基于斑马鱼模型的杠柳毒苷的心毒性评价

目的基于斑马鱼模型初步探讨香加皮的“效-毒”成分杠柳毒苷的心脏毒性和潜在作用机制。方法将3dpf（3dayspostfertilization）的斑马鱼暴露于不同浓度的杠柳毒苷溶液中48h，统计杠柳毒苷对斑马鱼的致死率；在亚致死浓度剂量（sublethalconcentration，LC_(10)）下（＜LC_(10)），基于心包水肿程度、心率变化、细胞凋亡等指标评杠柳毒苷的心脏毒性；通过网络药理学方法和分子对接技术预测杠柳毒苷心毒性潜在作用靶点及通路，并通过实时定量聚合酶链反应(realtimequantitativepolymerasechainreactitendon biologyon，RT-qPCR)）对预测机制进行验证。结果杠柳毒苷对斑马鱼的LC_(10)为1.816 2 μg·mL~(-1LY294002)，亚致死剂量条件下，与空白组相比，杠柳毒苷能够引起斑马鱼心率异常增高、不同程度的心包水肿以及明显的心肌细胞凋亡，具有显著的心脏毒性。杠柳毒苷诱导心毒性与41个潜在作用靶点有关，共涉及脂质动脉粥样硬化通路、血小板活化，糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等，且RT-qPCR进一步验证以上预测结果。结论杠柳毒苷可诱发斑马鱼心脏毒性MLN4924分子量，临床应用中药香加皮时需特别关注剂量、适应证等问题。