蛋白质和生物活性分子作为重要的生命物质,在整个生物发展过程及维持人类正常生命活动中都发挥重大的意义,蛋白质翻译后修饰能够协调并控制绝大多数蛋白的活跃程度,其中,蛋白质磷酸化、糖基化几乎在每个生物的各个方面都扮演着重要的角色,例如基因转录、信号转导、肿瘤发生等。生物活性分子如葡萄糖和唾液酸糖苷水平在疾病发生发展过程中也具有非常重要的作用,其中高血糖是导致心血管病死亡的一个独立的危险因素,葡萄糖可能通过影响胆固prescription medication醇在巨噬细胞的流动而加速巨噬细胞的泡沫化,从而诱导动脉粥样硬化病变的发生。过氧亚硝酸盐(ONOO~-)是一种高活性的活性氧,是重要的生物氧化剂,可在体内生成各种有毒物质,从而引起体内DNA损伤和细胞死亡。因此,多种活性物种的同时识别检测以及了解生物活性分子之间的作用关系对于探究疾病的发病机制是至关重要的。基于此,该论文利用金属有机框架PCN-224后修饰I_3~–Rh B缔合物与BSA包封小分子荧光探针分别设计了I_3~–Rh B@PCN-224和BSA-AB两种纳米荧光探针,分别实现了蛋白质磷酸化与葡萄糖水平和唾液酸与ONOO~-水平的同时检测与成像分析,探究了早期动脉粥样硬化(AS)老鼠血清中相关生物活性分子的水平变化。具体工作内容如下:1、利用金属有机框架PCN-224与I_3~–Rh B缔合物之间的静电吸附作用,构建了可同时识别葡萄糖和磷酸化位点的纳米荧光探针I_3~–Rh B@Pselleck HPLCCN-224,深入研究了动脉粥样硬化早期未形成斑块阶段蛋白质磷酸化与葡萄糖水平变化。利用荧光光谱检测实现了对葡萄糖和磷酸化位点的体外同时检测,并且证明确认细节了探针无细胞毒性,实现了在细胞中的成像分析,利用卟啉和葡萄糖识别单元双光子特性的优势,可以有效的降低背景荧光,提高成像灵敏度。最后通过高脂饮食喂养构建了AS大鼠模型,通过双光子荧光成像观察了早期AS老鼠模型中蛋白质磷酸化和葡萄糖的水平变化,结果显示早期AS老鼠体内蛋白质磷酸化和葡萄糖水平高于正常老鼠。该研究为进一步探究动脉粥样硬化的发病机理及早期诊断提供了合适的荧光工具。2、利用BSA包封两个小分子荧光探针制备了纳米复合探针BSA-AB,分别研究并制备了以2,7-二氨基芴为荧光团,以硼酸为活性中心的荧光探针FBA和以荧光素为荧光团,以硼酸为识别基团的荧光探针FIB,然后用牛血清白蛋白(BSA)包裹,合成的纳米复合探针BSA-AB在体外实现了对唾液酸和ONOO~-的同时荧光检测。并且证明探针无细胞毒性,可以用于体内成像分析,检测了早期AS老鼠血液与组织中SA与ONOO~-的水平变化,结果显示早期AS老鼠体内SA与ONOO~-水平高于正常老鼠。该工作为研究SA与ONOO~-相关的信号通道来揭示疾病机制提供新的分析方法。