胆管癌是一种比较罕见的恶性肿瘤,但被诊断时一般是很难治愈的后期,且由于胆管癌具有强异质性、强侵袭性,有效治疗药物较少。斑蝥素是从传统中药斑蝥中提取的一种半萜烯化合物,具有良好的抗癌作用,但斑蝥素存在着较大的副作用,这大大限制了斑蝥素在临床的应用。研究发现人工脱去斑蝥素的1,2位甲基能够形成一种新的衍生物去甲斑蝥素,去甲斑蝥素既保留了斑蝥素的抗癌活性又降低了其临床的副作用,但目前去甲斑蝥素治疗胆管癌的研究仍鲜有报道。本文以网络药理学的方法预测并结合胆管癌体外细胞模MG132型进行实验验证,初步探究去甲斑蝥素抗胆管癌的作用机制。本研究首先基于细胞生物学等相关研究手段探究去甲斑蝥素对胆管癌的体外抑制作用,再利用网络药理学结合分子对接技术预测了去甲斑蝥素抗胆管癌的靶点及作用机制,最后利用细胞生物学与分子生物学的方法进行验证,为去甲斑蝥素应用于胆管癌的临床治疗提供基础理论依据。主要结果如下:(1)本研究利用CCK8法、集落形成实验、划痕愈合实验证实了去甲斑IACS-10759价格蝥素可抑制胆管癌细胞系QBC939、Hu CCT1的体外增殖,且呈现Genetic therapy浓度与时间依赖性;并可抑制胆管癌细胞系QBC939、Hu CCT1的细胞迁移能力、集落形成能力,且呈现浓度依赖性。流式细胞术分析表明去甲斑蝥素能调控胆管癌细胞系QBC939、Hu CCT1发生G2/M期阻滞。(2)本研究利用网络药理学预测了去甲斑蝥素抗胆管癌的重要作用靶点,并使用分子对接与Western blot对EGFR、PTGS2、CASP3进行了验证。结合网络药理学预测结果,表明去甲斑蝥素可能通过诱导细胞凋亡发挥抗胆管癌作用。(3)本研究利用荧光染色、流式细胞术进一步验证了以上结果:去甲斑蝥素通过诱导细胞凋亡抗胆管癌作用,并且Western blot法从蛋白水平上证明去甲斑蝥素能对内源性凋亡途径相关蛋白表达进行调控,说明去甲斑蝥素通过Caspase依赖的内源性凋亡途径诱导胆管癌细胞凋亡,从而起到抗胆管癌作用。