龄)、干预后(53日龄)检测各组大鼠体质量、稀便率(LSR)、引起腹部回缩反射(AWR)达3分时最小容量阈值及内脏敏感性;干预后(53日龄),HE染色观察大鼠结肠组织形态,测定脾脏及胸腺脏器系数,ELISA法检测DNA-based biosensor血清炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-10、IL-8]、CD_(4)~(+)、CD_(8)~(+)、CD_(45)~(+)、IgA、IgG、IgM含量,实时荧光定量PCR法、Western blotLaduviglusib临床试验法检测大鼠结肠组织SCselleck化学F、c-kit mRNA及蛋白表达,免疫荧光染色法检测大鼠结肠组织SCF、c-kit蛋白阳性表达。结果:与正常组比较,模型组体质量、AWR达3分时最小容量阈值降低(P<0.01),LSR、脾脏及胸腺脏器系数与血清TNF-α、IL-8、CD_(4)~(+)、CD_(8)~(+)、CD_(45)~(+)、IgA、IgG、IgM含量升高(P<0.01),血清IL-10与结肠组织SCF、c-kit蛋白及mRNA表达降低(P<0.01),SCF、c-kit蛋白阳性表达降低(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和西药组体质量升高(P<0.01, P<0.05),LSR、脾脏及胸腺脏器系数与血清TNF-α、IL-8、CD_(4)~(+)、CD_(8)~(+)、CD_(45)~(+)、IgA、IgG、IgM含量降低(P<0.01,P<0.05),AWR达3分时最小容量阈值、血清IL-10与结肠组织SCF、c-kit蛋白及mRNA表达升高(P<0.01),SCF及c-kit蛋白阳性表达升高(P<0.01)。与西药组比较,艾灸组血清CD_(4)~(+)含量降低(P<0.05),CD_(4)~(+)/CD_(8)~(+)值升高(P<0.01),其余指标差异无统计学意义(P>0.05)。SCF、c-kit mRNA表达与AWR达3分时最小容量阈值、IL-10呈正相关(P<0.01),与其余指标均呈负相关(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸干预可降低IBS-D模型大鼠内脏高敏感性,改善其腹痛、腹泻等症状,其作用机制可能与下调SCF/c-kit信号通路的表达、改善IBS-D免疫功能状态有关。