目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)改善糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)糖脂代谢紊乱的作用靶点和分子机制。方法1.构建RSV与DN共同靶点的PPI网络,并运用Cytoscape 3.7.0及VarElect等工具分析筛选出RSV治疗DN的核心靶点;对关键靶点基因进行GO富集分析与及KEGG通路富集分析;最后运用AutoDock Vina分子对接程序模拟RSV与核心靶点的结合情况并进行可视化。2.根据网络药理学构建的“药物-靶点-疾病”网络预测结果,选择雄性Wistar大鼠,构建高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的DN模型进行体内实验验证,分为正常组(NC组)、模型组(DM组)和给药组(DR组,RSV30 mg/kg/d 灌胃)。3.12周后对大鼠进行血样收集和肝肾组织解剖,测定空腹血糖(FBG)、TC、TG、LDL-C、HDL-C、尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)水平:测定肝脏、肾脏重量和大鼠体重,计算肝脏系数和肾脏系数。通过HE染色和PAS染色观察肝脏和肾脏组织病理学改变。用Western blot法检测肝脏中p-PDK1和p-AKT水平,免疫荧光法和Western blot检测肝肾组织中HIF-1α蛋白表达情况,RT-qPCR法测定肝肾组织中Glut1和Ldlr mRNA水平。结果1.分析得到RSV治疗DN靶点128个,其中核心靶点为ABaf-A1KT1、IL1B、INS、JUN和STAT3,主要关联DN糖脂代谢中HIF-1信号通路、FoxO信号通路和TNF信号通路等7个通路,涉及平滑肌细胞增殖的正调控、对药物的反应和炎症反应等生物学过程;分子对接结果显示,5个核心靶点的结合能均低于-5.0 kcal/mol,且均与RSV形成氢键,其中AKTselleck合成1与RSV结合活性最高。2.DM 组大鼠 FBG、TC、TG、LDL-C、HDL-C、BUN、Scr、肝脏系数和肾脏系数较NC组均显著增加,而体重明显降低;RSV干预12周后,以上各项指标除HDL-C、肾脏系数和体重外均有明显改善(P<0.05或P<0.01)。3.DM组大鼠肝脏出现明显的脂肪变性、炎性浸润和肝糖原减少的病理变化,肾脏组织中出现糖原堆积、肾小球增大、肾小管基底膜增厚并伴有肾间质灶性炎性细胞浸润,而在DR组大鼠肝肾组织中以上病理改变均得到有效改善。4.DM组大鼠肝脏的p-PDK1和p-AKT以及肝肾组织medical biotechnology中HIF-1α蛋白表达水平较NC组均显著升高,肝肾组织的Glut1 mRNA水平显著升高,Ldlr mRNA水平显著下降。给药后可明显改善上述蛋白和mRNA的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论1.通过网络药理学预测发现RSV可能通过靶向AKT1、IL1B、INS、JUN和STAT3等核心靶点,参与调控HIF-1、FoxO等信号通路,发挥调节DN糖脂代谢作用。2.动物实验初步验证了网络药理学预测的准确性,结果提示RSV可能通过抑制PDK1/AKT磷酸化和HIF-1α表达,使下游靶基因Glut1表达下调、Ldlr表达上调,从而改善DN糖脂代谢紊乱并减轻肾损伤,以达到延缓DN进展的目的。