基于p53/AMPK/mTOR信号通路调控细胞自噬探讨益气扶正解毒汤抑制Lewis肺癌小鼠皮下肿瘤生长的作用机制

目的 观察益气扶正解毒汤(YQT,黄芪、麦冬、黄芩等)对 Lewis 肺癌小鼠皮下肿瘤生长的影响,并基于 p53/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控细胞自噬探讨其可能的作用机制。方法 采用 Lewis 肺癌细胞构建 CR428化学结构57BL/6 小鼠皮下肿瘤模型,随机分为模型组、顺铂组(3 mg·kg~(-1))及YQT 低、中、高(8.7、17.4、34.8 g·kg~(-1))剂量组,每组 8 只。造模后第 7 天开始,YQT 组予以相应剂量灌胃给药,每日 1 次,连续 21 d。采用 HE 染色法观察肿瘤组织的病理变化;免疫组化法检测肿瘤组织 Ki67 的表达;透射电镜检测肿瘤组织自噬小体数量;RT-PCR 法检测肿瘤组织自噬相关蛋白 LC3、Beclin-1、Atg5、Atg7mRNA 表达水平;Western Blot 法检测 LC3、Beclin-1、p62、Atg5、Atg7 和 p53/AMPK/mTOR 通路蛋白表达水平。结果 与顺铂组比较,YQT 高剂量组的抑瘤率无明显差异(P>0.05)。与模型组比较,YQT 各剂量组小鼠皮下肿瘤的体积明显缩小(P<0.05),肿瘤质量均明显降低(P<0.05),病理切片显示肿瘤组织有较多的坏死区域,肿瘤组织中的自噬小体数量明显增加,LC3Ⅱ/Ⅰ、Becduration of immunizationlin-1、Atg5 蛋白表达明显上调(P<0.05);YQT 中、高剂量组小鼠肿瘤组织中 Ki67 蛋白表达明显下调(P<0.05),Atg7、p53、磷酸化 AMPK(p-AMPK)/AMPK 蛋白表达明显上调(P<0.05),p62、磷酸化 mTOR(p-mTOR)/mTOR 蛋白表达明显下调(P<0.05);YQT 高剂量组小鼠肿瘤组织的 LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、Atg5、Atg7 mRNA 表达明显上调(P<0.05)。结论 YQT 可能通selleck合成过 p53/AMPK/mTOR 信号通路上调细胞自噬水平,抑制 Lewis 肺癌小鼠皮下肿瘤生长及肿瘤细胞增殖。