目的:Ghrelin作为一种具有镇痛作用的内源性多肽,近年来广受研究者的关注。通过本实验组前期实验,证实了 ghrelin及其活性片段在急性痛中有较好的镇痛效果。Ghrelin活性片段有辛酰基化结构,也具有透过血脑屏障的功能。内吗啡肽作为μ阿片受体的内源性配体,具有良好的镇痛作用,其副作用相较于吗啡有所减少,但仍无法透过血脑屏障。本实验室通过将ghrelin活性片段同内吗啡肽结合形成基于μ-阿片/ghrelin 受体的杂合肽 ghrelin(1-5)-EM2、EM2-ghrelin(1-5)、ghrelin(1-9)-EM2以及EM2-ghrelin(1-9)。通过本实验组前期实验,在所合成的几种杂合肽中,ghrelin(1-5)-EM2对于急性痛以及神经病理痛都具有很好的镇痛效果,耐受程度低。因此,本实验将首先研究四种杂合肽的血脑屏障透过性,其次研究ghrelin(1-5)-EM2在角叉菜胶、醋酸扭体、福尔马林炎症痛中的镇痛作用,以及在CFA慢性炎症痛中的镇痛作用及机制,为后续相关研究奠定基础。方法:采用固相合成法合成4种杂合肽后,将其与Cy7连接后经活体小动物成像系统,探究其是否具有血脑屏障透过性。建立四种炎症痛模型(角叉菜胶、福尔马林、醋酸扭体及CFA慢性炎症痛),通过行为学测试研究ghrelin(1-5)-EM2的镇痛作用。Panobinostat说明书在CFA慢性炎症痛模型,通过连续给药方式研究杂合肽ghrelin(1-5)-EM2是否产生耐受,HE染色检测其对于炎症部位病理状态的改善,以及采用Western blot和免疫荧光染色研究其在CFA慢性炎症痛中的镇痛作用机制。结果:1.杂合肽ghrelin(1-5)-EM2可以透过血脑屏障。2.鞘内注射ghrelipatient medication knowledgen(1-5)-EM2在四种炎症痛模型中均具有显著有效的镇痛作用。3.Ghrelin(1-5)-EM2在CFA慢性炎症痛中连续鞘内注射产生良DS-3201纯度好的镇痛作用且未产生耐受作用,对小鼠炎症部位皮肤存在一定程度的改善作用。4.Ghrelin(1-5)-EM2的镇痛作用可以被生长激素促分泌受体1α(GHS-R1α)拮抗剂以及阿片受体拮抗剂所拮抗。5.CFA慢性炎症痛中,连续注射ghrelin(1-5)-EM2后,血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)浓度无显著变化。6.通过Western blot和免疫荧光染色实验,分析得出ghrelin(1-5)-EM2在CFA慢性炎症痛中,通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路以及抑制非选择性阳离子通道TRPV1激活发挥其镇痛作用。结论:Ghrelin(1-5)-EM2在角叉菜胶、福尔马林、醋酸扭体及CFA慢性炎症痛中能产生有效显著的镇痛作用,且可以透过血脑屏障。Ghrelin(1-5)-EM2在CFA慢性炎症痛中不产生耐受作用,且通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路以及抑制非选择性阳离子通道TRPV1激活发挥其镇痛作用,对于炎症部位皮肤有改善作用。