鸽乳形成期间,种鸽嗉囊会发生明显的形态学变化,且种鸽血液中的催乳素含量会显著上升。Hippo通路被证实在多种组织器官发育过程中起重要作用,但其是否参与种鸽嗉囊增生尚未见报道。本试验采用RT-PCR和Western Blot技术开展了 Hippo通路相关基因在不同繁殖期种鸽嗉囊中的表达规律的研究,并通过免疫组化技术对Hippo途径效应蛋白YAP在嗉囊上皮中的组织分布;此外还通过活体注射试验验证了催乳素是否通过调控Hippo途径参与嗉囊组织增生。主要研究结果如下:(1)种鸽嗉囊组织在孵化期17天(117)和哺育期第1天(R1)显著增生,通过HE染色观察到嗉囊上皮出现的“钉突”结构不断增长并出现分叉,“钉突”间充满了增殖且即将脱落的上皮细胞,随后嗉囊上皮逐渐退化,并在哺育末期恢复到静息期水平。(2)雌雄鸽嗉囊组织Hippo途径相关基因:上游激酶SA V1、STK3、LATS1、效应蛋白YAP、下游因子TEAD3、CTGF、SOX2、SNAI2和C-Myc的mRNA水平相较于非增殖期(I4和R25)均显著上调;相关性分析表明,LATS1、STK3、TEAD3、C-Myc以及SOX2 mRNA表达量与雄鸽嗉囊表皮厚度呈显著正相关(P<0.05);而在雌性中,嗉囊表皮厚度与SA V1、STK3、TEAD3、CTGF和C-Myc基因表达量呈显著正相关(P<0.05)。结果表明Hippo途径与鸽嗉囊组织增生存在关联性。(3)相较于孵化期第4天(14)和哺育期第25天(R25),雌雄鸽嗉囊中LATS1、YAP、CTGF蛋白表达水平均在117和R1显著升高(P<0.05)selleck HPLC;且pYAP水平均在117显著下降(P<0.05)。雌雄鸽嗉囊上皮中YAP富集程度在117和R1时期显著升高(P<0.05)。进一步表明,Hippo途径在嗉囊增殖过程中发挥重要作用。(4)鸽嗉囊局部注射5 μg(连续注射6天)的催乳素能够显著促进嗉c-Met抑制剂囊上皮增殖,并诱导Hippo途径效应分子YAP蛋白磷酸化水平的降低,促进其在嗉囊上皮中富集;下游因子CTGF转录及蛋白表达显著增强。在此基础上注射1 mg(连续注射6天)的Hippo途径抑制剂Verteporfin(VP)可在一定程度上抑制催乳素所诱导的嗉囊增生,显著抑制YAP的转录及下游因子CTGF的蛋白水平,但并不影响YAP总蛋白水平;EdU检测结果显示,注射催乳素组的鸽嗉囊上皮细胞EdU阳性率显著高于对照组及催乳素+VP组,表明催乳素可能通过Hippo途径调控鸽嗉囊上皮细胞增殖。综上所述,鸽嗉囊增殖过程可能受Hippo途径效应分子YAP及其下游转录因子C-Myc、CTGF、SOX2的影响。PRL可能通过下调HippDigital mediao信号通路上游激酶LATS1和SAV1的基因表达,促进YAP及下游转录因子CTGF的表达进而促进嗉囊上皮细胞增殖从而参与鸽乳的形成。