不同激活剂对人富血小板血浆释放曲线的影响

目的对比分析不同激活剂对富血小板血浆(PRP)中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及血小板源性生长因子(PDGFRP56976试剂-AB)释放曲线的影响。方法抽取10名健康成年志愿者外周静脉全血36 ml,采用二次离心法自制PRP;按1 000 U凝血酶溶于1 ml 10%氯化钙溶液制备血小板激活剂。按10:1的容量比将PRP与激活剂混合(凝血酶IACS-10759浓度-PRP组);按10:1的容量比将PRP与10%氯化钙混合(氯化钙-PRP组);分别以新鲜全血(全血组)以及未加血小板激活剂的PRP(PRP组)为对照组,将上述4组在37℃温水中孵育0、1、8、24、72和168 h,采用ELISA法测定各组不同时间点的TGF-β_1和PDGF-AB浓度,绘制TGF-β_1和PDGF-AB的释放曲线,并采用重复测量方差分析比较不同组别中TGF-β_1和PDGF-AB的释放曲线。结果 (1)全血组与PRP组中TGF-β_1和PDGF-AB在168h内随着时间的推移而持续增高。PRP在与凝血酶混合后,立即形成凝胶状,TGF-β_1和PDGF-AB均立即明显升高,在激活后1 h达到高峰,TGF-β_1和PDGF-AB分别由(42±21)和(77±18)μg/L增至高峰(84±21)和(124±35)μg/L,随后逐渐下降,释放曲线直接而快速;而PRP与氯化钙混合后,约1 h才形成凝胶状,TGF-β_1和PDGFacquired immunity-AB均缓慢持续增高,可在168 h内一直保持较高水平。(2)PRP组中TGF-β_1和PDGF-AB的AUC_(0-168h)均高于全血组(均P<0.05),氯化钙-PRP组中TGF-β_1的AUC_(0-168h)高于凝血酶-PRP组(Z=-2.26,P<0.05),但氯化钙-PRP组与凝血酶-PRP组中PDGF-AB的AUC_(0-168h)比较差异无统计学意义(Z=-1.512,P=0.131)。结论使用氯化钙作为激活剂时富血小板血浆中TGF-β_1和PDGF-AB释放浓度较高,释放时间较长,曲线下面积最大。